Original title:
Analýza biologicky aktivních látek moderními separačními metodami
Translated title:
Analysis of biologically active substances by modern separation methods
Authors:
Bierhanzl, Václav ; Čabala, Radomír (advisor) ; Pacáková, Věra (referee) ; Sýkora, David (referee) Document type: Doctoral theses
Year:
2018
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Disertační práce se věnuje stanovení fosfolipidů a jejich polárních částí metodami plynové a kapalinové chromatografie, kapilární elektroforézy a hmotnostní spektrometrie. Fosfolipidy jsou nejvýznamnějšími polárními lipidy a dělí se do tříd podle fosforylované funkční skupiny. Fosfolipidy jsou zastoupeny v buněčných membránách, a právě zastoupení fosfolipidových tříd či jeho změny slouží ke sledování vlivu vnějších podmínek na buňky. V současnosti se pro analýzu zastoupení fosfolipidových tříd používá TLC, jež pro svou časovou náročnost nevyhovuje potřebám pro výzkum např. mikrobů. Předkládaný soubor článků se zabývá klasifikací fosfolipidů, které produkuje kmen bakterie Bacillus subtilis, vybraný jako producent surfaktinu, potenciálního antibiotika s detergentními účinky. Publikované metody tak mohou být využity při výzkumu optimálních podmínek kultivace. Jelikož mohou mastné kyseliny fosfolipidových molekul ovlivňovat stanovení poměru fosfolipidových tříd, bylo nutno vyvinout metody pro stanovení odštěpených fosforylovaných částí (polárních hlavic). Byly vyvinuty metody kapilární elektroforézy a plynové chromatografie. Podmínky plynové chromatografie byly následně optimalizovány pro souběžné stanovení s mastnými kyselinami. Další část práce se zabývá alternativním přístupem, představujícím přímý...The thesis is dedicated to the phospholipids and their polar headgroups analysis by gas chromatography, capillary electrophoresis and mass spectrometry. Phospholipids are the most important polar lipids and they are classified into phospholipid classes according to their phosphorylated groups. Phospholipids can be found in cell membranes and the changes in their ratio are monitored to research the impact of external conditions on cells. Actually thin layer chromatography is still used for phospholipid class ratio analyses. It is not suitable for microbiological research due to its time demandingness. The presented compendium of papers engaged in phospholipid classification is targeted on Bacillus subtilis strain, which produces potential antibiotics with detergent effect - surfactin. Published methods can be used for research of optimal conditions for producing microbe cultivation. Because non-polar parts of the phospholipid molecule (fatty acids) can affect the analysis methods on spliced polar headgroups have to be designed. Capillary electrophoresis and gas chromatography methods were developed and the latter one was further optimized for simultaneous analysis with fatty acids. Additional part deals with an alternative approach which consists in direct injection on mass spectrometer of intact...
Keywords:
CE; GC; HPLC; MS; phospholipids; CE; fosfolipidy; GC; HPLC; MS
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/101532