Original title:
Analýza mykotoxinů z biologických matric pomocí biomembrán a kapilární elektroforézy
Translated title:
Analysis of mycotoxins from biological matrices using biomembranes and capillary electrophoresis
Authors:
Kubová, Natália ; Šesták,, Jozef (referee) ; Duša,, Filip (advisor) Document type: Master’s theses
Year:
2019
Language:
slo Publisher:
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická Abstract:
[slo][eng]
V tejto diplomovej práci sú zosumarizované poznatky o mykotoxínoch, konkrétne ochratoxíne A, jeho tolerovateľné množstvá prijímané potravou, detoxifikácia a analytické metódy pre stanovenia mykotoxínov. Súčasťou práce je kapitola o lipozómoch, ktoré boli použité na analýzu ochratoxínu A pomocou lipozomálnej elektrokinetickej kapilárnej elektroforézy. Praktická časť sa zaoberá analýzou ochratoxínu A z húb Aspergillus ochraceus Wilhelm a Aspergillus melleus Yukawa kultivovaných na žite ozimnom a optimalizáciou metódy pre analýzu ochratoxinu A na základe lipozómov rôznych zložení. Pomocou kapilárnej elektroforézy nie je ochratoxin A dostatočne separovaný a detekovaný v extrahovanej zmesi, naopak, keď sa použijú roztoky lipozómov, je možné dosiahnuť odlišné migračné správanie a zároveň stabilizáciu ochratoxínu A v roztoku vďaka amfifilným interakciám medzi mykotoxínmi a lipozómami. Preto bola lipozomálna elektrokinetická kapilárna elektroforéza (LECK) metóda využitá pre túto prácu. Najvhodnejšie zloženie lipozómov sa preukázalo zloženie molárnych pomerov 25% cholesterol (stabilizácia membrány) / 50% 2-oleoyl-1-palmitoyl-sn-glycerol 3-phosphocholine (hlavný zwitterionický komponent membrány) / 25% 1,2-diacyl-sn-glycerol-3-phospho-L-serine (dodanie negatívneho náboja).
This thesis summarizes knowledge about mycotoxins, with focus to ochratoxin A. It also summarizes its tolerable levels of food intake, detoxification and analytical methods for mycotoxins. The work also includes a chapter describing liposomes that were used for the analysis of ochratoxin A by liposomal electrokinetic capillary electrophoresis (LECK). The practical part includes the analysis of ochratoxin A from Aspergillus ochraceus Wilhelm and Aspergillus melleus Yukawa fungi cultivated on a rye and optimization of the method for analysis of ochratoxin A based on liposomes of different compositions. By capillary zone electrophoresis, ochratoxin A is not sufficiently separated and detected in the extracted mixture; conversely, when liposome solutions are used, different migration behavior can be achieved while stabilizing ochratoxin A in solution due to amphiphilic interactions between mycotoxins and liposomes. Therefore, the LEKC method was used for this work. The most suitable liposome composition has been shown to be molar ratios of 25% cholesterol (membrane stabilization) / 50% 2-oleoyl-1-palmitoyl-sn-glycerol 3-phosphocholine (main zwitterionic lipid) / (25% 1,2-diacyl-sn-glycerol)-3-phospho-L-serine (introduction of negative charge).
Keywords:
Aspergillus melleus Yukawa; Aspergillus ochraceus Wilhelm; capillary electrophoresis; fungi; liposomes; Ochratoxin A; rye
Institution: Brno University of Technology
(web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library. Original record: http://hdl.handle.net/11012/177475