Original title: Příprava mutantního serpinu z klíštěte \kur{Ixodes ricinus}
Authors: EDEROVÁ, Monika
Document type: Master’s theses
Year: 2022
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Do P1 místa serpinu Iripin-1 pocházejícího ze slin klíštěte Ixodes ricinus byla pomocí specifických primerů zavedena bodová mutace zaměňující arginin za tryptofan. Protein obsahující tuto mutaci byl exprimován v chemicky kompetentních buňkách Escherichia coli. Následně byl z těchto buněk extrahován a přečištěn pomocí afinitní a rozměrově-vylučovací chromatografie. Aby byl ověřen dopad zavedené bodové mutace, byla otestována schopnost získaného proteinu tvořit kovalentní komplexy s trypsinem. Point mutation altering arginin for tryptophan amino acid residue in P1 site of tick salivary serpin Iripin-1 was created using specific primers. Recombinant protein with this mutation in nucleotide sequence was then expressed in chemically competent Escherichia coli cells, extracted from them and purified by affinity and size-exclusion chromatography. To see the impact of the mutation on inhibitory function of Iripin-1, its ability to bind trypsin and form covalent complexes was evaluated.
Keywords: chromatography; elecrophoresis; mutagenesis; protease inhibitors; proteases; protein expression; recombinant proteins; serpins; tick saliva; Western blot; chromatografie; elektroforéza; exprese proteinu; inhibitory proteáz; klíštěcí sliny; mutageneze; proteázy; rekombinantní proteiny; serpiny; Western blot
Citation: EDEROVÁ, Monika. Příprava mutantního serpinu z klíštěte \kur{Ixodes ricinus}. České Budějovice, 2022. diplomová práce (Mgr.). JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH. Přírodovědecká fakulta

Institution: University of South Bohemia in České Budějovice (web)
Document availability information: Fulltext is available in the Digital Repository of University of South Bohemia.
Original record: http://www.jcu.cz/vskp/64564

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-518332


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > University of South Bohemia in České Budějovice
Academic theses (ETDs) > Master’s theses