|
|
Hodnocení exprese ICAM-1 a P-selektinu v aortě myší s vysokými hladinami sérového endoglinu pomocí Western blot analýzy.
Uhlířová, Barbora ; Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Autor: Barbora Uhlířová Školitel: PharmDr. Jana Rathouská, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení exprese ICAM-1 a P-selektinu v aortě myší s vysokými hladinami sérového endoglinu pomocí Western blot analýzy Cíl práce: Detekce a následné vyhodnocení exprese adhezních molekul ICAM-1 a P- selektinu v aortě dvou skupin transgenních myší lišících se hladinami lidského sérového endoglinu, které byly krmeny speciální dietou s vysokým obsahem tuku a cholesterolu. Metody: Použili jsme 6 měsíců staré samice transgenních myší schopných exprese lidského endoglinu, který po odštěpení do cirkulace (tzv. solubilní endoglin - sENG) bylo možné stanovit pomocí ELISA analýzy a rozdělit myši do dvou skupin - sledovaná (vysoké hladiny sENG) a kontrolní (velmi nízké hladiny sENG). Oběma skupinám byla po dobu 3 měsíců podávána speciální dieta s vysokým obsahem tuku a cholesterolu. Byla provedena biochemická analýza (hladiny celkového cholesterolu) a Western blot analýza molekul ICAM-1 a P-selektinu v homogenátu myších aort. Výsledky: Biochemická analýza celkového cholesterolu v krvi neprokázala statisticky významné rozdíly v naměřených hodnotách mezi oběma zkoumanými skupinami myší. Western blot analýza prokázala...
|
|
|
Současné postupy v diagnostice, léčbě a prevenci infekce vyvolané methicilin rezistentními kmeny bakterie Staphylococcus aureus (MRSA)
Korejsová, Erika ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Vejsová, Marcela (oponent)
Autor: Erika Korejsová Vedoucí práce: Mgr. Klára Konečná, Ph.D. Konzultant: MUDr. Marie Smolíková Název: Současné postupy v diagnostice, léčbě a prevenci infekce vyvolané methicilin rezistentními kmeny bakterie Staphylococcus aureus (MRSA) Bakalářská práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Biologických a lékařských věd Studijní obor: Zdravotnická bioanalytika Staphylococcus aureus je bakterie, která se nachází na nosní sliznici zdravých lidí (20-40%) a na kůži, aniž by způsobovala onemocnění. Za určitých okolností, například při poškození či poranění kůže, sliznic a při snížené obranyschopnosti jedince, může vzniknout infekce. Proto jsou hospitalizovaní pacienti k této infekci mnohem vnímavější. Největší nebezpečí představují kmeny MRSA (methicilin-rezistentní Staphylococcus aureus). Jedná se většinou o multirezistentní kmeny Staphylococcus aureus, kde se kromě rezistence k oxacilinu (methicilinu) vyskytuje i rezistence k dalším antibiotikům. Léčba těchto pacientů je problematická, protože MRSA jsou kmeny značně odolné a přetrvávají v organizmu a v prostředí. Jejich eradikace není jednoduchá. Často při snížené hladině antibiotik v krvi pacienta dochází k reinfekci. To znamená značné finanční náklady pro zdravotnická zařízení, zvláště nemocnice. Proto se zde...
|
|
|
Identifikace membránově lokalizovaných nativních peptidů intracelulární bakterie Francisella tularensis
Hrebíková, Hana ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Pávková, Ivona (oponent)
Bc. Hana Hrebíková Identifikace membránově lokalizovaných peptidů nativních proteinů bakterie Francisella tularensis Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Odborný pracovník v laboratorních metodách Cíl práce: Cílem diplomové práce bylo vyvinout novou metodu vhodnou pro stanovení koncentrace peptidů v biologickém vzorku a identifikace membránově asociovaných proteinů bakterie Francisella tularensis (F. tularensis). Metody: Odzkoušení metod bylo nejprve provedeno na standardních proteinech alfa kasein a BSA. Proteiny o známé koncentraci byly štěpeny trypsinem a koncentrace získaných peptidů byla měřena modifikovanou a nemodifikovanou metodou mikro BCA (bicinchoninic acid protein assay). Metoda pak byla aplikována na reálný bakteriální vzorek F. tularensis kmen FSC200. Bakteriální peptidy byly získány kultivací celých bakterií v různých časových intervalech v roztoku, který obsahoval trypsin. Tato metoda je v literatuře popisována jako "shaving". Výsledky: Pomocí nemodifikované mikro BCA byla stanovena koncentrace peptidů. Peptidy pak byly separovány HPLC a identifikovány pomocí hmotnostní spektrometrie. Správnost celého postupu dokazuje identifikace dvou bakteriálních peptidů z proteinu s názvem 17 kDa major membrane protein (ZP_0227498). Závěry: Další...
|
|
|
Antimikrobní aditiva a jejich použití v povrchových nátěrových hmotách.
Čechová, Petra ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Petra Čechová Konzultant: PharmDr. Petr Jílek, Csc. Název: Antimikrobní aditiva a jejich použití v povrchových nátěrových hmotách. Cíl práce: Zhodnocení účinnosti fotokatalyticky účinných antimikrobních nátěrů předem neznámého složení dodaných firmou Synpo a.s., Pardubice (AMAc-1, AMAc-2, AMAc- 3, AMAc-4, AMAc-5). Patogenní kmeny: E. coli, S. aureus, P. aeruginosa. Metody: Kontakt bakterií s nátěry ozařovanými UVA zářením (předchozí aktivace nátěru UVA světlem, současná aktivace nátěru pomocí UVA světlem). Kontakt bakterií s nátěry neozařovanými UVA zářením. Výsledky: Grafy znázorňující změnu počtu CFU bakterií v čase. Vyjádření účinnosti (-k), záporná hodnota směrnice přímky lineární regrese grafu. Závěr: Potvrzení nárůstu účinnosti nátěrů po ozáření UVA světlem. Vliv ZnO na pokles počtu CFU bakterií kmene E. coli bez ozáření i po něm. Výrazný pokles počtu bakterií po aktivaci nátěrů pomocí UVA světla. S. aureus kolísání výsledků, přesto jednoznačný pokles CFU bakterií po aktivaci nátěrů pomocí UVA světla. Nejvíce odolný vůči působení aktivovaných nátěrů kmen P. aeruginosa. Vliv různé koncentrace ZnO v nátěru na jeho účinnost. AMAc-1 kontrolní nátěr (bez fotokatalytického ZnO).
|
|
|
Susceptibility profile of biofilms of non-albicans Candida spp. to echinocandins
Pešková, Pavla ; Křivčíková, Lucie (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta Univerzity Karlovy v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidátka: Pavla Pešková Školitelka: Ing. Lucie Křivčíková Diplomová práce: Citlivost biofilmů non-albicans Candida spp. k vybraným echinokandinům Kvasinky rodu Candida jsou jedny z nejčastějších lidských houbových patogenů. Jimi zapříčiněné infekce jsou spojené s výskytem specifické formy růstu zvané biofilm (BF), která vykazuje zvýšenou rezistenci vůči antimykotické léčbě. Jelikož systémové infekce způsobené non-albicans Candida druhy se v posledních letech vyskytují stále častěji, je potřeba se zaměřit na zkoumání jejich citlivosti k různým antimykotikům. Hlavním cílem naší práce bylo zjistit citlivost biofilmů (BF) non-albicans Candida druhů k vybraným echinokandinům. Testovali jsme 3 druhy z rodu Candida - C. lusitaniae, C. guilliermondii a C. krusei a 3 echinokandiny - anidulafungin (AND), caspofungin (CAS) and micafungin (MFG). Echinokandiny mají jedinečný funkční mechanismus. Inhibují funkci enzymu β-1,3-glukan syntetázy. Poškození jeho funkce vede ke ztrátě produkce β-1,3-glukanu, narušení buněčné stěny a ztráty životaschopnosti houbové buňky. V experimentální části jsme jako růstové médium pro BF a planktonické buňky (PL) z rodu Candida použili YNB a RPMI 1640. PL i...
|
|
|
Využití elektromigračních metod v analýze proteinů bakterie F. tularensis
Žáková, Jitka ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Jílek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní program: Zdravotnická bioanalytika Studijní obor: Zdravotní laborant Autor: Jitka Žáková Název práce: Využití elektromigračních metod v analýze proteinů bakterie Francisella tularensis Bakalářská práce Teoretická část této bakalářské práce je věnována stručnému popisu patogenní bakterie Francisella tularensis (taxonomie, morfologie, kultivace, formy onemocnění, zdroje nákazy, epidemiologie) a základní charakterizaci elektromigračních metod (elektroforéza, izoelektrická fokusace, izotachoforéza, kapilární elektroforéza). Praktická část obsahuje postupy a výsledky vybraných elektromigračních experimentů (1DE SDS-PAGE, 2 DE SDS-PAGE). Pro ilustraci důležitosti a významnosti vybraných elektromigračních metod v analýze proteomu bakterie Francisella tularensis byly záměrně vybrány metody, které byly použity v experimentech publikovaných v poslední době v odborných zahraničních časopisech.
|
|
|
Vyšetření krve na infekční nemoci pro transfúzní lékařství. Legislativa různých zemí světa
Dohnalová, Eva ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Řeháček, Vít (oponent)
Autor: Bc. Eva Dohnalová Název práce: Vyšetření krve na infekční nemoci pro transfuzní lékařství Legislativa různých zemí světa Školitel-specialista: MUDr. Martin Šumpík Garant diplomové práce: Mgr. Klára Konečná Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Odborný pracovník v laboratorních metodách V první části diplomové práce je uveden přehled nejčastěji prokazovaných infekčních agens v transfuzní službě. U jednotlivých prokazovaných původců infekčních onemocnění je popsána historie, taxonomie, struktura, možnosti přenosu a nejčastěji volená diagnostika. V druhé části diplomové práce je popsána jedna z oblastí legislativy transfuzního lékařství - vyšetření krve a krevních derivátů na infekční nemoci. Je zde uvedena legislativa některých států Evropské unie (Česká republika, Slovenská republika, Polsko, Německo, Rakousko, Spojené království Velké Británie a Severního Irska a Francie) a Spojených států amerických a jejich vzájemné porovnání.
|
|
|
Tvorba sekrečních aspartátových proteináz u patogenních kvasinek
Šlajchová, Andrea ; Buchta, Vladimír (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidátka: Andrea Šlajchová Školitel: Doc. RNDr. Vladimír Buchta, CSc. Název diplomové práce: Tvorba sekrečních aspartátových proteináz u patogenních kvasinek Cílem práce bylo zjistit vliv farnesolu, quorum sensing molekuly zajišťující mezibuněčnou komunikaci, na produkci sekrečních aspartátových proteináz (Sap) kvasinky Candida albicans. V teoretické části je shrnuta morfologie kandid, faktory virulence, onemocnění způsobené kandidami a jeho léčba. Samostatnou kapitolu tvoří pojednání o sekrečních aspartátových proteinázách a o farnesolu. Testované kmeny pocházely z klinických izolátů Ústavu klinické mikrobiologie FN Hradec Králové a dva kmeny ze sbírky kultur (10231 a 25188). Do testu byl zařazen kmen C. albicans ATCC 10231, u kterého byla prokázána produkce farnesolové kyseliny místo farnesolu. K testování byly použité speciální půdy s rozdílným pH, které obsahovaly jako jediný zdroj dusíku bovinní hemoglobin. Kmeny byly nejprve preinkubovány v přítomnosti exogenního farnesolu a následně naočkovány na testovací půdu o různých koncentracích farnesolu. Výsledky byly odečítány po sedmidenní inkubaci při 37 řC ve vlhké komůrce. Výsledky ukázaly, že že farnesol jako takový, ani v různých...
|
|
|
Změny v expresi genů B buněčné linie Ramos RA-1 po infekci Francisella tularensis
Matyášová, Simona ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Kubelková, Klára (oponent)
Francisella tularensis je fakultativně intracelulární bakterie způsobující onemocnění tularemii různých druhů savců včetně člověka. Je schopná infikovat fagocytující i nefagocytující buňky. V naší práci jsme se zaměřili na studium B buněk, jejichž úloha v infekci F. tularensis byla dlouhou dobu opomíjena. Za posledních 10 let však byly publikovány práce, které poukazují na zapojení B buněk v časné imunitě proti F. tularensis. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jak se mění exprese genů kódujících molekuly cytokinů u B buněk vlivem infekce F. tularensis a vlivem stimulace bakteriálním rekombinantním proteinem IglC a lipopolysacharidem. Tyto změny jsme zkoumali na B buněčné linii Ramos RA-1. Metodou reverzní transkriptázové polymerázové řetězové reakce jsme detekovali geny pro cytokiny IFN-γ, IL-10 a TGF-β. Klíčová slova: Francisella tularensis, B buňky, cytokiny, reverzní transkriptázová polymerázová řetězová reakce
|
|
| |
host ::
RSS.