Název:
Rekombinantní exprese, purifikace a charakterisace povrchového imunoreceptoru CD47 (integrin associated protein)
Překlad názvu:
Recombinant expression, purification and characterisation of the surface immunoreceptor CD47 (integrin associated protein)
Autoři:
Kuchyňová, Sarah ; Konvalinka, Jan (vedoucí práce) ; Vaněk, Ondřej (oponent) Typ dokumentu: Bakalářské práce
Rok:
2024
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Lidský imunoreceptor CD47, taktéž označovaný "Intergrin Associated Protein" je nových terapeutických cílů v léčbě rakoviny. Při interakci s proteinem nacházející se na buňkách imunitního systému (SIRP pohlcení buňky exprimující CD47. Tento mechanismus využívají nádorové buňky pro únik imunitnímu systému a činí tak CD47 nadějným cílem imunoterapií. literárním přehledu této práce je charakterizován protein CD47 z struktury, lokalizace a funkce. Zároveň je detailně rozebraná interakce této bílkoviny se zmíněným SIRP Následující experimentální část se věnuje přípravy plazmidu pTT28_hCD47. Je popsáno, jak do linearizovaného vektoru pTT28 byl začleněn gen pro extracelulární část lidského proteinu CD47, který byl transfekován do savčího buněčného systému pro jeho NTA agarose a gelovou permeační chromatografií, kdy byly izolovány proteiny CD47 lišící se v glykosylacích. Jejich funkčnost byla úspěšně ověřena na přístroji ční protilátky. Experimentální část se dále zaměřuje na metody průtokové cytometrie využité pro evaluaci exprese proteinu CD47 na buněčných linií U937, THP které jej všechny vykazovaly. Klíčová slova: The human immunoreceptor CD47, also designated
Klíčová slova:
heterologní exprese; klonování DNA; protein-proteinov0 interakce; savčí buněčné kultury; DNA cloning; heterologous expression; mammalian cell culture; protein-protein interaction