Original title: Transientní transfekce bezsérové buněčné kultury pomocí polyethyleniminů
Translated title: Transient transfection of a serum free cell culture using polyethyleneimines
Authors: Čutová, Michaela ; Španová, Alena (referee) ; Ševčík, Mojmír (advisor)
Document type: Master’s theses
Year: 2010
Language: cze
Publisher: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract: [cze] [eng]
Diplomová práce studuje problematiku transientní transfekce bezsérové buněčné kultury pomocí polyethyleniminů. V teoretické části jsou obsaženy poznatky o vzniku rekombinantních molekul DNA, použití expresních vektorů, přenosu DNA a následné detekci rekombinantního proteinu. Experimentální část byla zaměřena na nalezení vhodné transfekční metody pomocí polyethyleniminu, kdy hostitelskými buňkami byly buňky 293HEK/EBNA. V první části byl zvolen nejúčinnější plazmid – pCEP4/SEAP. Dále byly zkoumány tři transfekční metody: Muller (2005), Durocher et al. (2007) a Backliwal et al. (2008). Nejvyšší dosažené exprese SEAP bylo dosaženo metodou Backliwal et al. (2008). Master’s thesis deals with the transient transfection of the serum free animal cell culture using polyethyleneimines. In the theoretical part formation of recombinant DNA molecules, used expresion vectores, used DNA transfer and detection of recombinant proteins are discussed. The experimental part deals with efficiency of the polyethylenimine mediated transient transfection under various experimental conditions. 293HEK/EBNA cell line was chosen as an experimental model. First the most effective plasmide - pCEP4/SEAP was selected. Then three transfection methodes were tested: Muller (2005), Durocher et al. (2007) and Backliwal et al. (2008). The highest recombinant protein expresion was reached using the method of Backliwal et al. (2008).
Keywords: 292HEK/EBNA cells; polyethylenimine; recombinant protein; transient transfection; buňky 292HEK/EBNA; polyethylenimin; rekombinantní protein; transientní transfekce

Institution: Brno University of Technology (web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library.
Original record: http://hdl.handle.net/11012/3087

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-561646


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Brno University of Technology
Academic theses (ETDs) > Master’s theses