Original title:
Diagnostický potenciál extracelulárních vesikulů
Translated title:
Diagnostic potential of extracellular vesicles
Authors:
Klementová, Helena ; Holada, Karel (advisor) ; Živný, Jan (referee) Document type: Master’s theses
Year:
2022
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Extracelulární vesikuly (EV) jsou membránové váčky produkované buňkami. Řada publikovaných prací popisuje změny počtu EV v tělních tekutinách za různých patologických stavů. V naší práci jsme pomocí průtokové cytometrie analyzovali počty EV v periferní krvi pacientů s roztroušenou sklerózou (MS) a v pupečníkové krvi u nedonošených novorozenců se zánětem. Metodu detekce jsme extenzivně optimalizovali a přítomnost EV ve vzorcích ověřili pomocí elektronové mikroskopie. U pacientů s nově diagnostikovanou MS jsme nalezli snížený počet T-lymfocytárních a fosfatidylserin pozitivních EV ve srovnání se zdravými dárci krve. U MS pacientů vyžadujících změnu léčby byl nižší počet B-lymfocytárních EV ve srovnání s neurologickými kontrolami. Podobně byl nižší počet endotelových EV u MS pacientů podstupujících biologickou léčbu Natalizumabem. V pupečníkové krvi nedonošených novorozenců se zánětem jsme pozorovali signifikantně zvýšené počty placentárních, endoteliálních a destičkových EV oproti nedonošeným novorozencům bez zánětu. Ve srovnání s donošenými kontrolami nebyly změny v počtech EV signifikantní. Počet endoteliálních EV v pupečníkové krvi koreloval s koncentrací IL-6 v žilní krvi novorozenců. Podobně koreloval i počet destičkových a fosfatidylserin pozitivních EV s koncentrací volného hemoglobinu v...Extracellular vesicles (EV) are membrane particles produced by cells. Many published papers describe changes in the level of EV in body fluids under various pathological conditions. In our study, we analyzed the numbers of EV in the peripheral blood of patients with multiple sclerosis (MS) and in the umbilical cord blood of preterm newborns with inflammation using flow cytometry. We extensively optimized the detection method and verified the presence of EV in the samples using electron microscopy. We found a reduced number of T-cell and phosphatidylserine-positive EV in patients with newly diagnosed MS compared to healthy blood donors. In MS patients requiring a change in the treatment, the number of B-cell EV was lower compared to neurological controls. Similarly, the level of endothelial EV was lower in MS patients receiving Natalizumab treatment. In the umbilical cord blood of preterm newborns with inflammation, we observed significantly increased numbers of placental, endothelial and platelet EV compared to preterm newborns without inflammation. Compared to the full-term controls, the changes in EV numbers were not significant. The number of endothelial EV in umbilical cord blood correlated with the concentration of IL-6 in the venous blood of newborns. Likewise, the number of platelet and...
Keywords:
diagnosis; Extracellular vesicles; flow cytometry; multiple sclerosis; preterm birth; diagnostika; Extracelulární vesikuly; průtoková cytometrie; předčasné porody; roztroušená skleróza
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/173364