|
|
Growth and control of Pseudomonas aeruginosa in a multi-species biofilm
Hutlas, Andrej ; Kučerová, Marta (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Cardiff University, School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences Štúdijný program: Farmácia Kandidát: Andrej Hutlas Konzultanti: PharmDr. Marta Kučerová, Ph.D. (UK); Prof. Jean-Yves Maillard (Cardiff); BSc. Katarzyna Ledwoch Ph.D. (Cardiff) Biofilmy sú základný spôsob rastu väčšiny baktérií. Mikróby sa obalia v matrici, zloženej najmä z extracelulárnych polymérnych zlúčenín. Biofilm sa môže skladať z viacerých druhov baktérií. Prostredie biofilmovej matrice indukuje rozličné fyziologické zmeny, ako zmena do latentného stavu či indukcia biofilm-špecifických génov. Vyzretý biofilm je heterogénny, kvóli rozdielom v spotrebe živín a distribúcii mikróbov naprieč biofilmom. Matrica poskytuje baktériám veľa výhod, napríklad zachytávanie a transport živín alebo ochranu pred extrémnymi podmienkami. Skúmané boli viacdruhové biofilmy z umyvadlového sifonu so zameraním na P. aeruginosa. Tento oportunistický patogén spôsobuje nozokomiálne infekcie, hlavne u imunokompromitovaných pacientov, so značnými zdravotnými a socio-ekonomickými dopadmi. Bola stanovená spojitosť medzi umývadlami a prostredím kontaminovaním P. aeruginosa. Dekontaminácia prostredia môže byť prístup ako znížiť spomínané dopady. Bola vyvinutá nová metodológia na popis vertikálneho...
|
|
|
Pokročilé metody testování antimikrobní aktivity
Dolinská, Dagmar ; Janďourek, Ondřej (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Dagmar Dolinská Školitel: PharmDr. Ondřej Janďourek, Ph.D. Název práce: Pokročilé metody testování antimikrobní aktivity Cíl práce: Cílem práce bylo v teoretické části shrnout aktuální metody testování antimikrobních sloučenin se zaměřením na antimykotika a v praktické části vyhodnotit antifungální aktivitu u 47 testovaných látek pomocí mikrodiluční bujónové metody. Metody: Látky byly testovány kvantitativní mikrodiluční bujónovou metodou na osmi kmenech kvasinek a vláknitých hub. Jednalo se o kmeny Candida albicans, Candida krusei, Candida parapsilosis, Candida tropicalis, Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus, Absidia corymbifera a Trichophyton interdigitale. Výsledky: Nejvyšší antimykotickou aktivitu projevila látka Ac-0a, u které jsme po 24hodinové inkubaci zaznamenali aktivitu proti všem osmi kmenům. U tří kmenů však již nebyla schopná zastavit růst po 48hodinové inkubaci, jednalo se o kmeny Candida parapsilosis, Aspergillus fumigatus a Aspergillus flavus. Další vzorky, u kterých byla zjištěna aktivita, byly Cl-2, kde byla aktivita zaznamenána u kmenů Candida krusei, Aspergillus fumigatus a Trichophyton interdigitale, Cl-3 u všech kmenů kromě Aspergillus flavus a Absidia corymbifera a...
|
|
|
Fylogenetická diverzita kultivovatelných prokaryot z hypersalinních prostředí.
Straková, Dáša ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Kandidát: Dáša Straková Názov diplomovej práce: Fylogenetická diverzita kultivovateľných prokaryot z hypersalinných prostredí. Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd University of Sevilla, Faculty of Pharmacy Department of Microbiology and Parasitology Študijný program: Farmácia Hypersalinné prostredia sú široko distribuované biotopy charakterizované zvýšenými koncentráciami solí, ktoré predstavujú hlavne vodné systémy a hypersalinné pôdy. Ich štúdia umožnila v posledných desaťročiach izoláciu a charakterizáciu veľkého počtu halofilných mikroorganizmov, čo sú mikroorganizmy, ktoré vyžadujú k životu a rastu vysokú koncentráciu solí. Cieľom tejto práce bolo pokračovať v počiatočnej charakterizácii halofilných archeí a baktérií, ktoré izolovala Ana Durán-Viseras v roku 2016 z niekoľkých vzoriek vody zo soľných polí z Isla Cristina a Isla Bacuta (Huelva, Španielsko) a z hypersalinnej pôdy nachádzajúcej sa v lokalite Odiel Saltmarshes (Huelva, Španielsko) a vykonať štúdiu biodiverzity týchto vzoriek. Ana Durán-Viseras začala tento projekt a ja som v ňom pokračovala počas môjho pobytu v Seville. Ako súčasť charakterizácie sme sekvenovali čiastočný 16S rRNA gén izolovaných kmeňov. Pre tie, ktoré boli potenciálne zaujímavé, sme uskutočnili...
|
|
|
Galleria mellonella in vivo model pro studium interakce antimikrobní látka vs. patogen
Polová, Dominika ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Kudláčková, Zděnka (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní program: Zdravotnická bioanalytika Autor: Bc. Dominika Polová Školitel: RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Název diplomové práce: Galleria mellonella in vivo model pro studium interakce an- timikrobní látka vs. patogen Cíl práce: Cílem této studie je zavedení in vivo bezobratlého modelu Galleria mello- nella především pro studium in vivo účinnosti a toxicity nově syntetizovaných slou- čenin s prokázaným antiinfekčním potenciálem. Hlavní část naší práce je věnována optimalizaci podmínek pro laboratorní chov hmyzu, stanovení smrtelných infekč- ních dávek pro larvy bezobratlého hmyzu Galleria mellonella po infekci bakterií Sta- phylococcus aureus rezistentním na methicilin, implementaci metodického přístupu pro hodnocení relativní akutní toxicity kandidátních antiinfekčních sloučenin a za- vedení metodických přístupů pro rutinní histopatologické studie. Metody: Při této studii jsme odchovali larvy Galleria mellonella za stálých labora- torních podmínek (37 ◦ C) a v přítomnosti bohaté nutrice. Použili jsme výsevovou metodu pro získání infekční LD50. V předběžné studii jsme se zaměřili na akutní toxicitu testovaných látek a na optimalizaci metodiky vedoucí k přípravě...
|
|
|
In vitro screening nových, potenciálně antimykoticky účinných sloučenin II
Comová, Kateřina ; Janďourek, Ondřej (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Odborný pracovník v laboratorních metodách Kandidát: Bc. Kateřina Comová Školitel: PharmDr. Ondřej Janďourek, Ph.D. Název diplomové práce: In vitro screening nových, potenciálně antimykoticky účinných sloučenin II Klíčová slova: kvasinky, houby, antimykotika, rezistence, mikrodiluční bujonová metoda, minimální inhibiční koncentrace. Tato diplomová práce se zabývá převážně antimykotickou rezistencí a mechanismem účinku vybraných antimykotik. Teoretická část je zaměřena na obecný přehled týkající se charakteristiky mikroskopických hub a onemocnění, která způsobují. Pozornost je také věnována antimykotickým látkám, které jsou běžně využívány při léčbě mykotických infekcí a dále látkám, které se v současné době nachází v různých fázích klinického hodnocení. S tím je spjat i mechanismus účinku těchto sloučenin, který je zde také popsán. V neposlední řadě shrnuje teoretická část vznik a princip antimykotické rezistence. V závěru teoretické části jsou popsány metody, které se využívají při stanovení in vitro citlivosti mykotických agens vůči antimykotikům. V praktické části je popsán postup kvantitativní mikrodiluční bujónové metody, která byla použita v této diplomové práci. Součástí praktické...
|
|
|
Atopická dermatitida a pokroky v léčbě
Krymová, Lucie ; Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Atopická dermatitida je multifaktoriální chronické zánětlivé onemocnění, které patří mezi jedno z nejčastějších kožních onemocnění. Prevalence je poměrně vysoká a stále roste. Dříve byla atopická dermatitida považována za onemocnění především dětského rázu, dnes se zvyšuje prevalence i u dospělých pacientů. Atopická dermatitida je chronické nevyléčitelné onemocnění s významným negativním dopadem na život pacientů. Negativní dopad na kvalitu života vede často k nedostatečné adherenci pacientů ke standardnímu léčebnému postupu, z čehož plyne nutnost kombinovat různé terapie v oblasti komplementární a alternativní medicíny. I když stále není k dispozici dostatek dat k vytvoření závěru, že adjuvantní terapie jsou účinné v konvenčním smyslu, existují již slibné výsledky, které naznačují, že tyto terapeutické strategie by mohly být v léčbě tohoto onemocnění určitou alternativou. I když mírné a střední formy onemocnění mohou být dobře kontrolovány použitím zevní léčby, jako jsou změkčovadla, topické kortikosteroidy a lokální inhibitory kalcineurinu, léčba těžké atopické dermatitidy je stále obrovskou výzvou. Systémová léčba kortikosteroidy je v mnoha případech poměrně účinnou léčbou, ale nedá se využívat dlouhodobě kvůli četným nežádoucím účinkům. Podobně je tomu v případě léčby imunosupresivy. V...
|
|
|
Přehled metodických přístupů vedoucích ke kvalitativnímu a kvantitativnímu hodnocení mikrobiálních biofilmů
Holmanová, Pavlína ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Vejsová, Marcela (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Zdravotní laborant Autor: Pavlína Holmanová Školitel: RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Název bakalářské práce: Přehled metodických přístupů vedoucích ke kvalitativnímu a kvantitativnímu hodnocení mikrobiálních biofilmů Cíl práce: Cílem této práce bylo zpracovat přehled metodických přístupů vedoucích ke kvalitativnímu a kvantitativnímu hodnocení mikrobiálních biofilmů. Dále pak provést optimalizaci metodiky vedoucí k přípravě preparátů s biofilm-formujícími mikroorganismy hodnocenými prostřednictvím epifluorescenční, případně konfokální laserové skenovací mikroskopie. Metody: Optimalizace metodiky barvení mikrobiálních biofilmů pro následné hodnocení epifluorescenční mikroskopií. Formování mikrobiálních biofilmů - kultivace mikroorganismů v různých kultivačních mediích v mikrotitrační destičce, příprava roztoků s fluorescenčními barvivy. Pozorování barevných dispergovaných biofilmů fluorescenčním mikroskopem. Výsledky: Pomocí fluorescenční mikroskopie byly ověřeny optimální cílové koncentrace fluorescenčních barviv v různých kombinacích. Pro určení viability mikrobiálních buněk formujících biofilm se osvědčila kombinace barviv Syto 9 (SYTO™ 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain) a...
|
|
|
Rotaviry jako původci průjmových onemocnění
Hampl, Tomáš ; Vejsová, Marcela (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Autor: Tomáš Hampl Název práce: Rotaviry jako původci průjmových onemocnění Bakalářská práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Studijní obor: Zdravotní laborant Cíl práce: Tato bakalářská práce má za cíl, zabývat se problematikou rotavirů, taxonomicky je zařadit, popsat jejich strukturu, vlastnosti, vznik a průběh onemocnění, které způsobují. Dále popsat laboratorní diagnostiku onemocnění, možnosti terapie a prevence. V experimentální části se práce bude věnovat epidemiologii rotavirových infekcí ve Fakultní nemocnici v Hradci Králové v období mezi lety 2010-2017 a jejich vyhodnocení. Hlavní poznatky: Rotaviry jsou velmi často původcem vážných a nebezpečných průjmů u dětí do 5 ti let, včetně kojenců a batolat. Podle WHO zemře ročně na tuto infekci přes půl miliónu dětí na celém světě, přičemž dětí onemocní kolem 150 miliónů. Proto je velice důležitá včasná diagnostika a vhodná terapie. Dospělý člověk se může rovněž nakazit, průběh onemocnění je ale daleko mírnější než u dětí. Závěry: Důležitá prevence vzniku a šíření rotavirových infekcí vyžaduje dodržování důkladné osobní hygieny, zejména mytí rukou. Protože infekce vzniká nejčastěji v dětských kolektivech, je nutná v případě rozšíření infekce dezinfekce prostředí, hraček, nábytku a dalších předmětů. Základem...
|
|
|
Optimalizace metody vedoucí k hodnocení citlivosti biofilm formujících stafylokoků vůči kandidátním antimikrobním látkám
Diepoltová, Adéla ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Jílek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní program: Zdravotnická bioanalytika Autor: Bc. Adéla Diepoltová Školitel: RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace metody vedoucí k hodnocení citlivosti biofilm formujících stafylokoků vůči kandidátním antimikrobním látkám Cíl práce: Cílem práce bylo optimalizovat postup in vitro formace stafylokokových biofilmů na kolíčcích a v jamkách šestadevadesáti jamkové mikrotitrační destičky dle vzoru komerčně dostupného systému The Calgary Biofilm Device. V Experimentu 1 bylo třeba optimalizovat podmínky inkubace (vlivu média, módu inkubace, optické denzity počáteční bakteriální suspenze a vlivu místa formace biofilmu v rámci systému) vedoucí k maximálnímu nárustu biofilmové masy dvou stafylokokových kmenů s neznámým biofilmovým fenotypem a u jednoho kmene definovaného jako silný pruducent biofilmu. Nejvhodnější kombinace podmínek byla využita při inkubaci klinických izolátů v Experimentu 2. Sbírkové klinické izoláty bylo cílem rozdělit do kategorií dle schopnosti formace biofilmu. Práce by měla navrhovat postup in vitro formace maximálně objemných stafylokokových biofilmů vhodných k hodnocení citlivosti vůči kandidátním antimikrobním látkám. Metody: Hodnocení schopnosti...
|
|
|
Vaginální mikrobiota a její vliv v těhotenství
Mašátová, Eva ; Vejsová, Marcela (vedoucí práce) ; Konečná, Klára (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Autor: Eva Mašátová Školitel: Mgr. Marcela Vejsová, Ph.D. Název práce: Vaginální mikrobiota a její vliv v těhotenství Tato práce vznikla za účelem shrnutí poznatků o vaginální mikrobiotě obecně a v rámci těhotenství. Práce se zabývá popisem jednotlivých mikroorganismů přirozeně se vyskytujících ve vaginálním prostředí a jejich výskytem v populaci. Dále jsou v práci popsány diagnostické metody a techniky využívající se v gynekologii pro vyšetření vaginálního prostředí. V poslední části je popsána antimikrobní léčba a její změny v těhotenství. Vaginální mikrobiota je pestrý a různorodý ekosystém každé ženy, který se během jejího života mění podle nejrůznějších vlivů. V těhotenství se v případě kolonizace pacientky výrazně zvyšuje riziko vážných komplikací jako je předčasný porod nebo infekce dítěte. V případě kolonizace pacientky nejde jednoznačně určit, zdali se jedná již o patologický stav či ne. Ve vaginálním prostředí se přirozeně vyskytují zástupci rodu Streptococcus, Staphylococcus, Gardnerella, Candida, Ureaplasma, Mycoplasma a další. Jednoznačně patogen prokážeme především podle hustoty jeho kolonizace pomocí diagnostických metod a podle dalších obtíží pacientky. Klíčová slova: Vaginální...
|
host ::
RSS.