Original title:
Konjugáty biomolekul s nanodiamanty: příprava a aplikace.
Translated title:
Biomolecule conjugates with nanodiamonds: preparation and application
Authors:
Šlegerová, Jitka ; Konvalinka, Jan (advisor) ; Vaněk, Ondřej (referee) Document type: Master’s theses
Year:
2013
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] ČESKÝ ABSTRAKT Fluorescenční nanodiamanty jsou perspektivním materiálem pro tvorbu fluorescenčních značek využitelných v biologických systémech pro zobrazování. Jejich fluorescence nepodléhá fotodestrukci a nedochází k jejímu blikání. Nanodiamanty emitují fluorescenci v červené oblasti vlnových délek, a tudíž oddělitelnou od vlastní fluorescence buněk. Pro použití nanodiamantů jako fluorescenčních značek je třeba zlepšit jejich chování v živých systémech. Zejména je třeba zajistit aglomerační stálost částic v biologických médiích, zabránit jejich nespecifické interakci s proteiny a umožnit kovalentní modifikaci dalšími molekulami. Proto byly na nanodiamantových částicích vytvořeny obaly z hydrofilních polymerů a následně modifikovány transferinem nebo inhibitorem glutamátkarboxypeptidasy II. Tyto molekuly se vážou na specifické receptory na povrchu rakovinných buněk a umožňují efektivní internalizaci částic do buněk. Konjugáty byly úspěšně připraveny a v případě konjugátu inhibitoru glutamátkarboxypeptidasy II s nanodiamantem byla navíc ověřena schopnost vazby na příslušný receptor. Nicméně vliv transferinu nebo inhibitoru glutamátkarboxypeptidasy II na internalizaci nebyl dostatečně prokázán kvůli nespecifické interakci nanodiamantů s buněčnou membránou. Také použitá optimalizace polymerních obalů...ENGLISH ABSTRACT Fluorescent nanodiamonds are a perspective material for the preparation of fluorescent labels for bioimaging due to their stable fluorescence. Contrary to other compounds, nanodiamonds do not photobleach or photoblink. Furthermore, nanodiamonds emit fluorescence in the red part of the spectrum which is well separated from auto-fluorescence. However, before the employment of nanodiamonds as fluorescent labels in biological systems, several properties have to be improved. Primarily, their colloidal stability in biological media has to be ensured. Preventing of non-specific interactions of nanodiamonds with proteins is next crucial step. Finally, it is necessary to enable their high-yield further modifications with various molecules. Hydrophilic polymer coating surrounding a nanodiamond particle was introduced as a successful modification. Coated nanodiamonds were subsequently modified with transferrin or the inhibitor of glutamate carboxypeptidase II. These molecules bind specifically to receptors on cell membranes and enable cellular internalization. Nanodiamond conjugates were successfully prepared and the ability of binding to respective receptors was verified for the nanodiamond conjugate with the inhibitor of glutamate carboxypeptidase II. However, the effect of transferrin or the...
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/54521