Original title:
Charakterizace vybraných kmenů kvasinek z potravin
Translated title:
Characterization of selected yeast strains from food
Authors:
Ostrihoňová, Katarína ; Vítová, Eva (referee) ; Vránová, Dana (advisor) Document type: Bachelor's theses
Year:
2015
Language:
slo Publisher:
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická Abstract:
[slo][eng]
Táto bakalárska práca sa zaoberá identifikáciou kvasiniek zo syrov metódou PCR-RFLP a overením lipolytickej aktivity kvasiniek. V teoretickej časti sú spracované základné informácie o kvasinkách, ich možné pozitívne a negatívne vplyvy na kvalitu syrov, technológia výroby syrov, proteolýza a lipolýza v syre a priebeh PCR-RFLP (polymerázová reťazová reakcia s následnou analýzou polymorfizmu dĺžky reštrikčných fragmentov). V experimentálne časti je uvedený postup izolácie DNA, identifikácia DNA metódou PCR uskutočnená amplifikáciou 5,8S-ITS úsekov DNA pomocou primérov ITS1 a ITS4. Amplifikovaná DNA bola prečistená etanolom a potom podrobená reštrikčnej analýze enzýmami HaeIII, HinfI, HhaI, TaqI. Následne je uvedená detekcia PCR produktu a reštrikčných fragmentov pomocou gélovej elektroforézy. Dĺžky fragmentov získané po elektroforéze poslúžia na identifikáciu kvasinkových druhov izolovaných zo syrov. V druhej časti bakalárskej práce sme sa v experimentálnej časti zaoberali dôkazom lipolytickej aktivity kvasiniek pomocou testu na Spirit blue agar.
This bachelor´s thesis is focused on identification of yeasts of the cheeses by PCR-RFLP method and verifying the lipolytic activity of the yeast. In the theoretical part are processed basic information about yeast, their possible positive and negative effects on the quality of cheeses, the technology of production of cheeses, lipolysis and proteolysis in the cheese and of course of PCR-RFLP (The polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism). Experimental section shows the isolation of DNA, identification of DNA by PCR made by amplification 5,8S-ITS sections of DNA using primers ITS1 and ITS4. The amplified DNA was purified by ethanol and then was subjected to restriction analysis with the enzymes HaeIII, HinfI, HhaI, TaqI. Then there is listed detection of the PCR product and the restriction fragments by gel electrophoresis. Lengths of the fragments obtained after electrophoresis will be used to identify yeast species isolated from cheeses. In the second part of the thesis in the experimental part we have dealt with evidence of lipolytic activity of the yeast by test on Spirit blue agar.
Keywords:
cheese; isolation; polymerase chain reaction; yeasts
Institution: Brno University of Technology
(web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library. Original record: http://hdl.handle.net/11012/38992