|
|
Aktivita bakteriálních enzymů a molekulární mechanismy při dekompozici kostní tkáně
Vočadlová, Michelle ; Sládek, Vladimír (vedoucí práce) ; Mihalčinová, Zuzana (oponent)
Abstrakt Dekompozice kostní tkáně je komplexní proces, ve kterém hrají zásadní roli bakteriální enzymy. Enzymy jsou biologické katalyzátory, které se účastní všech biochemických reakcí v živých organismech. Ve této bakalářské práci jsou identifikovány a charakterizovány bakteriální enzymy účastnící se rozkladu kostní tkáně. Hlavní pozornost je věnována enzymům, kterými jsou různé kolagenázy, které mají klíčovou roli v degradaci organických komponent kosti. Dále jsou v práci popsány molekulární mechanismy, kterými tyto enzymy působí. Práce je zaměřena na specifické interakce mezi bakteriálními enzymy a kostní matrix, včetně adhezivních interakcí a syntézy enzymů reagující na specifické mikroprostředí kostní tkáně. Těmito faktory jsou pH, teplota, a přítomnost potenciálních inhibitorů ovlivňují aktivitu těchto bakteriálních enzymů. Tyto faktory přispívají variabilitě dekompozičních procesů. Následné porozumění molekulárním mechanismům, kterými bakteriální enzymy degradují kostní tkáň, má významné aplikace ve forenzní vědě pro přibližné stanovení času úmrtí, v archeologii pro interpretaci historických a předhistorických nálezů, či v medicíně, kde může mít tento výzkum důležitý význam pro diagnostiku a léčbu onemocnění kostí. Klíčová slova: aktivita enzymů, bakterie, bakteriální enzymy, enzym, kolagen, kost,...
|
|
|
Laboratorní diagnostika microRNA u různých diagnostických skupin
Hrachovcová, Eliška ; Urbánková Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Tripská, Katarína (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Student: Bc. Eliška Hrachovcová Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Jana Rathouská, Ph.D. Konzultant diplomové práce: doc. RNDr. Pavlína Kušnierová, Ph.D. Název diplomové práce: Laboratorní diagnostika microRNA u různých diagnostických skupin Cíl práce: Identifikace potenciálních miRNA cílů pro diferenciální diagnostiku pacientů s aterosklerózou a demencí. Porovnání exprese a záchytu miRNA ve vzorcích séra se vzorky mozkomíšního moku. Výběr vhodných miRNA v rámci diferenciální diagnostiky u pacientů s aterosklerózou a s demencí. Dále také výběr miRNA cílů s co nejvýraznější fold-change a zároveň co nejnižší p-hodnotou pro následnou validační studii. Metody: Pro identifikaci potenciálních miRNA byly přijaté vzorky centrifugovány, alikvotovány a skladovány při - 80C. miRNA byla izolována pomocí kitu iCatcher Circulating cfRNA 1000 kit a izolátoru CatchGene. Poté byla provedena reverzní transkripce a amplifikace s detekcí. Data byla zpracována v Excelu a následně statisticky zpracována v programu GenEx pomocí Mann- Whitney testu. Výsledky: Výsledky byly hodnoceny pro 2 skupiny pacientů: skupinu A (vzorky pacientů s Parkinsonovou nemocí a demencí) a skupina B (s aterosklerózou a demencí). Byla hodnocena...
|
|
|
Imunohistochemická analýza vlivu M1043 na expresi endoglinu u myšího modelu NASH
Kubíčková, Adéla ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Kudláčková, Zděnka (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Adéla Kubíčková Vedoucí bakalářské práce: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Název práce: Imunohistochemická analýza vlivu M1043 na expresi endoglinu u myšího modelu NASH Během nealkoholové steatohepatitidy (NASH) dochází k morfologickým a funkčním změnám endotelových buněk jaterních sinusoid a nastává endotelová dysfunkce. Bylo prokázáno, že při NASH se zvyšuje exprese adhezních molekul (VCAM-1, ICAM-1) a endoglinu. Vlivem endoglinu je zvýšená aktivace jaterních hvězdicových buněk, které prohlubují proces fibrotizace. Cílem této bakalářské práce bylo detekovat expresi endoglinu a adhezní molekuly VCAM- 1 u myšího modelu NASH po 8týdenním podávání CDAA diety (cholin-deficitní a L- aminokyselinami definovaná dieta). Myši byly rozděleny do 2 skupin (n=8). Kontrolní skupině se 4 týdny podávala potkaní protilátka IgG (skupina CDAA+rat IgG) a skupině CDAA+M1043 se aplikovala anti-endoglinová protilátka M1043. Analýza exprese vybraných proteinů byla provedena imunohistochemickou metodou pomocí avidin-biotin metody. Výsledky této práce ukazují, že nedošlo k snížení exprese VCAM-1 ani endoglinu po aplikaci anti-endoglinové protilátky M1043 oproti kontrolní IgG skupině. Exprese VCAM-1 byla...
|
|
|
Vliv atorvastatinu na expresi a funkci endoglinu u endotelové dysfunkce indukované hyperlipidémií
Holadová, Adéla ; Tripská, Katarína (vedoucí práce) ; Fikrová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Vliv atorvastatinu na expresi a funkci endoglinu u endotelové dysfunkce indukované hyperlipidémií Autor: Adéla Holadová Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jakým způsobem atorvastatin ovlivňuje expresi a funkci endoglinu a s ním souvisejících biomarkerů zánětu/endotelové dysfunkce v různých koncentracích a časech u lidských endotelových buněk z aorty, u kterých byla indukovaná hyperlipidémie pomocí kyseliny palmitové. Metody: V diplomové práci jsme pracovaly s lidskými aortálními endotelovými buňkami. Ty jsme premedikovaly atorvastatinem/kyselinou palmitovou v různých časech a koncentracích. Za využití průtokové cytometrie jsme měřily proteinovou expresi endoglinu. Dále jsme využívaly metodu qRT-PCR ke zjištění míry mRNA exprese endoglinu, jeho transkripčních faktorů a biomarkerů zánětu. Pomocí metody ELISA, jsme detekovaly hladiny solubilního endoglinu. Výsledky: Prokázaly jsme, že atorvastatin o koncentraci 5μM po 16h premedikaci signifikantně zvýšil mRNA expresi endoteliální syntázy oxidu dusnatého, a naopak snížil expresi CCL2 (C-C motif chemokine ligand 2). Dále jsme zjistily, že 25μM koncentrace...
|
|
|
Porovnání metod druhové identifikace (barcoding) živočichů
Maťátková, Jana ; Vaněk, Daniel (vedoucí práce) ; Sember, Alexandr (oponent)
Druhová identifikace je klíčovým prvkem v mnoha vědních oborech, od studia diverzity až po forenzní vědy a potravinářský průmysl. Tradiční morfologické metody založené na vizuálním rozlišení anatomických rysů často narážejí na limity spojené s určováním morfologicky podobných živočichů. S nástupem molekulárních metod se však objevila nová perspektiva, a to analýza DNA, která nabízí vyšší přesnost a nezávislost na vnějších faktorech. V této bakalářské práci je popsán podrobný přehled a srovnání různých molekulárních metod, které slouží k identifikaci živočichů. Zaměřuje se na důkladné zhodnocení principů fungování těchto metod a jejich efektivity. Zvláštní pozornost je věnována cílovým sekvencím spojeným s DNA barcodingem, jeho univerzálnímu využití a omezením, která mohou vzniknout v závislosti na konkrétním druhu živočichů. Důležitým prvkem úspěšné identifikace je existence a využívání databází, které slouží jako zdroj referenčních dat pro porovnání sekvencí z neznámých vzorků.
|
|
|
Lidská identita prizmatem moderní vědy: transformace, recepce a aplikace molekulární genetiky ve veřejných diskursech
Urbánek, Daniel ; Hermann, Tomáš (vedoucí práce) ; Švorcová, Jana (oponent)
Tato práce zkoumá, jak pokroky v genomice a molekulární genetice or roku 1990 do současnosti transformují vnímanou lidskou identity ve veřejných diskurzech. Zaměřuji se na to, jak Projekt lidského genomu a navazující výzkum mění veřejné debaty ohledně sociokulturní etnicity, zdraví, etiky a práva. Kombinací multidisciplinárních poznatků z molekulární biologie, sociologie a bioetiky text kriticky zkoumá přelomovou literaturu zmíněného časového rámce. V práci argumentuji, že pokroky v genetice nám nejen umožňují lépe porozumět základům života, ale zároveň nastolují důležité společenské otázky a nutí nás přezkoumávat tradiční způsoby sebepojetí.
|
|
|
Vliv glipizidu na expresi a funkci endoglinu a s ním souvisejících biomarkerů endotelové dysfunkce u diabetu mellitu II. typu
Vochozková, Iva ; Tripská, Katarína (vedoucí práce) ; Urbánková Rathouská, Jana (oponent)
6 ABSTRAKT Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Vliv glipizidu na expresi a funkci endoglinu a sním souvisejících biomarkerů endotelové dysfunkce u diabetu mellitu II.typu Autor: Iva Vochozková Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Katarína Tripská, Ph.D. Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jak glipizid ovlivňuje expresi a funkci endoglinu, jeho transkripčních faktorů a souvisejících biomarkerů endotelové dysfunkce, hladinu solubilního endoglinu a adhezi monocytů na lidské diabetické endotelové buňky koronárních artérií. Metody: V této diplomové práci jsme pracovali s lidskými diabetickými endotelovými buňkami koronárních artérií. Ty jsme v různých časech a koncentracích premedikovali glipizidem. Pomocí průtokové cytometrie jsme měřili proteinovou expresi endoglinu a biomarkerů endotelové dysfunkce. Pomocí průtokové cytometrie jsme měřili také adhezi monocytů k endotelovým buňkám. ELISA metodou jsme detekovali hladiny solubilního endoglinu a pomocí PCR jsme měřili mRNA expresi endoglinu, jeho transkripčních faktorů a markerů zánětu. Výsledky: Prokázali jsme, že premedikace 200µM koncentrací glipizidu vedla ke snížení proteinové exprese endoglinu po 24 i 48 hodinách. Po 24 hodinách došlo taktéž ke zvýšení...
|
|
|
Western blot analýza markerů endotelové dysfunkce v myší aortě po podávání vysokotukové diety
Střelcová, Ivana ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Vitverová, Barbora (oponent)
6 1. ABSTRAKT Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Western blot analýza markerů endotelové dysfunkce v myší aortě po podávání vysokotukové diety Vedoucí práce: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Autor: Ivana Střelcová Cíl práce: Vysoký příjem tuků v potravě bývá spojen se zvýšeným rizikem rozvoje různých metabolických onemocnění včetně zvýšeného kardiovaskulárního rizika. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, zda podávání vysokotukové diety s obsahem 42 % kcal tuku má vliv na expresi vybraných markerů endotelové dysfunkce, která představuje klíčový mechanismus v rozvoji kardiovaskulárních komplikací. Metody: V práci byly sledovány změny v expresi endotelové syntázy oxidu dusnatého (eNOS), endoglinu (ENG), endotelinu-1 (ET-1), intercelulární adhezní molekuly 1 (ICAM- 1) a vaskulární adhezní molekuly 1 (VCAM-1). Experimentální skupině myších samců kmene C57BL/6J ve věku 7 měsíců byla po dobu 12 týdnů podávána vysokotuková dieta s obsahem 42 % kcal tuku. Kontrolní skupina byla krmena standardní laboratorní dietou. K hodnocení pozorovaných markerů endotelové dysfunkce byla použita Western blot analýza s následnou detekcí za využití chemiluminiscenčního činidla. Výsledky: Výsledky ukazují, že nedošlo k signifikantním změnám v expresi...
|
|
|
Biotransformace sekundárních rostlinných metabolitů a jejich modulační účinky na enzymy metabolizující léčiva
Šadibolová, Michaela ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Soukup, Ondřej (oponent) ; Anzenbacherová, Eva (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Školicí pracoviště Katedra biochemických věd Doktorský studijní program Xenobiochemie a patobiochemie Kandidátka / kandidát Mgr. Michaela Šadibolová Školitelka / školitel doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultantka / konzultant Název disertační práce Biotransformácia sekundárnych rastlinných metabolitov a ich modulačné účinky na enzýmy metabolizujúce liečivá Seskviterpény a prenylované flavonoidy predstavujú dve triedy rastlinných sekundárnych metabolitov tvoriace prirodzenú súčasť ľudskej stravy. Majú mnoho prospešných biologických účinkov a sú podľa toho využívané ako aktívne súčasti rastlinných prípravkov. Ako xenobiotiká ale interagujú s množstvom enzýmov metabolizujúcich liečivá, môžu obratom meniť ich aktivitu a/alebo expresiu, čo môže následne vyústiť do liekových interakcií. Seskviterpény a prenylflavonoidy zmienené v tejto dizertácii sú v tomto aspekte málo preskúmané. Tri acyklické seskviterpény (farnezol, cis-nerolidol, trans-nerolidol) a tri cyklické seskviterpény (α-humulén, β-karyofylén, β-karyofylénoxid) aktivovali génovú expresiu sprostredkovanú pregnanovým X receptorom, no nespôsobili významné zmeny v mRNA alebo proteínovej expresii jeho cieľových génov, cytochrómu P450 (CYP) 3A4 a CYP2C, a neovplyvnili ani hlavné...
|
|
|
Nový zákoník, nebo redakce původního? Porovnání českých zemských zřízení z let 1500 a 1549
Stojan, Marek ; Starý, Marek (vedoucí práce) ; Kindl, Vladimír (oponent)
Tato práce se věnuje porovnání dvou klíčových kodifikací českého zemského práva první poloviny 16. století, a to Vladislavského zřízení zemského a Zemského zřízení z roku 1549. Cílem je zodpovědět na otázku, zda je možné na mladší ze zákoníků pohlížet stejně, jak tak činí dosavadní historiografie. Tedy, že Zemské zřízení z roku 1549 je pouhou redakcí Vladislavovy kodifikace. Rád bych se zamyslel nad tím, jestli rozdíly obou děl nedosahují takové míry, že bychom měli spíše hovořit o dvou relativně samostatných zákonících. Faktem je, že oba právní předpisy vznikaly ve velmi odlišném prostředí a působily na ně různé ideové i personální vlivy. Odlišná je také struktura textu a obsahová stránka obou zákoníků. Pro podobu práva obecně, nejen v rámci raného novověku, je klíčové rozložení moci uvnitř státu, což se samozřejmě podepsalo na výsledné podobě obou kodifikací. V první kapitole se zaměřím na zasazení obou zákoníku do celkového právněhistorického kontextu, s důrazem na okolnosti vzniku, průběhu přípravných prací a reálných dopadů na rozložení moci v rámci zemí Koruny české. Pozornost bude také věnována státoprávnímu myšlení v dílech vybraných klasiků. Dalším mým cílem je zaměřit se i na celkový právní vývoj nejen v rámci Českého království, ale i Markrabství moravského. Jsem toho názoru, že tento...
|
host ::
RSS.