|
|
Vývoj a validace HPLC metody pro separaci a stanovení účinných látek v léčivém přípravku Valetol
Ullrichová, Jana ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Vývoj a validace HPLC metody pro separaci a stanovení účinných látek v léčivém přípravku Valetol Jana Ullrichová Abstrakt Byly zpracovány nalezené literární údaje týkající se stanovení paracetamolu, kofeinu a propyfenazonu pomocí metody HPLC. Byla upravena a validována metoda HPLC určená pro stanovení paracetamolu, kofeinu a propyfenazonu v perorálním přípravku Valetol. Byly nalezeny tyto optimální chromatografické podmínky metody HPLC s UV detekcí pro stanovení paracetamolu, kofeinu a propyfenazonu: Kolona - ODS Hypersil, 250x4,6mm, velikost částic 5m Detekce - UV 273 nm Složení mobilní fáze - voda : 2-propanol : diethylamin : methanol (50 + 15 + 3 + 32) upraveno kys. fosforečnou na pH 7,5 Dávkovaný objem - 5l Rychlost průtoku mobilní fáze - 0,5 ml/min. Teplota - laboratorní Izokratický režim Všechny sledované parametry validace metody vyhovují požadavkům na ně kladeným. Tato metoda může být používána při rutinní kontrole a hodnocení kvality přípravku Valetol.
|
|
|
Využití metody sekvenční injekční chromatografie pro separaci a stanovení triamcinolon acetonidu a kyseliny salicylové v léčivém přípravku Triamcinolon-Ivax
Holík, Pavel ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Solich, Petr (oponent)
Využití metody sekvenční injekční chromatografie pro separaci a stanovení triamcinolon acetonidu a kyseliny salicylové v léčivém přípravku Triamcinolon-IVAX Pavel Holík Abstrakt Výsledky měření potvrdily, že sekvenční injekční chromatografii je možné použít pro simultánní stanovení účinných látek v léčivém přípravku Triamcinolon - IVAX. Zjištěné výsledky dokázaly, že je tato nová generace průtokových metod alternativou HPLC v analytických laboratořích při zachování správnosti dosažených výsledků. Optimální podmínky pro analýzu jsou: mobilní fáze acetonitril-voda v poměru 35:65 (v/v), pH 3,3 až 3,4 upraveno přidáním koncentrované kyseliny octové (99%). Množství MF potřebné pro jednu analýzu je 4 ml; množství vzorku k jedné analýze 10 μl; průtoková rychlost pumpy 15 µl.s-1 . Pro analýzu byla použita kolona Onyx™ monolithic C18 (50 x 4,6 mm) s monolitickou předkolonou (5 x 4,6 mm); detekční cela Z o délce optické dráhy 1 cm s podélným směrem paprsku vůči toku; UV-VIS spektrofotometr s nastavenou vlnovou délkou 240 nm; jako vnitřní standard byl použit propylparaben. Metoda vykazovala tyto hodnoty: limit detekce (3σ) pro kyselinu salicylovou 1,00 µg.ml-1 , pro triamcinolon acetonid 0,66 µg.ml-1 a pro propylparaben 0,33 µg.ml-1 ; limit kvantifikace pro kyselinu salicylovou 3,00 µg.ml-1 , pro triamcinolon acetonid...
|
|
|
Stanovení bopindololu technikou sekvenční injekční analýzy s chemiluminiscenční detekcí
Holá, Petra ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Při oxidaci léčiva bopindolol [4-(2-benzoyloxy3-tert-butylaminopropyl)-2-methylindol (I)] manganistanem v prostředí vodné H2SO4 je emitováno chemiluminiscenční (CL) záření. CL signál je zesilován hexametafosfátem. Tato CL reakce byla využita k vypracování automatizovaného stanovení I ve farmaceutických přípravcích technikou sekvenční injekční analýzy (SIA). SIA sytém ovládaný osobním počítačem se skládal z 2,5-ml pístového čerpadla Cavro XL 3000, 10-cestného selekčního ventilu Vici-Valco a průtokového fluorescenčního detektoru Spectra-Physics FS970 doplněného CL detekčním modulem, který byl zhotoven v naší laboratoři. CL signál bopindololu korigovaný slepým pokusem se zvýšil 3-krát (ve srovnání s dávkováním čistě vodného roztoku I) pokud injektovaný vzorek obsahoval 60% (v/v) methanolu. Optimální pořadí, koncentrace a objemy aspirovaných zón reaktantů byly: 80mM Na hexametafosfát ( 61l), I v 60% (v/v) methanolu (60 l), 30mM H2SO4 (40 l) a 0,5mM KMnO4 (9 l). Kalibrační křivka vyjadřující závislost intensity CL (výška píku) na koncentraci bopindololu byla lineární v rozsahu 1 - 8 M I; limit detekce (S/N = 3) byl 0,2 M I. Frekvence dávkování vzorků byla 100 h-1 . Opakovatelnost výšek píků byla charakterizována hodnotou RSD 1,8% pro 15 nástřiků 8 M I. Navržená SIA-CL metoda byla použita ke...
|
|
|
Stanovení fluoridů ve vzorcích zubních past pomocí SIA systému
Barvínková, Zuzana ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Zuzana Barvínková Konzultant: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název rigorózní práce: Stanovení fluoridů ve vzorcích zubních past pomocí SIA systému Stanovení fluoridů v zubních pastách bylo testováno pomocí SIA systému. Ke stanovení byla využita reakce hlinitých iontů s aluminonem za vzniku červeného komplexu. Po přidání roztoku fluoridů byly hlinité ionty z tohoto komplexu vytěsněny. Detekce byla provedena spektrofotometricky. Kalibrační závislost pro stanovení fluoridu sodného byla lineární v rozmezí 3.10-3 až 1.10-2 mol.l-1 NaF. Byla hodnocena opakovatelnost měření pro slepý roztok (voda) a roztoky fluoridu sodného 5.10-3 mol.l-1 a 6,25.10-3 mol.l-1 . Opakovatelnost stanovení se pohybovala mezi 1,19 - 3,70 %, a byla tedy dostatečná. Dále byly vybrány potenciálně interferující ionty, které mohou rušit stanovení fluoridů. Podle složení běžně dostupných zubních past jde o Cl- , Br- , I- , Ca2+ , PO4 3- , Zn2+ , CO3 2- , Al3+ , CH3COO- , Sn2+ , vinanový anion, citronanový anion, laurylsulfátový anion, sorbitol a methylparaben. Mezi interferující ionty, ovlivňující stanovení už v malé koncentraci, patří Ca2+ , CO3 2- , Al3+ , Sn2+ , citronan, laurylsulfát a methylparaben. V testovaných pastách jsou...
|
|
|
Vývoj a aplikace afinitního nosiče pro izolaci lidských karbonyl-redukujících enzymů
Andrýs, Rudolf ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Šebela, Marek (oponent) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Rudolf Andrýs Školitel: Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Název disertační práce: VÝVOJ A APLIKACE AFINITNÍHO NOSIČE PRO IZOLACI LIDSKÝCH KARBONYL-REDUKUJÍCÍCH ENZYMŮ Již po několik tisíciletí tvoří základ lidské medicíny malé bioaktivní molekuly, které byly podávány ve formě rostlinných extraktů nebo syntetický připravených sloučenin. Jejich využití v moderní lékařské vědě ovšem není možné bez detailního porozumění jejich biochemických účinků a identifikace jejich molekulárních cílů. Metody chemické proteomiky, založené na specifické interakci mezi bioaktivní látkou a cílovou molekulou, patří v současné době k nejpoužívanějším technikám při identifikaci molekulárních cílů malých molekul. Oproti klasickým biochemickým metodám (např. 2D elektroforéza) se jedná o citlivé a především velmi selektivní techniky, díky kterým lze z komplexních biologických vzorků úspěšně identifikovat i biomolekuly, které se přirozeně vyskytují jen ve velmi malých koncentracích. Takovými biomolekulami jsou i karbonyl-redukující enzymy, které představují fyziologicky důležitou skupinu proteinů, jelikož se podílí na metabolismu řady endogenních (např. prostaglandiny, steroidní hormony) i xenobiotických (např....
|
|
|
Monolitní stacionární fáze pro HPLC stanovení biologicky aktivních látek I.
Krčmová, Lenka ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
VÝVOJ A VALIDACE HPLC METODY PRO STANOVENÍ ESTERŮ RETINOLU V LIDSKÉM SÉRU S VYUŽITÍM MONOLITICKÉ KOLONY Retinol absorpční test je využíván pro monitorování absorpce ve střevě a součastně slouží jako citlivý indikátor poškození střevní sliznice. V této práci byla vyvinuta jednoduchá, rychlá HPLC metoda pro stanovení retinolu, alfa-tokoferolu, retinyl palmitátu a retinyl stearátu v krevním séru. Tato metoda je využívána pro monitorování poškození střevní sliznice cytotoxickými léčivy po retinol absorpčním testu u pacientů s onkologickým onemocněním. Pro vývoj metodiky byla použita HPLC sestava 200LC Perkin Elmer (Norwalk, USA) s detektorem diodového pole. Analyty byly separovány na monolitní stacionární fázi Chromolith Performance RP-18e, 100 x 4.6 mm (Merck, Darmstadt, Německo). Látky byly sepoarovány pomocí gradientové eluce s následujícími parametry: Průtok: 3 ml min-1 Mobilní fáze 1 methanol:voda (95:5) v 0-2.1 minutě Mobilní fáze 2 methanol:2-propanol (60:40) v 2.1-4.9 minutě. Celkový čas analýzy: 6 minut Nátřik: 20 μl Teplota: 25žC Retinol byl detekován při 325nm, α-tokoferol při 295nm a estery retinolu při 330nm. Metoda byla kompletně validována.
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.