Original title:
Vliv modifikace receptoru ultrafialového světla na jeho funkci
Authors:
Blechová, Veronika Document type: Master’s theses
Year:
2020
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Ultrafialové záření má negativní vliv na živé organismy, ale slouží i jako signál modulující růst a vývoj rostlin. Diplomová práce je zaměřena na vliv UV-B záření u rostlin Arabidopsis thaliana s narušenou signální dráhou UV-B světla a modulovanou hladinou cytokininů. Výsledky prokázaly, že aplikace UV-B záření má negativní vliv na maximální kvantový výtěžek PS II (Fv/Fm) u obou mutantních linií uvr8-1 a uvr8-2. Snížení Fv/Fm bylo u linie uvr8-1 spojeno s inhibicí růstu, kterou bylo možno tlumit aplikací 1 µM BAP. Analýza hladiny pigmentů dále prokázala, že cytokininy interagují se signální drahou UV-B záření v regulaci biosyntézy antokyanů a tato interakce je závislá na funkčním proteinu UVR8. Účinek cytokininů na termomorfogenezi je však na UVR8 zcela nezávislý. Práce se rovněž věnovala přípravě fúzních genů nesoucích modifikaci v sekvenci UVR8 a jejich spojení s markerovým genem eGFP. Tvorba příslušných produktů pomocí metody PCR byla ověřena komerční sekvenací.Ultraviolet radiation has a negative effect on living organisms, but it is also signal modulating growth and development in plants. This thesis is focused on the effects of UV-B light in Arabidopsis thaliana mutants in UV-signalling pathway with modulated cytokinin level. Our data show that UV-B decrease the quantum yield of the PS II (Fv/Fm) in both mutant lines. Decrease of Fv/Fm was accompanied by growth retardation which could be reverted by exogenous application of 1 µM BAP. Determination of the pigments showed that cytokinins interact with UV-B light and this interaction is dependent on the functional UVR8. On the other hand, inhibition of the thermomorphogenesis by cytokinins is independent of the functional UVR8. Experimental work was also focused on the creation of the fusion genes containing modified UVR8 sequence with marker gene eGFP. The correct sequence of the recombinant GFP was confirmed by commercial sequencing.
Keywords:
anthocyanins; antokyany; cytokinins; cytokininy; fotosyntéza; photosynthesis; ultrafialové záření; ultraviolet light