Original title:
Exprese genů podílejících se na chronogickém stárnutí v kvasinkových mnohobuněčných strukturách.
Translated title:
Expression of genes involved in chronogical ageing in yeast multicellular structures.
Authors:
Fedorová, Viktória ; Palková, Zdena (advisor) ; Groušl, Tomáš (referee) Document type: Master’s theses
Year:
2022
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Kvasinka Saccharomyces cerevisiae tvoří strukturované mnohobuněčné populace, které v průběhu růstu procházejí několika růstovými fázemi v závislosti na množství přítomných živin v médiu. Poslední růstovou fazí je tzv. chronologické stárnutí, v průběhu kterého se buňky dělí jen minimálně a dochází k tvorbě fyziologicky i metabolicky odlišných subpopulací. Cílem této práce je popsat expresi a buněčnou lokalizaci vybraných genů, které mohou sloužit jako markerové geny specificky exprimované během jednotlivých růstových fází kvasinkových mnohobuněčných populací ve fermentativním a respiračním médiu. Vybrané geny byly metodou transformace fluorescenčně označené připojením GFP proteinu a následně analyzované v průběhu růstu v tekutých médiích. Kmeny se specifickou expresí, lokalizací nebo výraznými rozdíly v expresi mezi dvěma zdroji uhlíku byly analyzovány pomocí Western blot analýzy proteinů a během růstu na pevných médiích ve formě mikrokolonií. Na základě množství exprimovaného proteinu v buňkách bylo vybráno 5 genů, které byly specificky exprimovány během exponenciální a stacionární fáze růstu a jejich exprese nebo lokalizace se výrazně lišila při růstu na fermentativním a respiračním médiu. Klíčová slova: kvasinky, růstové fázy, exprese genů, fermentace, respiraceThe yeast Saccharomyces cerevisiae forms structured multicellular populations that undergo several growth phases during growth depending on the amount of nutrients present in the medium. The last growth phase is called chronological ageing, during which cell division is minimal and physiologically and metabolically distinct subpopulations are formed. The aim of this work is to describe the expression and cellular localization of selected genes that may serve as marker genes specifically expressed during the different growth phases of yeast multicellular populations in fermentative and respiratory media. The selected genes were tagged with the GFP gene using the transformation method and stran fluorescence subsequently analyzed during growth in liquid media. Strains with specific expression, localization, or significant differences in expression between the 2 carbon sources were analyzed by Western blots and during growth on solid media as microcolonies. Based on the amount of protein expressed in the cells, 5 genes were selected that were specifically expressed during the exponential and stationary growth phases, and their expression or localization differed significantly during growth on fermentative and respiratory media. Key words: yeast, growth phases, gene expression, fermentation, respiration
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/176476