Název:
Transformace ptDNA \kur{Chlamydomonas reinhardtii}
Překlad názvu:
Transformation of \kur{Chlamydomonas reinhardtii} ptDNA
Autoři:
HUSÁKOVÁ, Jana Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2011
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Cílem této magisterské práce bylo vyzkoušet a porovnat dvě dostupné metody genetické transformace (biolistika, elektroporace) u plastidového genomu zelené řasy Chlamydomonas reinhardtii. Při biolistické transformaci byla optimalizována celá škála experimentálních parametrů, které obecně transformační účinnost ptDNA ovlivňují: fyziologický stav akceptorových buněk, typ a velikost použitých mikročástic, tlak hnacího plynu (hélia), délka dráhy letu mikročástic, transformace buněk přímo na selekčním médiu (obsahující spektinomycin 150 ?g/ml) či na médiu neselekčním(bez spektinomycinu) a forma vnášené DNA. Na rozdíl od jaderné transformace nebyla dosud transformace ptDNA pokusného organismu Ch. reinhardtii prostřednictvím elektroporace popsána. Právě proto zde bylo testováno široké spektrum hodnot různých fyzikálních veličin, které mohou podstatným způsobem účinnost transformace ovlivnit.The aim of this master thesis was to test and compare two available methods of genetic transformation (biolistics, electroporation) of the plastid genome of green algae Chlamydomonas reinhardtii. For biolistic transformation a wide range of experimental parameters which generally influence ptDNA transformation efficiency was optimized: physiological condition of acceptor cells, type and size of microparticles, pressure of propulsion gas (helium), length of projectile trajectory, transformation of cells directly on selective medium (containing spectinomycin 150 ?g/ml) or on nonselective medium (without spectinomycin) and form of transforming DNA. In contrast to nuclear transformation ptDNA transformation of the experimental object C. reinhardtii by means of electroporation hadn´t been described. Hence a wide range of values of different physical parameters which can significantly influence the transformation efficiency was tested.
Klíčová slova:
biolistika; Chlamydomonas reinhardtii; elektroporace; ptDNA; transformace; biolistics; Chlamydomonas reinahrdtii; electroporation; ptDNA; transformation Citace: HUSÁKOVÁ, Jana. Transformace ptDNA \kur{Chlamydomonas reinhardtii}. České Budějovice, 2011. diplomová práce (Mgr.). JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH. Přírodovědecká fakulta
Instituce: Jihočeská univerzita v Českých Budějovicích
(web)
Informace o dostupnosti dokumentu:
Plný text je dostupný v digitálním repozitáři JČU. Původní záznam: http://www.jcu.cz/vskp/13520