Original title:
Specifická izolace microRNA pomocí magnetizovatelných mikročástic
Authors:
Vlahová, Veronika Document type: Master’s theses
Year:
2014
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] MicroRNA jsou malé nekódující molekuly RNA, které dosahují délky okolo 22 nt. Tyto molekuly se podílejí na regulaci genové exprese na post-transkripční úrovni. Tvoří největší skupinu regulátorů v buňce a z tohoto důvodu se také účastní všech důležitých procesů, jako je proliferace, diferenciace či apoptóza. Také se velkou mírou podílejí na nádorové transformaci. Tyto malé molekuly mají veliký potenciál stát se diagnostickými markery či pomáhat při léčbě a prevenci onemocnění. Tato práce byla zaměřena na vyvinutí izolační metody pomocí magnetizovatelných částic s následnou elektrochemickou detekcí microRNA. Byly provedeny optimalizační kroky a následně byla celá metoda úspěšně aplikována na reálné vzorky. Těmito vzorky byly modifikované HEK293 buňky, které exprimovaly vyšší množství miR-124. Tato metoda se ukázala jako dostatečně specifická a použitelná pro analýzu microRNA.MicroRNAs are small non-coding RNA molecules with length of about 22 nt. These molecules participate on regulation of gene expression at the post-transcriptional level. They represent the largest group of regulators in the cell and therefore are also involved in all key processes such as proliferation, differentiation or apoptosis. Moreover, they participate in tumor transformation. These small molecules have a great potential to be diagnostic markers or assist in the treatment and prevention of diseases. This research was focused on the development of isolation method using magnetic particles with subsequent electrochemical detection of microRNA. Optimization steps were performed and then the entire method was successfully applied to real samples of HEK293 cells expressing increased levels of miR-124. The developed method proved to be sufficiently specific and applicable to the analysis of microRNA.
Keywords:
elektrochemie; magnetické částice; microRNA; miR-124; rakovina; voltametrie