|
|
Imunohistochemie jako nástroj pro fenotypizaci buněk
Hajzlerová, Petra ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Soukup, Tomáš (oponent)
10 Abstrakt Autor: Petra Hajzlerová, DiS. Název: Imunohistochemie jako nástroj pro fenotypizaci buněk Bakalářská práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Studijní obor: Zdravotní laborant Cílem této práce bylo podat informace o fenotypizaci buněk ve tkáních pomocí imunohistochemie. Pro fenotypizaci buněk se používá řada imunohistochemických metod, které jsem chtěla porovnat, definovat jejich výhody a doplnit jednotlivé metody obrázky. Imunohistochemie je založena na detekci tkáňového/buněčného antigenu pomocí specifických protilátek. Tyto specifické protilátky bývají nejčastěji označovány enzymem a fluorochromem, méně častěji radionuklidem a denzními partikulemi. Nejběžněji se provádí imunofluorescence za pomocí fluorochromů a enzymatická imunohistochemie za pomocí enzymů. Imunohistochemické metody lze rozdělit na přímé a nepřímé metody. Nejvíce využívané v laboratorní praxi jsou nepřímé metody a to především metody založené na interakci mezi avidinem a biotinem (LAB a ABC). Již méně se využívají metody založené na interakci enzym anti-enzym. Velkou oblibu v laboratorní praxi má použití metod na bázi rozpustné- ho polymeru - např. EPOS a EnVision. Pro amplifikaci signálu se používá tyramidů. Tyto metody jsem ve své práci porovnala a zjistila jejich výhody a nevýhody pro...
|
|
|
Vliv vysokých hladin solubilního endoglinu na morfologii jater u myší.
Burešová, Petra ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Kudláčková, Zděnka (oponent)
Autor: Petra Burešová Název: Vliv vysokých hladin solubilního endoglinu na morfologii jater u myší. Bakalářská práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Studijní obor: Zdravotní laborant Endoglin (CD 105) představuje integrální transmembránový protein o celkové velikosti 180 kDa. Je charakteristický svou spoluúčastí v signalizační kaskádě transformujícího růstového faktoru β (TGF-β) díky své roli koreceptoru tohoto faktoru. Kromě membránového endoglinu byla popsána jeho solubilní forma (sol-Eng), která se uvolňuje do krevní cirkulace po odštěpení extracelulární části endoglinu. Recentně bylo popsáno, že endoglin je důležitým faktorem v rozvoji fibrózy v selhávajícím myokardu i v játrech. Cílem naší práce bylo zjistit přítomnost fibrózy v játrech transgenních myší. Pomocí histologické techniky a barvení na kolagenní vazivo jsme hodnotili rozvoj fibrózy u transgenních myší s vysokými hladinami lidského solubilního endoglinu krmených standardní laboratorní dietou nebo vysokotukovou dietou, v porovnání s kontrolními zvířaty s nízkými hladinami lidského solubilního endoglinu. Výsledky histologického hodnocení ukazují, že vysoké hladiny solubilního endoglinu nemají žádný vliv na rozvoj fibrotických změn v játrech. Nicméně bude zajímavé další hodnocení exprese jednotlivých...
|
|
|
Vliv C-reaktivního proteinu na endotel v aortě spontánně hypertenzních potkanů
Kosán, Aleš ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Doleželová, Eva (oponent)
VLIV C-REAKTIVNÍHO PROTEINU NA ENDOTEL V AORTĚ SPONTÁNNĚ HYPERTENZNÍCH POTKANŮ Diplomová práce Autor: Aleš Kosán Studijní obor: Farmacie Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Endotelová dysfunkce a chronický zánět jsou faktory hrající roli v patogenezi metabolického syndromu. Tato práce je koncipována jako pilotní studie, jejímž cílem je navrhnout další směr zkoumání v oblasti vlivu C-reaktivního proteinu na endotel. Pomocí metody Western blot byla sledována exprese čtyř látek, v minulosti spojených se vznikem endotelové dysfunkce: endotelinu-1, hemoxygenázy-1, endoglinu a fosforylované syntázy oxidu dusnatého. Měření bylo provedeno na vzorcích z homogenizovaných potkaních aort transgenních spontánně hypertenzních potkanů exprimujících lidský C reaktivní protein. Jako kontrolní skupina byl využit kmen standardních spontánně hypertenzních potkanů. Detekce byla provedena pomocí chemiluminiscenčního substrátu na RTG filmy a získaná data byla semikvantitativně vyhodnocena denzitometrickou metodou. U endoglinu jsme zaznamenali zvýšenou expresi v hodnotě 186,3 % oproti kontrolní skupině. Exprese fosforylované formy endotelové syntázy představovala 325,6 % v porovnání s kontrolní skupinou. U hemoxygenázy-1 byl nárůst exprese minimální (109,0 %) a exprese endotelinu-1 byla...
|
|
|
Vplyv solubilného endoglínu na cievny endotel
Ďaďovská, Lucia ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Abstakt Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Vplyv solubilného endoglínu na cievny endotel Diplomová práca Lucia Ďaďovská Vedúci práce: doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Cieľ práce: V tejto diplomovej práci sme sledovali vplyv solubilného endoglínu na expresiu adhéznej molekuly VCAM-1 a výskyt makrofágov v stene descendentnej aorty myšieho modelu. Analýza prebehla pomocou imunohistochemických metód s fluorescenčnou detekciou. Metódy: Boli použité geneticky modifikované myši s vysokou produkciou ľudského solubilného endoglínu (Sol-Eng+), zatiaľčo myši s nízkou hladinou solubilného endoglínu tvorili kontrolnú skupinu. Obe skupiny boli rovnakého veku a počas celého experimentu prebiehajúceho tri mesiace boli na vysokotukovej diéte. K analýze výsledkov boli pripravené tkanivové rezy a použité imunohistochemické metódy s detekciou vo fluorescenčnom mikroskope. Výsledky: Imunohistochemicky sa nepreukázal výskyt makrofágov v zhotovených tkanivových rezoch descendentnej aorty myší kontrolnej skupiny ani myší Sol-Eng+. Imunohistochemická analýza expresie VCAM-1 v descendentnej aorte nepoukazuje na žiadne rozdiely v sile a lokalizácii expresie VCAM-1 medzi kontrolnou skupinou a myšami Sol- Eng+. Detekovali sme silnú expresiu výhradne na povrchu...
|
|
|
Vliv Sunitinibu na expresi ICAM-1 u normotenzních a hypertenzních potkanů
Frnochová, Lenka ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Mgr. Lenka Frnochová Vliv Sunitinibu na expresi ICAM-1 u normotenzních a hypertenzních potkanů Rigorózní práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Kvantifikovali jsme expresi ICAM-1 v aortě normotenzních Wistar Kyoto potkanů a spontánně hypertenzních potkanů při užívání sunitinibu. Pro kvantifikaci jsme aplikovali stereologické a imunohistochemické metody. Metody: Pro výzkum jsme používali inbrední samce Wistar Kyoto potkanů a spontánně hypertenzních potkanů. Potkani obou kmenů byli rozděleni do dvou skupin - skupina se sunitinibem a kontrolní skupina. Experimentální skupina přijímala sunitinib v pitné vodě v dávce 10 mg/kg denně a potkani v kontrolní skupině dostávali pouze pitnou vodu. Spontánně hypertenzní potkani přijímali sunitinib po 8 týdnů a po 5 dnech regenerace opětně dostávali do vody sunitinib po dalších 8 týdnů. Wistar Kyoto potkani dostávali nejprve také 8 týdnů sunitinib do vody, ale po 5 dnech regenerace, sunitinib byl podáván těmto potkanům už jenom 2 týdny z důvodu toxicity a snížení váhy. Imunohistochemická analýza byla použita na aortě potkana. K detekci exprese ICAM-1 byla užita metoda En Vision s detekcí prostřednictvím DAB. Výsledky: Imunohistochemické barvení prokázalo, že exprese ICAM-1 byla vyšší u potkanů, kteří byli...
|
|
|
Změna exprese transportních proteinů během obstrukční cholestázy u potkanů II
Skořepová, Zuzana ; Doleželová, Eva (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
4 Abstrakt Zuzana Skořepová Změna exprese transportních proteinů během obstrukční cholestázy u potkanů II Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíle práce: Cílem diplomové práce bylo ověření cholestatického poškození jater navozené podvazem žlučovodu po dobu trvání 28 dnů u potkanů analýzou exprese efluxních transportních proteinů v játrech (Bsep, Bcrp, Mrp2, Mdr1, Mdr2, Mrp3, Mrp4) na úrovni mRNA a proteinu. Metody: Potkani kmene Wistar (n = 6, v každé skupině; 280 - 320 g) byli rozděleni do dvou skupin: kontrolní skupina sham-operovaných potkanů (Sham) a BDO skupina (obstrukce žlučovodu v trvání 28 dnů). Byla provedena analýza exprese efluxních transportních proteinů na úrovni mRNA a proteinu metodou qRT-PCR a Western blot. Výsledky: Ve skupině BDO bylo pozorováno významné zvýšení mRNA exprese u Mdr2 proteinu na 303 %, Mdr1b na 340 % a Mrp3 na 9900 % v porovnání s kontrolní skupinou. Exprese Mrp2 mRNA byla snížena na 42 %. Významné zvýšení exprese proteinu ve skupině BDO bylo prokázáno u Bcrp na 160 %, Mdr1 na 1010 %, Mrp3 na 940 % a Mrp4 na 140 % v porovnání se Sham skupinou. Exprese proteinu byla významně snížena u Mrp2 na 31 %, Bsep na 59 % a Mdr2 na 82 % v porovnání s kontrolní skupinou. Závěr: Z výsledků diplomové práce vyplývá, že při obstrukční...
|
|
|
Sociální stratifikace panství Horšovský Týn v 17. - 19. století
Němečková, Ivana ; Šedivá Koldinská, Marie (vedoucí práce) ; Maur, Eduard (oponent)
Diplomová práce je zaměřena na životní poměry poddaného obyvatelstva na západočeském panství Horšovský Týn v 17. - 19. století. Těžiště práce spočívá v 17. století. Geograficky je panství vymezeno rozlohou uvedenou v berní rule - 1 město, 54 vesnic a 5 částí vsí. Práce se skládá ze čtyř základních částí. V první je blíže popsána základní literatura k tématu a pramenná základna. Druhá část je věnována stručnému historickému a územnímu vývoji panství a charakteristice správních a hospodářských poměrů. Ve třetím oddíle je na základě analýzy soupisu poddaných podle víry podrobně rozebrána demografická struktura panství v polovině 17. století. Pozornost je částečně věnována i sociální struktuře, především podružské vrstvě a čeledi, a okrajově je zmíněna také typologie a složení domácností. Dále je proveden odhad vývoje počtu obyvatel na panství Horšovský Týn od poloviny 17. do konce 19. století. Poslední část práce se soustředí na sociální stratifikaci panství a její proměny od poloviny 17. do poloviny 19. století. Na základě majetkového kritéria jsou určeny a popsány jednotlivé sociální vrstvy. Je sledováno jejich zastoupení ve společnosti a měnící se sociální skladba panství.
|
|
|
Impregnační metody - stříbření - a jejich význam v diagnostické a transplantační patologii
Květoň, Martin ; Semecký, Vladimír (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Stránka 1 z 1 Abstrakt Martin Květoň Impregnační metody - stříbření - a jejich význam v diagnostické a transplantační patologii Bakalářská práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Zdravotnická bioanalytika - zdravotní laborant Impregnační histologické techniky, jsou založené na sycení tkáňových řezů solemi kovů. Nejčastěji využívané stříbřící techniky pak pro impregnace využívají iontů stříbra. Produktem těchto metod je elementární stříbro, redukované "in situ" na různých tkáňových komponentách. (Newman, a další, 1998) Cílem této bakalářské práce bylo přehledně zpracovat problematiku nejběžnějších impregnačních metod. Uvést jejich využití v diagnostické patologii a předložit metodiku těchto technik. Sekundárním cílem je zhodnotit jejich přínos a význam v běžné histopatologické praxi. Úvodní část obsahuje obecné informace o impregnačních metodách a jejich využití. Teoretická část obecná se věnuje principu zkoumaných metod, speciální část pak prokazovaným strukturám a obecnému popisu histologického zpracování. V metodické části jsou podrobně popsány vybrané stříbřící metody a jejich výsledky. Závěry ukázaly, že cíle práce byly naplněny a že impregnační metody jsou důležitým nástrojem v histopatologické diagnostice. Dodnes jsou rutinně používány a významně se podílí na určování...
|
|
|
Imunohistochemická detekce makrofágů v aterosklerotických plátech arteria brachiocephalica I
Škodová, Sabina ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Sabina Škodová Imunohistochemická detekce makrofágů v aterosklerotických plátech arteria brachiocephalica. Bakalářská práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Zdravotní laborant Cíl práce: Cílem této bakalářské práce bylo nastavit imunohistochemické metody pro detekci makrofágů v arteria brachiocephalica apoE/LDLR receptor deficientních myší. Práce se dále zaměřuje na kvantifikaci exprese těchto makrofágů u skupiny myší, které byla podávána standardní dieta a u myší, kterým byla podávána dieta s nízkým obsahem sacharidů a vysokým obsahem proteinů Metody: Ke studii byly použity samice apoE/LDLR deficientní myši rozdělené do dvou skupin (v každé skupině bylo 6 myší). Jedné skupině byla podávána standardní dieta (kontrolní skupina) a druhé skupině byla podávána dieta s nízkým obsahem sacharidů a vysokým obsahem proteinů (LCHP). Tato dieta byla myším podávána 8 týdnů. Následně byla na řezech arteria brachiocephalica provedena imunohistochemická analýza, využívající ke zviditelnění makrofágů metodiku Immpress s detekčním činidlem diaminobenzidin (DAB). Poté byla provedena biochemická a stereologická analýza. Výsledky: Biochemická analýza prokázala zvýšení hladin celkového cholesterolu u myší krmených LCHP dietou. Imunohistochemická analýza prokázala přítomnost makrofágů v...
|
|
|
Imunohistochemická detekce eNOS v aterosklerotických plátech arteria brachiocephalica
Klimešová, Kateřina ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci králové Katedra biologických a lékařských věd Kateřina Klimešová Vedoucí práce: Doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Název diplomové práce: Imunohistochemická detekce eNOS v aterosklerotických plátech arteria brachiocephalica Cíl práce: Sledovali jsme expresi endoteliální NO syntázy (eNOS) v arteria brachiocephalica u apoE/ LDLR-/- deficientních myší po podávání vysokoproteinové stravy s nízkým obsahem cukrů (LCHP). Metody: Pro tuto práci byly použity myši s deficientním apoliporoteinem E a LDL receptorem, které jsou náchylné k rozvoji aterosklerózy. Myši byly rozděleny do 2 skupin po 6. Jedné skupině (kontrolní skupina) byla podávána běžná strava západního typu, druhá skupina byla krmena vysokoproteinovou dietou s nízkým obsahem cukrů (LCHP). Bylo provedeno stanovení celkového cholesterolu, exprese eNOS byla hodnocena imunohistochemicky a stereologicky. Výsledky: Biochemická analýza prokázala zvýšení celkového cholesterolu myší krmených LCHP dietou oproti kontrolní skupině. Imunohistochemickou analýzou byla potvrzena exprese eNOS na endotelu kryjícím aterosklerotický plát i na intaktním endotelu u obou skupin myší. Stereologická analýza neprokázala významné zvýšení exprese eNOS u myší v LCHP skupině oproti kontrolní skupině. Závěr: Bylo...
|
host ::
RSS.