Original title: Význam WASH komplexu pro homeostázu endolysosomálního systému
Translated title: The role of the WASH complex in endolysosomal homeostasis
Authors: Beránková, Pavla ; Libusová, Lenka (advisor) ; Rösel, Daniel (referee)
Document type: Master’s theses
Year: 2023
Language: eng
Abstract: [eng] [cze]
The WASH (WASP and SCAR homologue) complex is an actin nucleation promoting factor essential for endosomal cargo sorting. Upon WASH complex depletion, endosomal cargoes are mislocalized and the endolysosomal system collapses. Here, we employed high-speed vesicle tracking and real-time rescue experiments to test the effect of WASH complex depletion on endolysosomal homeostasis. We found that large lysosome-like vacuoles emerge in knockout cell lines of individual WASH complex subunits, although the overall dynamics of the lysosomal network does not substantially change. Follow-up experiments revealed that the WASH complex does not act directly on the vacuoles during their rescue. Overall, the data indicate that the emergence of vacuoles in WASH complex knockouts is a secondary process that depends on the WASH complex indirectly. WASH (WASP and SCAR homologue) komplex je nukleační faktor pro aktin, který je nezbytný pro třídění karga v endosomech. Pokud dojde ke ztrátě WASH komplexu, náklad procházející endosomy ztrácí správnou lokalizaci a dochází ke kolapsu endolysosomálního systému. V této práci používáme vysokorychlostní sledování váčků a záchranu chybějícího WASH komplexu v reálném čase tak, abychom otestovali efekt jeho ztráty na homeostázu endolysosomálního systému. Zjistili jsme, že v buňkách s geneticky vyřazenými podjednotkami WASH komplexu dochází ke vzniku velkých vakuol podobných lysosomům. Zároveň ale záchranné experimenty nepotvrdily přímou roli WASH komplexu na vakuolách během toho, kdy se vakuoly vytrácely. Souhrnně naše data naznačují, že tvorba vakuol v buňkách s vyřazeným WASH komplexem je spíše druhotný proces, který je na WASH komplexu závislý pouze nepřímo.
Keywords: 3 inhibitors; Arp2; cytoplasmic vacuolization; endolysosomal system; inducible rescue; lysosome tracking; lysosomes; SWIP; vacuoles; WASH complex; 3; endolysosomální systém; inducibilní rescue; inhibitory Arp2; lysosomy; sledování lysosomů; SWIP; vakuolizace; vakuoly; WASH komplex

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/181548

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-528186


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Master’s theses