|
|
Alkaloidy Narcissus 'Dutch 'Master' (Amaryllidaceae) a jejich biologická aktivita. II.
Dvořáková, Zdeňka ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Ločárek, Miroslav (oponent)
Dvořáková Zdeňka: Alkaloidy Narcissus 'Dutch Master' (Amaryllidaceae) a jejich biologická aktivita II. Diplomová práce 2016, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie. Náplní této práce byla izolace obsahových látek z vybrané frakce ND-6 získané sloupcovou chromatografií alkaloidního extraktu z Narcissus 'Dutch Master'. Příprava extraktu a sloupcové chromatografie alkaloidního výtřepku byla provedena Mgr. Danielou Hulcovou v rámci svého doktorského studia. Prostřednictvím preparativní TLC byl získán z vybrané frakce ND-6 alkaloid homolykorinového typu (+)-O-methyllykorenin. Jeho struktura byla určena na základě NMR, GC-MS analýzy a optické otáčivosti. Získaná data byla porovnána s údaji v literatuře. U izolovaného alkaloidu byla stanovena jeho cholinesterasová inhibiční aktivita vůči acetylcholinesterase a butyrylcholinesterase. Jeho inhibiční aktivita byla vyjádřena jako IC50 (M) a porovnána se známými standardy galanthaminem, fysostigminem a huperzinem A. Tento alkaloid je vůči cholinesterasám neaktivní (IC50 AChE > 1000 M, IC50 BChE > 1000 M). Na základě získaných výsledků můžeme říct, že se jedná z hlediska inhibice cholinesteras jako potenciálně nevyužitelný v terapii AD. Klíčová slova: Narcissus 'Dutch Master',...
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II.
Malý, Lukáš ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Malý, L.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2014, 49 s. Získaný diethyetherový extrakt Fumaria officinalis L. byl rozdělen na frakce sloupcovou chromatografií za použití lékařského benzínu, chloroformu a ethanolu. Preparativní TLC a krystalizace vedla k izolaci 5 alkaloidů ze zadané frakce. Alkaloidy byly identifikovány na základě GC-MS, 1 H a 13 C NMR spekter, optické otáčivosti a teploty tání jako protopin, kryptopin, (-)-fumaricin, (+)-fumarilin a (+)-parfumidin. Izolované alkaloidy byly testovány na jejich inhibiční aktivitu vůči acetyl- a butyrylcholinesterase a vůči prolyloligopeptidase a tyto aktivity IC50 byly porovnány se standardy. Nejzajímavější aktivitu oproti standardu galanthaminu (IC50 AChE 1,710 ± 0,065 µM, IC50 BuChE 42,30 ± 1,30 µM) vykazoval protopin (IC50 AChE 345,4 ± 24 µM, IC50 BuChE 239,6 ± 22,3 µM) a kryptopin (IC50 AChE 477,71 ± 47,33 µM, IC50 BuChE 270,82 ± 39,12 µM). Žádný z izolovaných alkaloidů nedosahuje takové inhibiční aktivity jako použité standardy. Nejvyšší inhibiční aktivitu POP vykazoval (+)-parfumidin (IC50 POP 99,2 µM), dosahující vyšší aktivity než přírodní...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin V. Alkaloidy Vinca minor L.
Bouz, Lukáš ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Bouz L.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin V. Alkaloidy Vinca minor L. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie. Hradec Králové 2016. Ze suché nati Vinca minor L. (Apocynaceae) byl získán sumární extrakt, který byl rozdělen sloupcovou chromatografií za použití lékařského benzínu, chloroformu a ethanolu na 531 frakcí. Dalším dělením frakcí, následnou preparativní tenkovrstvou chromatografií a krystalizací, byly získány 2 látky alkaloidní povahy s označením LB-2 a LB-3. Látky byly identifikovány pomocí GC/MS, 1 H- a 13 C-NMR spekter a za použití fyzikálně-chemických metod. Z analýzy látek vyplynulo, že se jedná o indolové alkaloidy (+)-vinkaminorein (LB-2) a (+)-vinkamin (LB-3). Obě látky byly podrobeny testování na inhibiční aktivitu vůči lidským cholinesterasám. (+)-vinkamin nevykazoval v porovnání se standardy (galanthamin IC50 AChE: 1,710 ± 0,065 µM, IC50 BChE: 42,30 ± 1,30 µM; huperzin A IC50 AChE: 0,033 ± 0,001 µM) prakticky žádnou aktivitu. Naopak (+)-vinkaminorein ukázal relativně vysokou selektivní inhibici BChE (IC50 = 8,71 ± 0,49 µM), na AChE nepůsobil. Klíčová slova: Vinca minor L., indolové alkaloidy, vinkamin, vinkaminorein, Alzheimerova nemoc, acetylcholinesterasa, butyrylcholinesterasa
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) I.
Kostelník, Jan ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Kostelník J.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) I. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2014, 63 s. Cílem diplomové práce bylo izolační zpracování spojené frakce č. 55-67 (A2) získané ze sumárního alkaloidního extraktu rostliny Fumaria officinalis L. (Fumariaceae). Za pomoci chromatografických metod byly izolovány tři alkaloidy, které byly dále identifikovány pomocí strukturní analýzy (GC-MS, NMR). Tyto tři alkaloidy byly určeny běžnými chromatografickými metodami a poté byly identifikovány na základě strukturní analýzy, optické otáčivostí a teploty tání jako (-)-O-methylfumarofycin, (-)-sinaktin a (-)-stylopin. U izolovaných látek byla stanovena inhibiční aktivita vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase, lidské sérové butyrylcholinesterase a prolyl oligopeptidase. Naměřené hodnoty byly vyjádřeny jako hodnoty IC50 ((-)-stylopin: IC50 AChE a IC50 BuChE > 1000 μM, IC50 POP > 1000 mM; (-)-O-methylfumarofycin: IC50 AChE = 963,10 ± 135,98 µM, IC50 BuChE = 1771,0 ± 380,94 µM, IC50 POP - neměřena; (-)-sinaktin IC50 AChE = 632,0 ± 68,12 µM, IC50 BuChE = 8154,3 ± 981,42 µM, IC50 POP = 52,9 ± 1,8 µM). Žádný z izolovaných alkaloidů nevykazoval...
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II.
Malý, Lukáš ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Malý, L.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2014, 49 s. Získaný diethyetherový extrakt Fumaria officinalis L. byl rozdělen na frakce sloupcovou chromatografií za použití lékařského benzínu, chloroformu a ethanolu. Preparativní TLC a krystalizace vedla k izolaci 5 alkaloidů ze zadané frakce. Alkaloidy byly identifikovány na základě GC-MS, 1 H a 13 C NMR spekter, optické otáčivosti a teploty tání jako protopin, kryptopin, (-)-fumaricin, (+)-fumarilin a (+)-parfumidin. Izolované alkaloidy byly testovány na jejich inhibiční aktivitu vůči acetyl- a butyrylcholinesterase a vůči prolyloligopeptidase a tyto aktivity IC50 byly porovnány se standardy. Nejzajímavější aktivitu oproti standardu galanthaminu (IC50 AChE 1,710 ± 0,065 µM, IC50 BuChE 42,30 ± 1,30 µM) vykazoval protopin (IC50 AChE 345,4 ± 24 µM, IC50 BuChE 239,6 ± 22,3 µM) a kryptopin (IC50 AChE 477,71 ± 47,33 µM, IC50 BuChE 270,82 ± 39,12 µM). Žádný z izolovaných alkaloidů nedosahuje takové inhibiční aktivity jako použité standardy. Nejvyšší inhibiční aktivitu POP vykazoval (+)-parfumidin (IC50 POP 99,2 µM), dosahující vyšší aktivity než přírodní...
|
|
|
Porovnání původní Ellmanovy metody a její modifikace s použitím readeru mikrotitračních destiček
Morávková, Martina ; Macáková, Kateřina (vedoucí práce) ; Siatka, Tomáš (oponent)
Morávková, Martina. Porovnání původní Ellmanovy metody a její modifikace s použitím readeru mikrotitračních destiček. Diplomová práce 2015. Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie. Vedoucí práce: Ing. Kateřina Macáková, Ph.D. Klíčová slova: Ellmanova metoda, acetylcholinesteráza, butyrylcholinesteráza, spektrofotometr, reader mikrotitračních destiček. Ellmanova metoda je často využívaným postupem při měření inhibice cholinesteráz acetylcholinesterázy (AChE) a butyrylcholinesterázy (BuChE). Princip je založený na hydrolýze acetylthiocholinu a butyrylthiocholinu cholinesterázami za vzniku příslušné kyseliny a thiocholinu. Množství thiocholinu je stanoveno spektroforometricky pomocí reakce s 5,5'- dithiobis-2-nitrobenzoovou kyselinou. V této práci byly porovnány výsledky měření ze dvou různých přístrojů (spektrofotometr a reader mikrotitračních destiček) a při různých teplotách (laboratorní teplota a teplota 37 řC). Pro porovnání byly zvoleny látky s různou mírou inhibice obou enzymů: allokryptopin, kalifornidin jodid, eserin, galantamin, huperzin A a tazettin. U kalifornidin jodidu (AChE, BuChE), eserinu (BuChE) a huperzinu A (AChE) byly zaznamenány statisticky významné rozdíly při měření na různých přístrojích a za různých podmínek. Obecně...
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Argemone grandiflora (Papaveraceae)I.
Adamcová, Markéta ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Adamcová, M.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Argemone grandiflora (Papaveraceae) I. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2015. Cílem této práce byla izolace obsahových látek ze sumárního diethyletherového alkaloidního extraktu z Argemone grandiflora Sweet, jejich identifikace a určení inhibiční aktivity vůči lidské acetylcholinesterase, butyrylcholinesterase a prolyloligopeptidase. S využitím chromatografických metod byly získány 4 alkaloidy, které byly identifikovány jako (+)- laudanosin, protopin, (-)-argemonin a (-)-platycerin. Tyto látky byly testovány na jejich inhibiční aktivitu IC50: (+)-laudanosin (IC50 AChE = 617,00 ± 46,55 μM, IC50 BuChE = 644,77 ± 55,52 μM, IC50 POP = dosud nezměřeno); protopin (IC50 AChE = 229,98 ± 21,02 μM, IC50 BuChE = 208,87 ± 17,67 μM, IC50 POP ˃ 1000 μM); (-)-argemonin (IC50 AChE = 4677,75 ± 1241,08 μM, IC50 BuChE = 885,45 ± 119,50 μM, IC50 POP = 337 ± 83,1 μM); (-)-platycerin (IC50 AChE = 223,65 ± 19,61 μM, IC50 BuChE = 1651,25 ± 327,7 μM, IC50 POP = 687 ± 74 μM). V porovnání se standardy galanthaminem (IC50 AChE = 1,710 ± 0,065 μM, IC50 BuChE = 42,30 ± 1,30 μM) a huperzinem A (IC50 AChE = 0,033 ± 0,001 μM, IC50 BuChE > 1000 μM)...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin III. Alkaloidy Narcissus tazetta L.
Panchartková, Markéta ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Panchartková, M.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin III. Alkaloidy Narcissus tazetta L., Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra Farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové, 2015, 67s. Rostliny čeledi Amaryllidaceae obsahují alkaloidy, které mají rozmanité biologické účinky. Je popsán efekt antivirový, protinádorový, antibakteriální, antimalaritický a antifungální. Významná je také inhibiční aktivita lidských ChE. Cílem této diplomové práce byla příprava sedmi alkaloidních extraktů jednotlivých kultivarů rodu Narcissus a jejich GC/MS analýza, díky které byly identifikovány různé strukturní typy alkaloidů čeledi Amaryllidaceae. Nejčastěji identifikované alkaloidy byly homolykorinového, lykorinového, tazettinového a galantaminového typu. Dále byla změřena biologická aktivita vůči lidské acetylcholinesteráze (HuAChE) a butyrylcholinesteráze (HuBuChE). Nejvyšší inhibibiční aktivitu IC50 měl alkaloidní extrakt Narcissus jonquilla cv. New baby s hodnotami vůči HuAChE 13,78 ± 1,48 a vůči HuBuChE 96,12 ± 9,55. Důvodem byl nejspíše nejvyšší obsah galantaminu ze všech kultivarů, který jak je známo, vykazuje vysoké inhibiční aktivity. Inhibiční aktivity ostatních kultivarů byly velmi nízké. Bylo u nich identifikováno pouze nízké...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin I. Alkaloidy Narcissus jonquilla L.
Nováková, Dana ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Nováková D.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin I. Alkaloidy Narcissus jonquilla L. Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra Farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2015, 70 s. Předmětem diplomové práce byla příprava alkaloidního extraktu, za účelem identifikace alkaloidních obsahových látek a stanovení inhibičních aktivit. Tato aktivita má využití v léčbě Alzheimerovy nemoci. Alkaloidní extrakty ze sedmi variet (Sundial, Sundisc, Sweetness, Waterperry, Simplex, Twinkling Yellow, Yazz) rostliny Narcissus jonquilla L. (Amaryllidaceae) byly testovány na acetylcholinesterázovou (HuAChE) a butyrylcholinesterázovou (HuBuChE) inhibiční aktivitu a alkaloidní obsahové látky. 23 alkaloidů bylo stanoveno metodou GC/MS a 10 z nich bylo identifikováno pomocí hmotnostního spektra a retenčních časů. Všechny vzorky vykazovaly obsah galanthaminu, většina vzorků obsahovala lykorin a tazettin. Nadějná inhibiční aktivita vůči HuAChE byla prokázána u Narcissus jonquilla L. cv. Waterperry s hodnotami IC50 6,53 ± 0,88 μg/ml. Nejvyšší inhibiční aktivitu proti HuBuChE vykázal extrakt rostliny Narcissus jonquilla L. cv. Sundisc s hodnotou IC50 5,09 ± 0,64 μg/ml. Klíčová slova: Alzheimerova choroba, Amaryllidaceae, narcis, GC/MS, alkaloidy, acetylcholinesteráza,...
|
|
|
Biologická aktivita obsahových látek rostlin XXIII. Alkaloidy Corydalis cava (L.) SCHWEIGG. et KOERTE a jejich účinek na acetylcholinesterasu a butyrylcholinesterasu.
Kaluzsná, Blanka ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické botaniky a ekologie Kandidát: Bc. Blanka Kaluzsná Školitel: Prof. RNDr. Lubomír Opletal, CSc. Název diplomové práce: Biologická aktivita obsahových látek rostlin XXIII. alkaloidy Corydalis cava (L.) SCHWEIGG. et KOERTE a jejich účinek na acetylcholinesterasu a butyrylcholinesterasu Ze suchých hlíz Corydalis cava (L.) SCHWEIGG. et KOERTE byl připraven diethyletherový extrakt, který obsahoval terciární bazické alkaloidy. Sloupcovou chromatografií a následnou krystalizací byla získána podfrakce značená 2/B, ze které byly preparativní TLC izolovány 3 alkaloidy, které byly na základě výsledků GC/MS a 1 H a 13 C NMR analýzy stanoveny jako (+)-kanadin, (+)-tetrahydropalmatin, domestin. Izolované alkaloidy byly testovány spektrofotometrickou Ellmanovou metodou na inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase (HuAChE) a plazmatické butyrylcholinesterase (HuBuChE). Z izolovaných alkaloidů vykazoval (+)-kanadin, ve srovnání s referenčními látkami, relativně vysokou inhibiční aktivitu vůči HuAChE (12,4 µM). (+)-Tetrahydropalmatin a (+)-domestin nevykazovaly v tomto směru žádnou významnou inhibiční aktivitu, jak vůči HuAChE, tak HuBuChE. Klíčová slova: Corydalis cava, (+)-kanadin, (+)-tetrahydropalmatin,...
|
host ::
RSS.