Original title:
Role zkrácené fosfatázy PPM1D/Wip1 v nádoru
Translated title:
The role of truncated PPM1D/Wip1 phosphatase in cancer
Authors:
Martiníková, Andra-Stefania ; Macůrek, Libor (advisor) ; Souček, Pavel (referee) ; Mistrík, Martin (referee) Document type: Doctoral theses
Year:
2022
Language:
eng Abstract:
[eng][cze] When encountering damage, the cells activate the DNA Damage Response (DDR) pathway and stop the cell cycle until the DNA is repaired. PPM1D/WIP1 phosphatase resumes the cell cycle after the damage has been repaired, by directly dephosphorylating DNA damage markers. The DDR pathway prevents genome instability or cancer development. Mutations in the Ppm1d gene encoding PPM1D result in an overstable and truncated protein observed both in cancer patients and in cancer cell lines. In this thesis, we used an "in-house" transgenic mouse model in which mutations in the exon 6 of the Ppm1d gene resulted in a truncated PPM1D protein. First, we observed high PPM1D levels and impaired DDR to gamma ionizing radiation (IR) in the mouse thymi having truncated PPM1D (Ppm1dT/+ ). We then bred the Ppm1dT/+ mice with the Trp53+/- heterozygote knock-out mice which are prone to thymic lymphoma. The Ppm1dT/+ Trp53+/- double-mutants had a higher frequency of developing IR-induced T-cell lymphomas, compared to the single Trp53+/- mutants. Moreover, truncated PPM1D leads to a defective cell cycle checkpoint activation in human non-transformed RPE cells (RPE1), which then proliferate despite the presence of DNA damage. RPE1 cells also display increased proliferation after replication stress. RPE1 or U2OS cells with...Poškození DNA v buňkách spouští aktivaci buněčne signální dráhy odpovědi na poškození DNA (DDR) do opravení DNA se tak zastaví buněčný cyklus. Opětovné zahájení buněčného cyklu je zahájeno pomocí PPM1D/WIP1 fosfatázy, která po opravení poškození defosforyluje markery poškození DNA. DDR tak brání nestabilitě genomu nebo vývoji rakoviny. Mutace genu Ppm1d pak působí vysoce stabilní zkrácený protein, který je pozorován jak u onkologických pacientů, tak i v rakovinných buněčných liniích. V této dizertační práci jsme využili model transgenní myši, ve které vedly mutace exonu 6 genu Ppm1d k expresi zkrácené varianty PPM1D proteinu. U myší se zkraceným PPM1D v brzlíku/thymu (Ppm1dT/+ ) byly pozorovány jak vysoké hladiny PPM1D proteinu, tak i snížená aktivace dráhy DDR po vystavení IR. Následně byly Ppm1dT/+ myši kříženy s Trp53+/- heterozygotními knock-out myšmi, které jsou náchylné k thymickému lymfomu. Získaní Ppm1dT/+ Trp53+/- dvojití mutanti měli po IR zvýšenou frekvenci T-buněčných lymfomů ve srovnání s mutanty pouze v Trp53+/- . Následně bylo pozorováno, že zkrácená varianta PPM1D vede k defektům aktivace kontrolních bodů buněčného cyklu v lidských netransformovaných RPE buňkách, které pokračují v proliferaci navzdory přítomnému poškození DNA. Po vystavení buněk RPE1 replikačnímu stresu byla...
Keywords:
cancer; cell cycle; checkpoint; phosphatase; buněčný cyklus; fosfatáza; kontrolní bod; nádor
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/178417