|
|
Výskyt a úloha nukleových kyselín v procese kultivácie pohlavných buniek počas in vitro fertilizácie
Remešová, Dominika ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Dršata, Jaroslav (oponent)
Analýza morfológie embrya a vývoj vhodných klasifikačných systémov sú nápomocné pri výbere ľudských embryí na prenos. Subjektívne morfologické hodnotenie embryí však nepredpovedá vývojový potenciál embryí s najvyššou pravdepodobnosťou úspešnej implantácie, pretože tá môže zlyhať aj pri morfologicky dokonalých embryách. Predpokladá sa však, že v blízkej budúcnosti bude pri selekcii vhodného embrya na transfer významne pomáhať neinvazívna analýza fyziológie a funkcií embryí pomocou techník ako metabolomika, proteomika, lipidomika, genomika či transkriptomika. Veľký potenciál pre neinvazívne genetické hodnotenie preimplatačných embryí má analýza použitého kultivačného média. Analýza sa zameriava na vylučovanie širokej škály komponentov ako sú špecifické metabolity, proteíny, interleukíny a nukleové kyseliny do kultivačného média, čo môže mať prediktívny charakter najvhodnejšieho embrya pre transfer do uteru.
|
|
|
Studium možného použití sertralinu proti gastrointestinálním nematodám
Vodvárková, Nikola ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Nikola Vodvárková Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název: Studium možného použití sertralinu proti gastrointestinálním nematodám Vlasovka slezová (Haemonchus contortus) je celosvětově rozšířená parazitická hlístice gastrointestinálního traktu malých přežvýkavců, která každoročně způsobuje obrovské škody v živočišné produkci. U svých hostitelů vyvolává onemocnění zvané hemonchóza, pro které je typická především anémie v důsledku velkých ztrát krve. Tyto potíže vedou ke snížení produktivity a v některých případech dokonce i k úmrtí hostitele. Pro terapii hemonchóz se využívá poměrně omezená paleta anthelminticky účinných léčiv, přičemž nové látky přibývají jen vzácně. Vzhledem k masivnímu užívání stejných anthelmintik a vysoké adaptabilitě si parazit v průběhu času vytvořil rozsáhlou rezistenci a léčba tak přestává být účinná. Z tohoto důvodu je třeba hledat nová účinná léčiva s jiným mechanismem účinku. Jednou z možností je testovat anthelmintickou účinnost u běžných léčiv z jiných terapeutických skupin. V této práci byl zkoumán potenciální anthelmintický účinek, metabolismus a toxicita sertralinu, který se běžně využívá pro terapii depresivních a úzkostných onemocnění u lidí. Bylo zjištěno, že...
|
|
|
Vliv vybraných monocyklických monoterpenů na aktivitu a expresi antioxidačních enzymů v lidských játrech
Fišerová, Romana ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Skálová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Uchazečka: Romana Fišerová Školitelka: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv vybraných monocyklických monoterpenů na aktivitu a expresi antioxidačních enzymů v lidských játrech Monocyklické monoterpeny patří mezi sekundární metabolity rostlin, které jsou charakteristické svou vůní a mají široké využití. Přitahují opylovače rostlin, uplatňují se v rostlinné komunikaci, v kosmetickém nebo potravinářském průmyslu. Jsou složkami koření, nápojů a potravin. U některých byla prokázána protinádorová aktivita, avšak neměli bychom zapomínat, že některé mají toxické účinky v různých orgánech lidského organismu, především v játrech. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jaký mají účinek (+)-karvon, (-)-karvon, (+)- isomenthon, (-)-isopulegol a piperiton na aktivitu a expresi mRNA antioxidačních enzymů v lidských játrech. Jaterní tkáň získaná od pacientů obou pohlaví ve věku 50 až 80 let byla použita jako biologický materiál. Nejprve byl hodnocen účinek vybraných monoterpenů (100 µM) na aktivitu enzymů glutathionreduktasy (GR), glutathionperoxidasy (GPx), katalasy (CAT) a glutathion-S-transferasy (GST) v subcelulárních frakcích získaných z lidské jaterní tkáně šesti dobrovolníků. V této části...
|
|
|
The effect of fern extracts on cell line SW480
Zacharská, Andrea ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Skálová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických vied Študentka: Andrea Zacharská Školiteľ: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Pôsobenie extraktov z papradí na bunkovú líniu SW480 Rakovina je jednou z hlavných príčin úmrtí vo svete. Aj napriek tomu, že na trhu máme niekoľko dostupných liekov na liečbu nádorových ochorení, žiaden z nich nie je úplne účinný a bezpečný. Hlavným problémom býva toxicita, ktorú sa odborníci snažia eliminovať hľadaním iných alternatív liečby. Jednou z možností sú aj rastliny a ich sekundárne metabolity s antiproliferatívnymi a antioxidačnými účinkami vzhľadom k tomu, že karcinogenita môže súvisieť aj s voľnými radikálmi. V našom prípade sme pozornosť upriamili práve na antioxidačný, resp. prooxidačný efekt, konkrétne u papradí. V práci sa zameriavame na 4 druhy papradí (Athyrium filix - femina, Dryopteris dilatata, Dryopteris borreri, Blechnum spicant), ktorých extrakty o rôznych koncentráciách sme skúmali ako potenciálne prospešné látky v boji proti oxidačnému stresu na bunkovej línii SW480. Využívali sme metódu s fluorescenčnou sondou H2DCF-DA, ktorá sa používa na detekciu bunkovej produkcie ROS. V prvotnom nastavení experimentu sme ako pozitívnu kontrolu použili roztok TBHP, ktorý sa spolu s jednotlivými extraktami...
|
|
|
Inhibiční účinek anthokyanidinů na jaterní karbonylreduktasu
Hlaváčová, Jitka ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Jitka Hlaváčová Školitel: Prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Inhibiční účinek anthokyanidinů na jaterní karbonylreduktasu Karbonylreduktasa (CBR) je redukční enzym, jenž hraje významnou roli v první fázi biotransformace endogenních i exogenních substrátů. Podílí se na detoxikaci mnoha xenobiotik, mezi nimi i důležitých léčiv. Rozdíly v expresi a aktivitě jaterních biotransformačních enzymů mohou ovlivnit efektivitu a bezpečnost léčby. Cílem této práce bylo porovnat aktivitu a expresi CBR u starých a mladých jedinců, stanovit inhibiční vliv vybraných anthokyanidinů na aktivitu CBR u lidí a potkanů a pro nejsilnější inhibitory určit hodnotu IC50 a typ inhibice. U starých potkanů byla zjištěna významně vyšší aktivita CBR než u mladých potkanů a také se u nich projevila větší interindividuální variabilita. Při měření aktivity CBR u lidských vzorků nebyly zjištěny signifikantní rozdíly v souvislosti s věkem. Anthokyanidiny vykazovaly mírný až středně silný inhibiční vliv na CBR. U lidí byl enzym nejsilněji inhibován delfinidinem (IC50 = 16 µM) a u potkanů pelargonidinem (IC50 = 23 µM). Delfinidin působil jako nekompetitivní inhibitor CBR, zatímco u pelargonidinu byl zjištěn smíšený...
|
|
|
Vliv polyfenonu na vybrané biotransformační enzymy u myší
Skorkovská, Jana ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Jana Skorkovská Školitel: Prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv polyfenonu na vybrané biotransformační enzymy u myší Zelený čaj se ve světě užívá již dlouhá století. Mezi hlavní látky v zeleném čaji patří polyfenolové sloučeniny, například katechiny. V poslední době jsou intenzivně studovány možné pozitivní účinky zeleného čaje a jeho obsahových látek na organismus. Mezi tyto účinky patří i možné snížení obezity a patologických stavů souvisejících s obezitou. Cílem této diplomové práce bylo studovat vliv podávání extraktu ze zeleného čaje (polyfenonu) na aktivitu a expresi vybraných biotransformačních enzymů u normálních a obézních myší. Měření byla provedena v subcelulárních frakcích homogenátu jater a tenkého střeva myších samců. Z 8 experimentálních skupin byly dvě skupiny kontrolní (skupina normálních a obézních myší bez podávání polyfenonu). Třem skupinám normálních myší a třem skupinám obézních myší by podáván polyfenon v krmivu v délce 3 nebo 28 dní ve dvou rozdílných koncentracích (0,1 a 0,01 %). Výsledky ukázaly, že třídenní podávání polyfenonu (v koncentraci 0,1 % v dietě) signifikantně zvýšilo aktivitu enzymu AKR1C u obézních myší. Polyfenon podávaný 28 dní v...
|
|
|
Vliv katechinů na toxicitu vybraných léčiv
Rudolfová, Petra ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Petra Rudolfová Školitel: Prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv katechinů na toxicitu vybraných léčiv Katechiny se řadí mezi flavonoidy a jsou hlavními polyfenolickými sloučeninami zeleného čaje. Katechiny jsou považovány za velmi prospěšné pro lidský organismus. Pozitivně působí na kardiovaskulární systém a snižování hladiny cukru v krvi, mají antikancerogenní účinky, zabraňují tvorbě zubního kazu, mají antibakteriální, antivirové a antioxidační účinky. Katechiny však také mohou inhibovat nebo indukovat významné biotransformační enzymy a tím mohou ovlivňovat jak žádoucí, tak i nežádoucí účinky řady léčiv. V této práci byl zkoumán in vitro vliv několika katechinů (katechin, epikatechin, epigallokatechin, epikatechin-3-gallát a epigallokatechin gallát) a extraktu zeleného čaje Polyfenonu E na toxicitu léčiv. Pro naši studii byly zvoleny doxorubicin a paracetamol a jeho toxický metabolit. Experimenty byly provedeny na střevní nádorové linii HCT-8 a na primární kultuře izolovaných potkaních hepatocytů. K sledování vlivu katechinů byly využity tři různé testy buněčné viability a měření tvorby reaktivních forem kyslíku (ROS). Výsledky ukázaly, že katechiny nemají vliv na...
|
|
|
Metabolismus monepantelu u parazitů a jejich hostitelů
Valát, Martin ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Martin Valát Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Metabolismus monepantelu u parazitů a jejich hostitelů Monepantel (MOP) patří do nové skupiny anthelmintických léčiv - amino- acetonitrilových derivátů. Od běžně používaných širokospektrých léčiv (makrocyklické laktony, benzimidazoly a imidazothiazoly) se liší chemickou strukturou a mechanismem účinku. Z důvodu velmi častého používání léčiv z těchto skupin se u mnoha patogenních parazitů vyvinula rezistence. MOP je účinný i proti parazitům rezistentním na výše zmíněné skupiny. Cílem této studie byla identifikace a porovnání metabolitů první a druhé fáze biotransformace MOP u parazitů (Haemonchus contortus - citlivý kmen ISE a multirezistentní kmen WR) a u jejich hostitelů - ovcí (Ovis aries) prostřednictvím in vivo a ex vivo studie. Pro identifikaci metabolitů byla použita ultra- vysokoúčinná kapalinová chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií (UHPLC/MS). U ovce v in vivo studii bylo detekováno 13 metabolitů MOP první a druhé fáze biotransformace, 7 z nich nebylo dosud popsáno. U parazita v ex vivo studii byly stanoveny pouze 4 metabolity první fáze biotransformace. Byly zjištěny tyto biotransformační reakce...
|
|
|
Modulační účinky quercetinu a rutinu na aktivitu a expresi cytochromu P4501A ve střevních buňkách
Volková, Marie ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Marie Volková Školitel: Doc. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Modulační účinky quercetinu a rutinu na aktivitu a expresi cytochromu P4501A ve střevních buňkách Flavonoidy vznikají jako sekundární metabolity rostlin a jsou denně konzumovány v ovoci a zelenině. Vykazují antioxidační, protizánětlivé, antikarcinogenní a další prospěšné vlastnosti. Jejich potenciální antikarcinogenní vliv je zprostředkován silným antioxidačním působením, může ale zahrnovat i inhibici enzymů metabolizujících xenobiotika na karcinogenní sloučeniny. V této práci byl zkoumán potenciální inhibiční vliv flavonoidů rutinu a quercetinu na aktivitu a expresi cytochromu P4501A (CYP1A) ve střevních buňkách. Quercetin je nejčastěji se vyskytující zástupce flavonoidů a rutin jeho nejběžnější glykosidická forma. CYP1A je zodpovědný za aktivaci řady prekarcinogenních látek přijímaných potravou. Studie byla provedena na střevní linii HCT-8. Enzymová aktivita CYP1A byla měřena stanovením EROD/MROD aktivity, množství proteinu CYP1A bylo stanoveno pomocí Western blottingu. Quercetin v koncentraci 1 µM způsoboval mírné zvýšení EROD/MROD aktivity, vyšší koncentrace quercetinu však aktivitu EROD/MROD výrazně snižovaly....
|
|
|
Účinek brusinkového extraktu na vybrané biotransformační enzymy u normálních a obézních myší
Levorová, Lucie ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Lucie Levorová Školitel: Prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Účinek brusinkového extraktu na vybrané biotransformační enzymy u normálních a obézních myší. Obezita dosahuje v dnešní populaci téměř pandemických rozměrů. Obezita může ovlivnit či pozměnit aktivitu a expresi řady enzymů včetně enzymů biotransformačních, které metabolizují léčiva a jiná xenobiotika. Cílem diplomové práce bylo porovnání aktivity a exprese vybraných biotransformačních enzymů u normálních a obézních myší a testování vlivu brusinkového extraktu v potravě na aktivitu a expresi vybraných biotransformačních enzymů u experimentálních skupin myší. Ke stanovení aktivit vybraných biotransformačních enzymů byly využity spektrofotometrické metody. Množství příslušných proteinů bylo stanoveno pomocí elektroforézy proteinů na polyakrylamidovém gelu (SDS-PAGE) s následným imunoblotingem a chemiluminiscenční detekcí. Z výsledků vyplývá, že obézní myši mají oproti normálním myším změněnou aktivitu některých biotransformačních enzymů. Brusinkový extrakt s vysokým obsahem anthokyanů měl inhibiční účinek na aktivitu některých biotransformačních enzymů u obézních myší. Účinek anthokyanů na redukci hmotnosti u obézních myší...
|
host ::
RSS.