|
|
Study of sphingosine, dihydrosphingosine and phytosphingosine in skin barrier models
Kubátová, Denisa ; Kováčik, Andrej (vedoucí práce) ; Svačinová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technológie Autor: Denisa Kubátová Školiteľ: PharmDr. Andrej Kováčik, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Názov diplomovej práce: Hodnotenie sfingozínu, dihydrosfingozínu a fytosfingozínu v modeloch kožnej bariéry Stratum corneum (SC), alebo rohová vrstva kože, ktorá sa nachádza v najvrchnejšej časti epidermis, predstavuje kožnú bariéru organizmu. SC je zložené z kornecoytov a intercelulárnej lipidovej matrix, ktorú tvoria najmä ceramidy (Cer), voľné mastné kyseliny (angl. free fatty acids; FFA) a cholesterol (Chol) zastúpené v ekvimolárnom pomere. Látky zo skupiny sfingolipidov - Cer, sú acylované sfingoidné bázy (napríklad sfingozín (S), dihydrosfingozín (dS) či fytosfingozín (P)), mastnou kyselinou (napríklad kyselinou lignocerovou (LIG)). V lipidovej matrix sa nachádzajú aj metabolické produkty Cer (voľné sfingoidné bázy), avšak ich význam na bariérové funkcie SC nie sú úplne známe. Niektoré štúdie ukazujú, že nielen jednotlivé Cer s rôznymi sfingoidnými bázami, ale aj pravdepodobne zvýšená prítomnosť voľných báz, môžu viesť k zmene permeability kožnej bariéry. Cieľom tejto práce bolo hodnotenie vplyvu voľných sfingoidných báz na permeabilitu modelových membrán SC. Bolo pripravených dohromady deväť typov...
|
|
|
Studium látek ovlivňujících propustnost kožní bariéry
Nováčková, Anna ; Zbytovská, Jarmila (vedoucí práce) ; Cvačka, Josef (oponent) ; Doležal, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmaceutické technologie Kandidát Mgr. Anna Nováčková Školitel doc. Mgr. Jarmila Zbytovská, Dr. rer. nat. Název disertační práce Studium látek ovlivňujících propustnost kožní bariéry Kožní bariéra hraje zásadní roli v ochraně lidského organismu a umožňuje tak savcům suchozemský život. Hlavní bariérovou funkci má epidermis díky několika vrstvám buněk, které se postupně diferencují do svého konečného stádia, rohové vrstvy (stratum corneum, SC). SC je tvořeno zrohovatělými keratinocyty (tzv. korneocyty) obklopenými lipidovou matrix. Tato mezibuněčná hmota se skládá z přibližně ekvimolárního množství ceramidů, volných mastných kyselin a cholesterolu. Jsou to látky velmi specifické, tvořené v epidermis z prekurzorů během diferenciace keratinocytů a jejich správné uspořádání do multivrstevných lamel je zásadní pro nepropustnost kožní bariéry. Některé látky nebo faktory však mohou kožní bariéru narušit. Většinou se jedná o narušení nežádoucí, kdy dochází k nerovnováze lipidů, což zapříčiní poruchy a onemocnění kožní bariéry. Avšak existují i látky, které byly cíleně vyvinuty pro reverzibilní narušení kožní bariéry (tzv. enhancery), aby umožnily průnik léčiv při (trans)dermálním podávávání. Cílem této práce bylo studovat obě tyto...
|
|
|
Vliv glukosylsfingosinu na bariérovou funkci kůže a komplexního lipidového modelu kůže
Yanok, Oksana ; Kováčik, Andrej (vedoucí práce) ; Svačinová, Petra (oponent)
ABTRAKT Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technologie Kandidát: Oksana Yanok Školitel: PharmDr. Andrej Kováčik, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv glukosylsfingosinu na bariérovou funkci kůže a komplexního lipidového modelu kůže. Vlastní kožní bariéra, která zajišťuje ochranu před ztrátou vody a škodlivými vlivy vnějšího prostředí, je lokalizována ve stratum corneum. Dominantní skupinou lipidů stratum corneum jsou ceramidy (Cer), které zároveň hrají hlavní roli v zajištění bariérových vlastnosti kůže. Enzymy sfingomyelin-deacyláza a glukosylceramid-deacyláza hydrolyzují amidovou vazbu prekurzorů Cer za vzniku vysoce polárních metabolitů, tzv. lysolipidů. Zvýšená aktivita těchto enzymu je považována za jeden z hlavních faktorů, které vedou ke vzniku řady kožních onemocnění charakterizovaných poruchou kožní bariéry (např. atopická dermatitida). V této práci jsme připravili modelové membrány napodobující zdravou kožní bariéru v ekvimolárním složení (lidské Cer, cholesterol, volné mastné kyseliny) s přídavkem 5 hmotnostních % cholesterol sulfátu. Dále jsme připravili modely, u kterých bylo postupně snižováno množství Cer a nahrazováno hydrofilním lysolipidem glukosylsfingosinem. Permeabilita našich modelů byla hodnocena pomocí čtyř parametrů, tj. ztráty vody,...
|
|
|
Studium látek ovlivňujících propustnost kožní bariéry
Nováčková, Anna ; Zbytovská, Jarmila (vedoucí práce) ; Cvačka, Josef (oponent) ; Doležal, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmaceutické technologie Kandidát Mgr. Anna Nováčková Školitel doc. Mgr. Jarmila Zbytovská, Dr. rer. nat. Název disertační práce Studium látek ovlivňujících propustnost kožní bariéry Kožní bariéra hraje zásadní roli v ochraně lidského organismu a umožňuje tak savcům suchozemský život. Hlavní bariérovou funkci má epidermis díky několika vrstvám buněk, které se postupně diferencují do svého konečného stádia, rohové vrstvy (stratum corneum, SC). SC je tvořeno zrohovatělými keratinocyty (tzv. korneocyty) obklopenými lipidovou matrix. Tato mezibuněčná hmota se skládá z přibližně ekvimolárního množství ceramidů, volných mastných kyselin a cholesterolu. Jsou to látky velmi specifické, tvořené v epidermis z prekurzorů během diferenciace keratinocytů a jejich správné uspořádání do multivrstevných lamel je zásadní pro nepropustnost kožní bariéry. Některé látky nebo faktory však mohou kožní bariéru narušit. Většinou se jedná o narušení nežádoucí, kdy dochází k nerovnováze lipidů, což zapříčiní poruchy a onemocnění kožní bariéry. Avšak existují i látky, které byly cíleně vyvinuty pro reverzibilní narušení kožní bariéry (tzv. enhancery), aby umožnily průnik léčiv při (trans)dermálním podávávání. Cílem této práce bylo studovat obě tyto...
|
|
|
Optimization of the skin barrier model with isolated ceramides of human stratum corneum
Dulanská, Lucia ; Pullmannová, Petra (vedoucí práce) ; Zbytovská, Jarmila (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikálnej chémie Autor: Lucia Dulanská Školiteľ: Mgr. Petra Pullmannová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Optimalizácia modelu kožnej bariéry s obsahom ceramidov izolovaných z ľudského Stratum corneum Stratum corneum (SC), najvrchnejšia vrstva kože, reguluje transkutánne straty vody a chráni pred vonkajšími podmienkami a škodlivými látkami. Skladá sa z zrohovatelých buniek - korneocytov a extracelulárnej lipidovej matrix, ktorá je zodpovedná za bariérové funkcie. Korneocyty sú pokryté kovalentne viazanými lipidmi a vytvárajú tak korneocytárnu lipidovú obálku (CLE). CLE sa považuje za prepojenie extracelulárnych lipidov s korneocytmi a slúži ako predlohová matrica. Naším cieľom bolo optimalizovať model kožnej bariéry simulujúcim taktiež prítomnosť CLE. Lipidová časť modelu bola pripravená z ekvimolárnej zmesi izolovaných ceramidov ľudskej kože (hCer), cholesterolu a voľných mastných kyselín (FFA, buď protonovaných alebo deuterovaných) s 5 % (m/m) cholesterol-sulfátom. hCer sa extrahovali z izolovaného ľudského SC a purifikovali sa stĺpcovou chromatografiou. Zloženie hCer sa stanovilo vysokoúčinnou tenkovrstvovou chromatografiou. Častice silikagélu s reverznou a normálnou fázou slúžili ako model CLE a negatívna kontrola....
|
|
|
Study of sphingosine, dihydrosphingosine and phytosphingosine in skin barrier models
Kubátová, Denisa ; Kováčik, Andrej (vedoucí práce) ; Svačinová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technológie Autor: Denisa Kubátová Školiteľ: PharmDr. Andrej Kováčik, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Názov diplomovej práce: Hodnotenie sfingozínu, dihydrosfingozínu a fytosfingozínu v modeloch kožnej bariéry Stratum corneum (SC), alebo rohová vrstva kože, ktorá sa nachádza v najvrchnejšej časti epidermis, predstavuje kožnú bariéru organizmu. SC je zložené z kornecoytov a intercelulárnej lipidovej matrix, ktorú tvoria najmä ceramidy (Cer), voľné mastné kyseliny (angl. free fatty acids; FFA) a cholesterol (Chol) zastúpené v ekvimolárnom pomere. Látky zo skupiny sfingolipidov - Cer, sú acylované sfingoidné bázy (napríklad sfingozín (S), dihydrosfingozín (dS) či fytosfingozín (P)), mastnou kyselinou (napríklad kyselinou lignocerovou (LIG)). V lipidovej matrix sa nachádzajú aj metabolické produkty Cer (voľné sfingoidné bázy), avšak ich význam na bariérové funkcie SC nie sú úplne známe. Niektoré štúdie ukazujú, že nielen jednotlivé Cer s rôznymi sfingoidnými bázami, ale aj pravdepodobne zvýšená prítomnosť voľných báz, môžu viesť k zmene permeability kožnej bariéry. Cieľom tejto práce bolo hodnotenie vplyvu voľných sfingoidných báz na permeabilitu modelových membrán SC. Bolo pripravených dohromady deväť typov...
|
|
|
Studium volných sfingoidních bází v kožní bariéře
Jarešová, Zuzana ; Kováčik, Andrej (vedoucí práce) ; Vraníková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technologie Autor: Zuzana Jarešová Školitel: PharmDr. Andrej Kováčik, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Název diplomové práce: STUDIUM VOLNÝCH SFINGOIDNÍCH BÁZÍ V KOŽNÍ BARIÉŘE Kožní bariéra, lokalizována ve stratum corneum (SC), se skládá z korneocytů a intercelulární matrix tvořené třemi základními typy lipidových molekul - ceramidy, volnými mastnými kyselinami a cholesterolem, zastoupenými v ekvimolárním poměru. Celkové uspořádání lipidů je organizované a velmi specifické. Ceramidy jsou strukturně tvořeny acylem mastné kyseliny, připojeným na sfingoidní bázi. V malém, ale nezanedbatelném množství lze však v kožní bariéře nalézt i volné sfingoidní báze. Některé studie ukazují, že u poruch kožní bariéry, jako je například atopická dermatitida, dochází k zvýšení jejich obsahu. Ačkoliv se předpokládá, že se volné sfingoidní báze podílejí na vlastnostech kožní bariéry, dodnes není přesně objasněn způsob jejich participace. Nedostatek studií, případně jejich různorodé výsledky, nás přivádí k hlavnímu cíli této práce - objasnit, jakým způsobem volné sfingoidní báze působí na kožní bariéru. V této práci byly připraveny modelové membrány izolací lidského SC ex vivo. Na SC byly aplikováni zástupci volných...
|
|
|
In vitro modely kožní bariéry
Šimek, Matěj ; Zbytovská, Jarmila (vedoucí práce) ; Pullmannová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technologie Student: Matěj Šimek Školitel: doc. Dr. rer. nat. Mgr. Jarmila Zbytovská Název: In vitro modely kožní bariéry Cílem této diplomové práce je prostřednictvím odborné, ověřené a recenzované literatury podat informace o různých typech modelů kůže, na kterých se zkouší permeabilita léčiv, jejich toxicita, dráždivost a další charakteristiky, které je nezbytné znát pro zajištění optimální bezpečnosti, účinnosti a kvality transdermálně podávaných léčiv. Podání léčiv přes kůži skýtá mnoho benefitů oproti klasickému perorálnímu podání. Aplikace tímto způsobem je poměrně snadná a lze ji rychle přerušit, lze také obměnit místo aplikace, ve kterém se má léčivo uvolňovat a je snížené riziko předávkování. Transdermální podání dále umožňuje udržovat konstantní plazmatickou hladinu léčiva v krvi, prodloužit trvání účinku léčiv s krátkým poločasem díky konstantnímu uvolňování a především se takto podané léčivo vyhne "first-pass" efektu jater, tudíž můžeme snížit celkovou podanou dávku. Dále je omezeno riziko interakcí léčiv a jejich nežádoucích účinků, pacient má obvykle dobrou compliance (snadno zjistí, zda si léčivý přípravek nezapomněl vzít) a v neposlední řadě se jedná o vhodnou lékovou formu pro pacienty v bezvědomí, s...
|
|
|
Studium deplece cholesterolu v lidské kožní bariéře
Jančálková, Pavla ; Vávrová, Kateřina (vedoucí práce) ; Nováková, Veronika (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra organické a bioorganické chemie Pavla Audrlická Školitel: prof. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Název diplomové práce: Studium deplece cholesterolu v lidské kožní bariéře Kožní bariéra člověka spočívá v mezibuněčné lipidové matrix nejsvrchnější vrstvy kůže, stratum corneum (SC). Tuto lipidovou matrix tvoří přibližně ekvimolární směs ceramidů (Cer), volných mastných kyselin (MK) a cholesterolu (Chol).1 Cholesterol je nutný pro organizaci lipidů a tvorbu funkční bariéry. Není však znám důvod jeho přítomnosti v množství tak vysokém, že se s ostatními lipidy již nemísí a tvoří separované domény.2 Experimenty na syntetických membránách se sníženým obsahem Chol ukázaly, že pro tvorbu a komplexní funkci lipidové bariéry je dostačující molární poměr Cer:MK:Chol 1:1:0,4.3 Cílem této práce bylo snížit obsah Chol v ex vivo lidském SC a zkoumat vliv takového zásahu na permeabilitu a mikrostrukturu SC. Byla vyvinuta metoda selektivní extrakce Chol ze SC ex vivo od zdravých dárců pomocí methyl--cyklodextrinu (MCD). Obsah Chol byl snížen na 78 % původního množství, extrahované SC nejevilo změny v obsahu Cer a MK. Permeabilita byla studována pomocí měření transepidermální ztráty vody (TEWL), elektrické impedance (EI) a propustnosti pro theofylin...
|
|
|
Synthesis and evaluation of human 6-hydroxyceramides
Majcher, Adam ; Opálka, Lukáš (vedoucí práce) ; Krátký, Martin (oponent)
Názov Diplomovej práce: Syntéza a hodnotenie ľudských 6-hydroxyceramidov Kandidát: Adam Majcher Školiteľ: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Andrej Kováčik, Ph.D Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Skin Barrier Research Group, Katedra organické a bioorganické chemie Ceramidy (Cer) sú súčasťou veľkej rodiny sfingolipidov, ktoré sa nachádzajú vo všetkých ľudských bunkách a hrajú významnú rolu v bunkovej signalizácii. Vo vysokých koncentráciách môžeme Cer nájsť v najvrchnejšej vrstve epidermis, ktorá sa nazýva stratum corneum. Cer spolu s voľnými mastnými kyselinami a cholesterolom (v približne ekvimolárnom pomere), vytvárajú intercelulárnu lipidovú matrix. Hlavnou funkciou stratum corneum je bariérová ochrana organizmu, teda udržanie vodnej a elektrolytovej homeostázy a zábrana vstupu škodlivín do tela. Cer sa skladajú zo sfingoídnej báze a acylovej časti odvodenej od vyššej mastnej kyseliny. Cer odvodené od 6-hydroxysfingozínu (H) patria medzi obzvlášť nezvyčajné sfingolipidy. V porovnaní s Cer odvodenými od sfingozínu, Cer odvodené od 6-hydroxysfingozínu (H-Cer) boli nájdené len v epidermis a taktiež nie sú typické pre všetky cicavce. Funkcia a biosyntéza týchto látok doteraz nie je úplne pochopená. Niekoľko dermatologických študií poukázalo na znížené...
|
host ::
RSS.