|
|
Studium nových fotosensitizérů ze skupiny ftalocyaninů a azaftalocyaninů pro fotodynamickou léčbu nádorových onemocnění
Macháček, Miloslav ; Šimůnek, Tomáš (vedoucí práce) ; Řezáčová, Martina (oponent) ; Mosinger, Jiří (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát Mgr. Miloslav Macháček Školitel doc. PharmDr. Tomáš Šimůnek, Ph.D. Název disertační práce Studium nových fotosensitizérů ze skupiny ftalocyaninů a azaftalocyaninů pro fotodynamickou léčbu nádorových onemocnění Fotodynamická terapie (PDT) nádorů je neinvazivní metoda určená k léčbě solidních nádorů. Jejími základními složkami jsou molekulární kyslík, světlo a fotosensitizér (PS) - komponenty samy o sobě netoxické, ale v kombinaci vedoucí k tvorbě reaktivních forem kyslíku (ROS; především singletového kyslíku), které poškozují buněčné struktury a vedou k buněčné smrti. Způsob, jakým je nádorová buňka zničena závisí především na typu PS, délce ozáření a lokalizaci léčiva, protože singletový kyslík je vysoce reaktivní a je schopen jen minimální difúze v biologických systémech. Kromě přímého cytotoxického působení PS se na eradikaci nádoru podílí také poškození cév (deprivace živin a kyslíku) a aktivace imunitního systému. V současné době se při návrhu struktur PS přistupuje buď vytvářením vhodné kombinace dostatečně aktivní látky a nosičového systému, tvorbou cílených konjugátů, nebo syntézou látek s vysokou aktivitou a minimální mírou tvorby agregátů ve vodném prostředí. V naší práci jsme se zaměřili...
|
|
|
Studium fenotypu H9c2 buněk odvozených od potkaních srdečních myoblastů
Kutichová, Martina ; Šimůnek, Tomáš (vedoucí práce) ; Vostatková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Martina Kutichová Školitel: Doc. PharmDr. Tomáš Šimůnek, Ph.D. Školitel-specialista: Doc. MUDr. Michaela Adamcová, Ph.D. Název diplomové práce: Studium fenotypu H9c2 buněk odvozených od potkaních srdečních myoblastů V experimentálních in vitro studiích hrají nezastupitelnou úlohu izolované kardiomyocyty, které jsou považovány za "zlatý standard". V současné době stoupá také popularita permanentních buněčných linií H9c2. Přestože jsou tyto buňky známy už od poloviny sedmdesátých let, jejich fenotyp příliš prozkoumán není. Tato studie navázala na výsledky "shotgun" proteomické analýzy, která identifikovala cca 1500 proteinů. Cílem diplomové práce bylo tedy rozpracování získaných proteomických výsledků se zaměřením na detekci konkrétních proteinů pomocí metody Western blot.Proliferující a neproliferující H9c2 buňky byly studovány na přítomnost několika svalově a/nebo srdečně specifických proteinů. Výsledky byly porovnány s daty získanými na primárních neonatálních potkaních kardiomyocytech (NVCM) a na vzorcích z levé komory dospělého potkana. Analýza Western blotem neprokázala žádný významný rozdíl v zastoupení studovaných proteinů mezi proliferujícími ani neproliferujícími H9c2 buňkami. Navíc...
|
|
|
Studium vybraných chelátorů železa pro prevenci oxidačního stresu u buněčné linie PC12
Homola, Pavel ; Šimůnek, Tomáš (vedoucí práce) ; Jirkovská, Anna (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Pavel Homola Školitel: doc. PharmDr. Tomáš Šimůnek, Ph.D. Název diplomové práce: Studium vybraných chelátorů železa pro prevenci oxidačního stresu u buněčné linie PC12 Parkinsonova nemoc (PD) je progresivní neurodegenerativní chorobou s motorickými symptomy (třes, rigidita, akineze, posturální poruchy), které jsou spojeny s úbytkem dopaminergních neuronů v Substatia nigra pars compacta. S patologickými procesy nemoci je silně spojen oxidační stres, který je iniciátorem či součinitelem patologických kaskád. Oxidační stres má vliv i na řadu jiných onemocnění (např. kardiovaskulární nemoci). Jeho základem je působení reaktivních sloučenin kyslíku (ROS). Nejběžnější a nejtoxičtější sloučeninou je hydroxylový radikál, který vzniká nejčastěji reakcemi katalyzovanými volnými ionty železa (Fentonova reakce). Protektivně působí proti oxidačnímu poškození tkání chelátory železa, které chelatací iontů brání jejich katalytickému působení. Předložená práce se zabývá stanovením toxicity a protektivních účinků klinicky používaných chelátorů železa (deferoxamin - DFO, deferipron - L1 a deferasirox - ICL670A) in vitro na buněčné linii PC12, která zde slouží jako model dopaminergních neuronů a PD, s použitím...
|
|
|
Proteomová charakterizace hostitelské buňky po interakci s intracelulárním pathogenem Francisella tularensis
Římalová, Pavla ; Šimůnek, Tomáš (vedoucí práce) ; Klimentová, Jana (oponent)
Diplomová práce Proteomová charakterizace hostitelské buňky po interakci s intracelulárním patogenem Francisella tularensis. Pavla Římalová Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd 2009 Francisella tularensis (F. tularensis) je intracelulární gram-negativní bakterie navozující u člověka závažné onemocnění tularémii. Je příkladem bakterie, jejíž mechanismy patogeneze nebyly doposud zcela popsány. K jejich objasnění by mohla významně přispět proteomová charakterizace interakce mezi hostitelem a patogenem. Cílem diplomové práce bylo odhalit změny proteinové výbavy u buněk myší makrofágové linie J774.2, vystavených působení bakterie F. tularensis za použití kvantitativní "shotgun" proteomové technologie. Proteom buněk infikovaných F. tularensis ve třech různých časových intervalech (6, 12 a 24 hodin) byl porovnán s proteomem buněk neiinfikovaných. Pomocí komerčního kitu ProteoExtract Subcellular Extraction Kit (S-PEK, Calbiochem) byly připraveny čtyři subcelulární frakce. Frakce obohacená o cytosolové proteiny byla dále analyzována a kvantifikována prostřednictvím iTRAQ-HPLC- MS/MS techniky. Tímto přístupem se podařilo identifikovat celkem 248 proteinů, z toho u 37 z nich byly pozorovány změny v produkci proteinů v infikovaných buňkách oproti buňkám...
|
|
|
Ovlivnění aktivace krevních destiček polyfenolickými látkami a jejich metabolity
Applová, Lenka ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Bultas, Jan (oponent) ; Šimůnek, Tomáš (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Applová Lenka Školitel: doc. PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Název disertační práce: Ovlivnění aktivace krevních destiček polyfenolickými látkami a jejich metabolity Srážení krve je velice složitý a komplexní proces, ve kterém zaujímají krevní destičky nepostradatelnou úlohu. Na druhé straně je jejich aktivace při některých patologických procesech nadměrná, a tudíž nežádoucí. Kardiovaskulární onemocnění jsou ve vyspělých zemích nejčastější příčinou mortality, a je bohužel známo, že i přes významné pokroky v léčbě, zůstává Česká republika v úmrtnosti na tato onemocnění za většinou zemí západní Evropy. Epidemiologické studie naznačují, že vyšší příjem (iso)flavonoidů je spojen se snížením mortality na kardiovaskulární onemocnění. Je také vhodné zmínit, že Česká republika patří ve statistikách k zemím s nejnižším obsahem flavonoidů v potravě z celé Evropy. Cílem této dizertační práce bylo zjistit, zda mohou polyfenolické látky, zejména (iso)flavonoidy a/nebo jejich metabolity, ovlivnit agregaci krevní destiček, a tedy nepřímo podpořit epidemiologické nálezy, tj. zda může existovat souvislost mezi těmito látkami a možným příznivým kardiovaskulárním působením na experimentální úrovni. Celkově...
|
|
|
The role of hDia1 and hDia2 in melanoma cell invasion
Šťastná, Jana ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Šimůnek, Tomáš (oponent)
Cílem diplomové práce bylo objasnit roli proteinů hDia1a hDia2 v invazním chování melanomových A375-M2 buněk. Při práci byla použita metodika siRNA transfekce, western blotting, fluorescenční a konfokální mikroskopie. Výsledky ukázaly, že oba proteiny skutečně hrají roli v invasním chování nádorových buněk. Dále vznikla hypotéza, která navrhuje mechanismus ovlivnění invasního chování nádorových buněk těmito proteiny.
|
|
| |
|
|
Studium cytoprotektivních vlastností nových oxidačním stresem aktivovaných aroylhydrazonových prochelátorů železa
Macháček, Miloslav ; Šimůnek, Tomáš (vedoucí práce) ; Lenčová, Olga (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Miloslav Macháček Školitel: Doc. PharmDr. Tomáš Šimůnek, Ph.D. Název diplomové práce: Studium cytoprotektivních vlastností nových oxidačním stresem aktivovaných aroylhydrazonových prochelátorů železa Oxidační stres hraje důležitou roli v mnohých onemocněních včetně kardiovaskulárních chorob. Fentonova reakce katalyzovaná intracelulárním redoxně aktivním železem je zdrojem vysoce reaktivních a toxických hydroxylových radikálů. Odstranění volných iontů železa se proto jeví jako vhodná strategie k zamezení dalšího rozvoje oxidačního poškození myokardu. Výsledky naší laboratoře, stejně jako jiných vědeckých skupin, ukazují slibné kardioprotektivní účinky jak v in vitro tak v in vivo experimentech. Na druhou stranu, nadměrná deplece železa může také vést k toxickému poškození buněk. Cílem této studie je proto studium nových prochelátorů železa, jejichž chelatační aktivita se projeví až po aktivaci reaktivními formami kyslíku. Boronyl ester salicylaldehydisonikotinoylhydrazonu (BSIH) a jeho derivát BSIH-PD byly studovány in vitro pro jejich potencionální protektivní účinky v prostředí toxických koncentrací reaktivních forem kyslíku. Kromě toho byla hodnocena i vlastní toxicita těchto látek....
|
|
|
In vitro hodnocení fotodynamické aktivity derivátů tetrapyridoporphyrazinu pro léčbu solidních nádorů
Jedličková, Adéla ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Šimůnek, Tomáš (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Adéla Jedličková Školitel: Mgr. Miloslav Macháček Název diplomové práce: In vitro hodnocení fotodynamické aktivity derivátů tetrapyridoporphyrazinu pro léčbu solidních nádorů Mezi hlavní příčiny úmrtí v dnešní době bezesporu patří nádorová onemocnění, jejichž výskyt stále stoupá. Proto se výzkum v oblasti léčby významně zaměřuje na vývoj nových potenciálních protinádorových léčiv a terapeutických přístupů. Fotodynamická terapie (PDT) dnes patří mezi klinicky schválené terapeutické metody pro léčbu maligních i nemaligních onemocnění. Jejími hlavními složkami jsou fotosenzitizér (PS), světlo a kyslík, které samy o sobě nejsou toxické, ale společnou interakcí vedou ke vzniku vysoce reaktivních molekul. Metoda je založena na absorpci světla o vhodné vlnové délce molekulou PS a následném přenosu energie fotonů na okolní molekuly, především na kyslík, za vzniku cytotoxických reaktivních forem kyslíku (ROS), kde hlavní roli hraje singletový kyslík. ROS následně poškozují okolní buněčné struktury, jejichž destrukce vede k nevratnému poškození buněčných funkcí a následné buněčné smrti, jejíž typ úzce souvisí s lokalizací PS uvnitř buňky. Výsledný efekt léčby je dán třemi propojenými mechanismy - přímým...
|
|
|
Study of exosomes as drug delivery system in therapy of glioblastoma
Tomášková, Lucia ; Šimůnek, Tomáš (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Lucia Tomášková Školiteľ: prof. PharmDr. Tomáš Šimůnek, Ph.D. Názov diplomovej práce: Štúdium exozómov ako systému transportu liečiv pri liečbe glioblastómu Ochorenia centrálneho nervového systému patria medzi najzávažnejšie choroby postihujúce človeka. Ovplyvňujú život nie len samotného pacienta, ale aj jeho okolia. Preto ich terapia, či už na úrovni úplného vyliečenia alebo zmiernenia sprevádzajúcich symptómov, je výzvou vedeckého bádania. V našom výskume sme sa zamerali na multiformný glioblastóm, rakovinu mozgu zatiaľ nevyliečiteľnú. Hlavným úskalím pri terapii je prekonanie hematoencefalickej bariéry. Exozómy ako telu prirodzené nanovezikuly sa ukázali ako vhodným systémom na doručenie liečiv do mozgového tkaniva. Náš výskum ukázal, že vhodnou metódou dokážeme získať dostatok kvalitných exozómov z makrofágov a veľmi efektívne ich naplniť protinádorovými látkami paklitaxelom, doxorubicínom a temolozidom, pričom takto doručené látky vykazujú vyššiu účinnosť a menej vedľajších účinkov ako voľná forma.
|
host ::
RSS.