|
|
Genista tinctoria L. in vitro - ovlivnění produkce sekundárních látek
Fiedlerová, Gabriela ; Tůmová, Lenka (vedoucí práce) ; Martin, Jan (oponent)
Genista tinctoria L. in vitro - ovlivnění produkce sekundárních látek Mgr. Gabriela Fiedlerová Souhrn Cílem této práce bylo studium vlivu abiotického elicitoru − ultrazvuku působícího v různých časových intervalech na produkci sekundárních metabolitů − isoflavonoidů v suspenzní kultuře Genista tinctoria L. Kultura byla kultivována v živném Schenk−Hildebrandtovu médiu s přídavkem růstových regulátorů (kys. 2,4−dichlorfenoxyoctová v koncentraci 0,5 mg/l a kinetin v koncentraci 0,1 mg/l) při teplotě 25 řC a světelné periodě 16 hodin světlo/8 hodin tma. Jako elicitor byl použit ultrazvuk (o hustotě výkonu 0,1 W/cm3 a stálé frekvenci 35 kHz) po dobu 1, 2, 3, 4 a 5 minut. Vzorky byly odebírány ihned a dále pak po 6, 12, 24, 48, 72 a 168 hodinách po expozici ultrazvukem. Obsah isoflavonoidů (genistinu, daidzeinu, genisteinu, formononetinu a biochaninu A) byl stanoven pomocí HPLC. Z výsledků je zřejmé, že ultrazvuk jako elicitor zvyšoval produkci genistinu a daidzeinu u suspenzní kultury Genista tinctoria L.. Nejvyšší obsah genistinu (0,08 %) byl zaznamenán při elicitaci ultrazvukem po dobu 3 minut a odběru po 72 hodinách po expozici ultrazvuku a stejné hodnoty bylo dosaženo při elicitaci po dobu 4 minut a odběru po 12 hodinách po expozici ultrazvuku. Největší zvýšení produkce daidzeinu, o 400 % oproti kontrole,...
|
|
|
Optimalizace kultivačních podmínek pro explantátové kultury catalpa bignonioides pěstovaných v bioreaktoru
Kubešová, Zuzana ; Martin, Jan (vedoucí práce) ; Tůmová, Lenka (oponent)
Zuzana Kubešová Optimalizace kultivačních podmínek pro explantátové kultury Catalpa bignonioides pěstovaných v bioreaktoru. Abstrakt V rigorózní práci jsem se zabývala kultivací rostlinných kultur in vitro. Dále jsem zkoumala vliv vybraných fytohormonů (kyselina naftyloctová - NAA, benzylaminopurin - BAP, kyselina 2,4 - dichlorfenoxyoctová - 2,4 - D) a vliv vybraných prekurzorů (mevalonát sodný, kyselina oxaloctová, fenylalanin) na produkci sekundárních metabolitů. Obsah iridoidů a fenylpropanových kyselin jsem stanovovala pomocí metody HPLC. Při použití fytohormonů došlo ke zvýšení obsahu pouze u kyseliny kávové a to při aplikaci NAA. Na rychlost růstu ani na celkové množství biomasy neměly fytohormony vliv. Mevalonát sodný se nejlépe uplatnil v koncentraci c2. Došlo k nejvyššímu nárůstu obsahu catalpolu (po 168 hod o 700%) a kyseliny kávové (po 168 hod o 260%). Kyselina oxaloctová naopak snížila množství kyseliny kávové oproti kontrole. Fenylalanin nejvíce zvyšoval množství kyseliny kávové v koncentraci c2 (po 168 hod o 633%).
|
|
|
Obsah anthokyanidinů a jiných barviv v komerčně dostupných lécích a doplňcích stravy
Karanská, Hana ; Martin, Jan (vedoucí práce) ; Karlíčková, Jana (oponent)
Název práce: Obsah anthokyanidinů a jiných barviv v komerčně dostupných lécích a doplňcích stravy Autor: Hana Karanská Práce je zaměřena na stanovení anthokyanidů a anthokyanidinů v potravinových doplňcích, ovoci a džusech. Látky byly extrahovány methanolem za pomocí ultrazvukové lázně či varu na vodní lázni. Analýza byla prováděna pomocí HPLC. Z výsledků práce vyplývá, že obsah anthokyanů a anthokyanidinů je ve stanovovaných vzorcích zastoupen v různé míře. Všechny analyzované vzorky vykazovaly obsah těchto látek. Na základě informací od výrobce lze konstatovat, že přípravek Ostrovidky plus obsahoval deklarované množství anthokyanidů. Výrobci zbývajících preparátů neuvádí dostatečné informace o složení pro jednoznačné stanovení závěru, ale na základě výpočtů a úvah lze říct, že přípravky přibližně splňovaly obsah látek uváděných výrobcem. Množství anthokyanů v ovoci splňovalo hodnoty uváděné literaturou. Džusy neuváděly přesné množství anthokyanů.
|
|
| |
|
|
Izolace vakuol ze suspenzních kultur Scutellaria baicalensis Georgii
Ševčíková, Šárka ; Martin, Jan (vedoucí práce) ; Dušek, Jaroslav (oponent)
Šárka Ševčíková Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Heyrovského 1203, 500 05 Hradec Králové Izolace vakuol ze suspenzních kultur Scutellaria baicalensis GEORGII Diplomová práce Vedoucí práce: Pharm.Dr. Jan Martin, Ph.D. Počet stran: 52 Cílem práce bylo vyvinout metodiku izolace vakuol ze suspenzních kultur šišáku bajkalského - Scutellaria baicalensis Geoorgii z čeledi Lamiaceae. Výchozí metodou byl interní postup pracoviště Leiden University, Division of Pharmacognosy z Holandska. Metoda se ukázala jako nevyhovující. Po seznámení s publikacemi pojednávajícími o metodách izolace vakuol z různých rostlinných druhů a po řadě provedených experimentů, se nám podařilo vyvinout vlastní metodu izolace vakuol využívající ficollový gradient. V literatuře uvedené metody izolace vakuol se navzájem lišily v údajích týkajících se lyzačních enzymů, doby inkubace, složení lyzačního roztoku a také hustotního gradientu. Jednotlivé kroky se nám podařilo optimalizovat a vakuoly izolovat. Výsledná metoda umožňuje izolovat vakuoly v poměrně krátkém čase a v dostatečné kvalitě pro další experimenty. Klíčová slova: šišák, Scutellaria, vakuoly, flavonoidy, ficoll, gradient, izolace vakuol
|
|
|
Flavonoidy v květech vybraných kultivarů Sambucus nigra L.
Krulišová, Markéta ; Spilková, Jiřina (vedoucí práce) ; Martin, Jan (oponent)
Cílem této práce bylo zjistit obsah flavonoidů v květech jedenácti vyšlechtěných kultivarů bezu černého, určit zdali jsou mezi nimi statisticky významné rozdíly a vypracovat přehled obsahových látek a účinků květů. Droga Sambuci nigrae flos se v terapii užívá zejména pro svůj obsah flavonoidů a hydroxyskořicových kyselin jako prostředek při nachlazení, onemocněních močového ústrojí a dýchacích cest. Její prospěšnost potvrdily i studie v rámci zkoumání antibakteriální a antivirové aktivity, diabetu a obezity, účinků na imunitní systém a též ochrany před UV zářením. Obsah flavonoidů byl stanoven spektrofotometricky metodou podle Českého lékopisu 2009, článku Sambuci nigrae flos. Výsledky byly statisticky vyhodnoceny testem ANOVA a Bonferroniho testem. Požadavek Českého lékopisu 2009 na minimální obsah flavonoidů 0,80% splnily květy z kultivarů: Albida, Heidegg 13, Riese auß Voßloch, Sambu, Samdal, Sampo a Samyl. Naopak by lékopisu nevyhověly květy kultivarů: Allesö, Aurea, Dana a Juicy. Nejvyšší obsah flavonoidů byl zjištěn v květech kultivaru Riese auß Voßloch s hodnotou 1,3603%, zatímco nejnižší u kultivaru Dana s obsahem 0,3598%. Nejvyšší průměrný obsah flavonoidů měla odrůda Sambu, dále následovaly odrůdy v pořadí Riese auß Voßloch, Sampo, Albida, Heidegg 13, Samyl, Samdal, Juicy, Allesö, Aurea a...
|
|
|
The antioxidant and Hormonal Effects of Ginseng Panax on Lifespan and Stres Resistance in Caenorhabditis elegans
Ježek, Václav ; Tůmová, Lenka (vedoucí práce) ; Martin, Jan (oponent)
The Thesis: The Antioxidant and Hormonal Effects of Ginseng Panax on Lifespan and Stress Resistance in Caenorhabditis elegans Made by: Václav Ježek The antioxidant and hormonal effect of Panax ginseng on lifespan and stress resistance in C. elegans were investigated. The best results by treatment of C. elegans were achieved in the presence of pure GPE 50 µg/ml without the presence of cholesterol. Surprisingly this medium assigns the increase of mean survival by 10.98 % in contrasting with medium containing the mixture of GPE 50 µg/ml and cholesterol. This negative impact of GPE and cholesterol co- administration on lifespan of C. elegans is more obvious by using sixfold higher concentration of GPE (300 µg/ml). In this case the increase of mean survival by treatment with pure GPE is 17.69 %. In addition the highest increase of progeny was observed in medium with pure GPE 300 µg/ml. Surprisingly this concentration was appointed as toxic with negative effect on lifespan of C. elegans. It is obvious that GPE does not protect C. elegans against oxidative stress significantly because it does not suppress the expression of hsp-16.2/GFP and does not protect against oxidative stress caused by lethal dose of juglone. These findings suggest that the antioxidant activity of GPE does not play prevailing role by...
|
|
|
Možnosti ovlivnění sekundárních látek v in vitro kulturách léčivých rostlin
Sojková, Kristýna ; Tůmová, Lenka (vedoucí práce) ; Martin, Jan (oponent)
Možnosti ovlivnění produkce sekundárních látek v in vitro kulturách léčivých rostlin Elicitace je jednou z metod, která pomáhá zvyšovat produkci sekundárních metabolitů. Cílem této práce bylo ovlivnit produkci flavonoidů v kalusových a suspenzních kulturách Třezalky tečkované (Hypericum perforatum L.). Oxid seleničitý byl použit jako abiotický elicitor. Postupně byl přidáván v různých koncentracích (9,012.10-3 mol/l; 9,012.10-4 mol/l; 9,012.10-5 mol/l) ke kulturám in vitro. Metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) byl stanoven obsah sekundárních metabolitů (hyperosidu a kvercitrinu). Vzorky byly po působení elicitoru odebírány po 6, 12, 24, 48, 72, 168 hodinách. Oxid seleničitý zvýšil produkci hyperosidu a kvercitrinu. Nejvyšší obsah hyperosidu (0,2 %) byl detekován po působení oxidu seleničitého (9,012.10-3 mol/l) při odběru po 168 hodinách v suspenzní kultuře. Nejvyšší produkce kvercitrinu (0,37 %) bylo dosaženo po 6 hodinách působení oxidu seleničitého (9,012.10-3 mol/l) také v suspenzní kultuře. Produkce flavonoidů nebyla u kalusových kultur po aplikaci elicitoru tak výrazně ovlivněna v porovnání se suspenzními kulturami. Také bylo pozorováno uvolňování flavonoidů do živného média. Nejvyšší obsah hyperosidu (1,02 mg/100ml) uvolněného do živného média byl nalezen po 24 hodinách v...
|
|
| |
|
|
Kultury léčivých rostlin in vitro - XVI
Sedláčková, Veronika ; Tůmová, Lenka (vedoucí práce) ; Martin, Jan (oponent)
Kultury léčivých rostlin in vitro - XVI Tématem této diplomové práce je ovlivňování produkce sekundárních metabolitů explantátové kultury Silybum marianum, (L.) Gaertn. metodou elicitace. Účelem bylo zjistit, zda zadaný abiotický elicitor 5-terc-butyl-N-(4- chlorbenzyl)pyrazin-2-karboxamid zvýší produkci flavonolignanů explantátové kultury. Experiment byl prováděn in vitro na kalusových a suspenzních kulturách léčivé rostliny Silybum marianum za použití živného média Murashigeho a Skooga s přídavkem 10 mg/l α-naftyloctové. Elicitor se přidával ve formě roztoku o třech různých koncentracích (C1 = 3, 292.10-3 mol/l, C2 = 3, 292.10-4 mol/l a C3 = 3, 292. 10-5 mol/l) a působil po dobu 6, 12, 24, 48, 72 a 168 hodin. Obsah flavonolignanů byl zjišťován pomocí HPLC. Maximální produkce flavonolignanů (0, 280 mg.g-1 DW) v kalusové kultuře nastala po 24 hodinách působení elicitoru o koncentraci C2 = 3, 292.10-4 mol/l, kdy byl zjištěn zároveň nejvyšší obsah silychristinu. Druhé nejvýznamnější zvýšení obsahu flavonolignanů (0, 271 mg.g-1 DW) v kalusové kultuře nastalo po 12 hodinách působení elicitoru o koncentraci C3 = 3, 292.10-5 mol/l, kdy došlo také k nejvyššímu nárůstu obsahu silydianinu a silybinu B. Maximální obsah flavonolignanů (1, 871 mg.g-1 DW) v suspenzní kultuře byl zjištěn po 48 hodinách elicitace roztokem...
|
host ::
RSS.