|
|
Mikroextrakce oxazepamu tuhou fází z plasmy
Raška, Martin ; Sochor, Jaroslav (vedoucí práce) ; Štěrbová, Petra (oponent)
Mikroextrakce oxazepamu tuhou fází z plasmy Rigorózní práce Mgr. Martin Raška Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv, Heyrovského 1203, Hradec Králové Tato rigorózní práce se zabývá problematikou extrahování účinných látek z biologického materiálu. Konkrétně je zaměřena na extrahování oxazepamu z 10 % plasmatického roztoku užitím mikroextrakce tuhou fází (SPME) a následnou analýzou extrahovaného podílu za pomoci vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC). Mikroextrakce tuhou fází je ideální metodou pro zpracování biologického materiálu. Jedná se o jednoduchou a účinnou techniku přípravy vzorku, která v sobě integruje sorpci, desorpci a zkoncentrování analytu, nevyžaduje užití rozpouštědel ani složitých aparatur. Jednoduchou podstatou této metody je vystavení kapalného či plynného vzorku malému množství extrakční fáze. Extrakce byla v praktické části této práce prováděna z plasmatického roztoku a k jejímu provedení bylo využito polydimethylsiloxan/divinylbenzenové vlákno (PDMS/DVB). S výjimkou kvantitativního hodnocení se k extrakcím využívalo plasmatických roztoků o koncentraci oxazepamu 0,1 mg/ml. V první části praktického oddílu se zjišťovaly optimální extrakční podmínky. Změny pH plasmatického roztoku k vyšším i nižším...
|
|
| |
|
|
UHPLC-MS/MS analýza vybraných léčiv v biologickém materiálu
Motyčka, Filip ; Štěrbová, Petra (vedoucí práce) ; Váňová, Nela (oponent)
Bisdioxopiperazinový derivát dexrazoxan (dále jen DEX) je jediné klinicky užívané léčivo proti kardiotoxicitě způsobené antracykliny. Prvotní studie přišla s myšlenkou, že DEX je proléčivo, které je v kardiomyocytech enzymatickou hydrolýzou piperazinového kruhu aktivováno na metabolit označovaný ADR-925. Nicméně další výzkum prokázal, že skutečným mechanismem účinku je deplece topoizomerázy IIβ způsobené samotným DEX. Za účelem detekce DEX a jeho metabolitu byla vyvinuta bioanalytická metoda na HPLC-MS/MS systému. Tato metoda trvá 30 minut, což je na požadavky moderních bioanalýzy poměrně dlouhá doba. Cílem tohoto projektu byla snaha vyvinout a validovat rychlejší metodu využívající UHPLC-MS/MS schopnou detekovat DEX a ADR-925 v plasmě. Veškerý vývoj probíhal na UHPLC systému ve spojení s hmotnostním spektrometrem s trojitým kvadrupólem s ESI ionizací v pozitivním módu (obojí Shimadzu). Jako stacionární fáze byly testovány ZORBAX Bonus-RP (100 mm × 3.0 mm, 1.8 μm), Luna Omega Polar C18 (100 mm × 2.1 mm, 1.6 μm) a Kinetex F5 column (100 mm × 2.1 mm, 1.7 μm). Testované mobilní fáze byly směsi acetonitrilu či methanolu s různými koncentracemi mravenčanu amonného nebo kyselinou mravenčí při isokratické i gradientové eluci. Nejlepších výsledků bylo dosaženo na koloně Kinetex F5 s 1mM mravenčanem amonným...
|
|
|
Analýza léčiv a potenciálních léčiv v biologickém materiálu s využitím kapalinové chromatografie
Reimerová, Petra ; Štěrbová, Petra (vedoucí práce) ; Kujovská Krčmová, Lenka (oponent) ; Žďárová Karasová, Jana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Mgr. Petra Reimerová Školitel: doc. PharmDr. Petra Štěrbová, Ph.D. Název: Analýza léčiv a potenciálních léčiv v biologickém materiálu s využitím kapalinové chromatografie Bioanalytické metody hrají významnou roli již při vývoji nových léčiv. Stanovení koncentrace sledovaného léčiva v biologických matricích může totiž pomoci odhalit jeho mechanismus účinku, určit hodnoty základních farmakokinetických parametrů nebo studovat osud potenciálního léčiva během in vitro experimentů. Vzhledem ke komplexnosti biologických vzorků a nízkým koncentracím studovaných látek je velmi důležitá úprava vzorku před samotnou analýzou. V moderní bioanalýze mají významné zastoupení miniaturizované formy úpravy vzorku odvozené od klasických extrakčních technik, které umožní snížit spotřebu biologického vzorku i laboratorního materiálu na minimum a usnadňují případnou automatizaci procesu. Jednou z výrazných oblastí ve vývoji nových léčiv je v současnosti léčba onkologických onemocnění. Vývoj vysoce účinných protinádorových léčiv a prodloužení délky přežití pacientů s sebou bohužel přinesly riziko vzniku pozdních komplikací spojených s protinádorovou léčbou, včetně závažných nežádoucích účinků jako je...
|
|
|
Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení vybraných léčiv v biologickém materiálu
Reguli, Adam ; Štěrbová, Petra (vedoucí práce) ; Lochman, Lukáš (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutickej chémie a farmaceutickej analýzy Kandidát: Adam Reguli Konzultant: PharmDr. Hana Bavlovič Piskáčková, Ph.D. Vedúci diplomovej práce: doc. PharmDr. Petra Štěrbová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Vývoj UHPLC-MS/MS metódy na stanovenie vybraných liečiv v biologickom materiáli Dexrazoxan je liečivo využívané na potlačenie kardiotoxicity spôsobenej antracyklínovými chemoterapeutikami. ICRF-193 bol syntetizovaný ako nový, efektívnejší analóg dexrazoxanu. Bolo zistené, že inhibícia topoizomerázy Ⅱ, ktorá je potrebná pre kardioprotektívny účinok, je sprostredkovaná R,S diastereoizomérom (ICRF-193), zatiaľ čo racemická zmes R,R a S,S enantiomérov je takmer bez účinku. Napriek tomu, naše in vitro experimenty s racemickou zmesou vykazovali určitý kardioprotektívny efekt. Cieľom tejto práce bolo 1) overiť možnú rolu kontaminácie štandardu racemickej zmesi určitým množstvom ICRF-193 a 2) vyvinúť extrakcie na pevnú fázu (SPE) pre ICRF-193 a jeho metabolit (ICRF-193met) z plazmy. Na separáciu ICRF-193 a racemátu bol použitý UHPLC systém spojený s hmotnostným spektrometrom typu trojitý kvadrupól s ionizáciou elektrosprejom v pozitívnom móde, Bonus-RP kolóna (100 × 3,0 mm; 1,8 μm) a kyselina mravčia s metanolom ako mobilná fáza. Analýza...
|
|
|
UHPLC-MS/MS analýza vybraných léčiv v biologickém materiálu
Motyčka, Filip ; Štěrbová, Petra (vedoucí práce) ; Váňová, Nela (oponent)
Bisdioxopiperazinový derivát dexrazoxan (dále jen DEX) je jediné klinicky užívané léčivo proti kardiotoxicitě způsobené antracykliny. Prvotní studie přišla s myšlenkou, že DEX je proléčivo, které je v kardiomyocytech enzymatickou hydrolýzou piperazinového kruhu aktivováno na metabolit označovaný ADR-925. Nicméně další výzkum prokázal, že skutečným mechanismem účinku je deplece topoizomerázy IIβ způsobené samotným DEX. Za účelem detekce DEX a jeho metabolitu byla vyvinuta bioanalytická metoda na HPLC-MS/MS systému. Tato metoda trvá 30 minut, což je na požadavky moderních bioanalýzy poměrně dlouhá doba. Cílem tohoto projektu byla snaha vyvinout a validovat rychlejší metodu využívající UHPLC-MS/MS schopnou detekovat DEX a ADR-925 v plasmě. Veškerý vývoj probíhal na UHPLC systému ve spojení s hmotnostním spektrometrem s trojitým kvadrupólem s ESI ionizací v pozitivním módu (obojí Shimadzu). Jako stacionární fáze byly testovány ZORBAX Bonus-RP (100 mm × 3.0 mm, 1.8 μm), Luna Omega Polar C18 (100 mm × 2.1 mm, 1.6 μm) a Kinetex F5 column (100 mm × 2.1 mm, 1.7 μm). Testované mobilní fáze byly směsi acetonitrilu či methanolu s různými koncentracemi mravenčanu amonného nebo kyselinou mravenčí při isokratické i gradientové eluci. Nejlepších výsledků bylo dosaženo na koloně Kinetex F5 s 1mM mravenčanem amonným...
|
|
|
Využití LC-MS v bioanalýze antracyklinů a potenciálních kardioprotektiv
Bavlovič Piskáčková, Hana ; Štěrbová, Petra (vedoucí práce) ; Bosáková, Zuzana (oponent) ; Hroch, Miloš (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmaceutické Chemie a Farmaceutické Analýzy Kandidát: Mgr. Hana Bavlovič Piskáčková Konzultant: doc. PharmDr. Radim Kučera Ph.D. Školitel: doc. PharmDr. Petra Štěrbová Ph.D. Název: Využití LC-MS v bioanalýze antracyklinů a potenciálních kardioprotektiv Spojení kapalinové chromatografie s hmotnostní detekcí (LC-MS) představuje téměř ideální analytický nástroj pro bioanalýzu léčiv. Toto spojení umožňuje identifikaci a kvantifikaci léčiv s vysokou selektivitou a citlivostí a současně poskytuje informaci o struktuře testovaných látek. Nedílnou součástí bioanalytické metody je také úprava biologického vzorku před analýzou, jejíž cílem je izolace analytů, odstranění balastních látek z matrice a ideálně zakoncentrování vzorku. V současné době je při úpravě vzorku kladen důraz nejen na efektivnost, rychlost, jednoduchost a opakovatelnost metody, ale současnými trendy jsou zejména automatizace procesu, vysoká propustnost vzorků laboratoří a nízká spotřeba organických rozpouštědel, tedy dodržení principů zelené chemie. Dexrazoxan (DEX) je jediným schváleným léčivem indikovaným pro prevenci chronické kumulativní kardiotoxicity způsobené antracykliny (ANT) - hojně užívanými protinádorovými chemoterapeutiky. Vývoj nových a účinnějších...
|
|
|
Využití LC-MS v bioanalýze antracyklinů a potenciálních kardioprotektiv
Bavlovič Piskáčková, Hana ; Štěrbová, Petra (vedoucí práce) ; Bosáková, Zuzana (oponent) ; Hroch, Miloš (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmaceutické Chemie a Farmaceutické Analýzy Kandidát: Mgr. Hana Bavlovič Piskáčková Konzultant: doc. PharmDr. Radim Kučera Ph.D. Školitel: doc. PharmDr. Petra Štěrbová Ph.D. Název: Využití LC-MS v bioanalýze antracyklinů a potenciálních kardioprotektiv Spojení kapalinové chromatografie s hmotnostní detekcí (LC-MS) představuje téměř ideální analytický nástroj pro bioanalýzu léčiv. Toto spojení umožňuje identifikaci a kvantifikaci léčiv s vysokou selektivitou a citlivostí a současně poskytuje informaci o struktuře testovaných látek. Nedílnou součástí bioanalytické metody je také úprava biologického vzorku před analýzou, jejíž cílem je izolace analytů, odstranění balastních látek z matrice a ideálně zakoncentrování vzorku. V současné době je při úpravě vzorku kladen důraz nejen na efektivnost, rychlost, jednoduchost a opakovatelnost metody, ale současnými trendy jsou zejména automatizace procesu, vysoká propustnost vzorků laboratoří a nízká spotřeba organických rozpouštědel, tedy dodržení principů zelené chemie. Dexrazoxan (DEX) je jediným schváleným léčivem indikovaným pro prevenci chronické kumulativní kardiotoxicity způsobené antracykliny (ANT) - hojně užívanými protinádorovými chemoterapeutiky. Vývoj nových a účinnějších...
|
|
|
Využití moderních separačních metod pro klinické účely
Honegrová, Barbora ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Malíř, František (oponent) ; Štěrbová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát Mgr. Barbora Honegrová Školitel prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Název disertační práce Využití moderních separačních metod pro klinické účely Předložená práce se zabývá vývojem metod pro stanovení vitamínů A a E v biologickém materiálu pomocí kapalinové chromatografie. V teoretickém úvodu jsou popsány bioanalytické přístupy ke stanovení analytů ze vzorku v komplexních matricích - zejména problematika úpravy vzorku před analýzou, separační chromatografické přístupy využívané v analýze a dále jsou zevrubně diskutovány principy validace bioanalytických metod. Cílové analyty jsou charakterizovány jak z chemického, tak funkčního hlediska. Experimentální část obsahuje tři oddíly. Dva se zabývají vývojem chromatografických metod s cílem zjistit nejvhodnější podmínky pro stanovení vitamínu A a E v různých biologických materiálech - sérum, lipoproteinové vrstvy a mateřské mléko v klinickém hodnocení v rámci Fakultní nemocnice Hradec Králové. Třetí část pak sleduje stabilitu vitamínů v mateřském mléce a vliv pasterizace (62,5 řC po dobu 20 minut) a skladování na jejich hladiny. 1. Byla provedena studie vhodnosti různých typů UHPLC kolon (monolitická kolona II. generace, kolony plněny celoporézními a povrchově...
|
|
|
Analýza léčiv a potenciálních léčiv v biologickém materiálu s využitím kapalinové chromatografie
Reimerová, Petra ; Štěrbová, Petra (vedoucí práce) ; Kujovská Krčmová, Lenka (oponent) ; Žďárová Karasová, Jana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Mgr. Petra Reimerová Školitel: doc. PharmDr. Petra Štěrbová, Ph.D. Název: Analýza léčiv a potenciálních léčiv v biologickém materiálu s využitím kapalinové chromatografie Bioanalytické metody hrají významnou roli již při vývoji nových léčiv. Stanovení koncentrace sledovaného léčiva v biologických matricích může totiž pomoci odhalit jeho mechanismus účinku, určit hodnoty základních farmakokinetických parametrů nebo studovat osud potenciálního léčiva během in vitro experimentů. Vzhledem ke komplexnosti biologických vzorků a nízkým koncentracím studovaných látek je velmi důležitá úprava vzorku před samotnou analýzou. V moderní bioanalýze mají významné zastoupení miniaturizované formy úpravy vzorku odvozené od klasických extrakčních technik, které umožní snížit spotřebu biologického vzorku i laboratorního materiálu na minimum a usnadňují případnou automatizaci procesu. Jednou z výrazných oblastí ve vývoji nových léčiv je v současnosti léčba onkologických onemocnění. Vývoj vysoce účinných protinádorových léčiv a prodloužení délky přežití pacientů s sebou bohužel přinesly riziko vzniku pozdních komplikací spojených s protinádorovou léčbou, včetně závažných nežádoucích účinků jako je...
|
host ::
RSS.