Original title: Fyziologická funkčnost preptinu a jeho analogů
Translated title: Physiological functioning of preptin and its analogs
Authors: Mrázková, Lucie ; Žáková, Lenka (advisor) ; Obšilová, Veronika (referee)
Document type: Master’s theses
Year: 2023
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Preptin je 34 aminokyselin dlouhý peptid, který je odvozený z pro-IGF2, kde se vyštěpuje z jeho E-domény a vzniká společně s maturovaným IGF2. V mojí diplomové práci jsme připra- vili dva plně dlouhé preptiny (myší a lidský) a 8 analogů preptinu (fragmenty s nebo bez olefi- nové metathese). Plně dlouhé preptiny, stejně jako preptinové fragmenty jsme syntetizovali syntézou peptidů na pevné fázi. Myší nebo lidský preptin nám sloužil jako referenční molekula pro srovnávání s výsledky biologických testů preptinových analogů. Všechny látky byly testo- vány na různé biologické aktivity, abychom více ozřejmili efekt preptinu jako možné biolo- gicky aktivní látky. Testovali jsme vliv na sekreci inzulínu v pankreatických β-buňkách, ne- přímo jsme zkoumali vliv na proliferaci kostních buněk a pokoušeli jsme se přiblížit odhalení možného receptoru pro preptin. Ze všech výsledků nám vyšlo, že ačkoliv má preptin nebo ně- které jeho analogy vyšší efekt než kontrolní vzorky, výsledky nejsou konzistentní a efekt není signifikantně vyšší. V hledání receptoru jsme neuspěli, přestože jsme s radioaktivně značeným preptinem udělali množství saturačních experimentů na mnoha typech buněk. Na začátku jsme vazebnými experimenty také vyloučili možnost, že je preptin schopen vázat se na stejné recep- tory jako IGF2, což... Preptin is a 34 amino acid long peptide that is derived from pro-IGF2, where it is cleaved from its E-domain and produced together with the matured IGF2. In my thesis we prepared two full-length preptins (mouse and human) and 8 preptin analogues (fragments with or without olefin metathesis). The full-length preptins as well as the preptin fragments were synthesized by solid-phase peptide synthesis. Mouse or human preptin served as our reference molecule for comparison with the results of bioassays of preptin analogues. All substances were tested for different biological activities to further elucidate the effect of preptin as a possible biologically active substance. We tested the effect on insulin secretion in pancreatic β-cells, indirectly in- vestigated the effect on bone cell proliferation and tried to approach the discovery of a possible receptor for preptin. From all our results we found that although preptin or some of its analogues have a higher effect than controls, the results are not consistent and the effect is not significantly higher. We were unsuccessful in our search for a receptor, despite having done a number of saturation experiments with radiolabelled preptin in many cell types. We also ruled out at the outset by binding experiments the possibility that preptin is able to bind...
Keywords: insulin secretion; olefin metathesis; preptin; pro-IGF2; signaling; solid phase peptide synthesis; olefinová metathese; preptin; pro-IGF2; sekrece inzulínu; signalizace; syntéza peptidů na pevné fázi

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/181550

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-528872


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Master’s theses