Original title: Komplementární analýza prokaryotických buněk pomocí elektronové mikroskopie a Ramanovy spektroskopie
Translated title: Complementary analysis of procaryotic cells by electron microscopy and Raman spectroscopy
Authors: Ikrényiová, Terézia ; Sedláček, Petr (referee) ; Hrubanová, Kamila (advisor)
Document type: Master’s theses
Year: 2021
Language: slo
Publisher: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract: [slo] [eng]
Diplomová práca sa zaoberá v teoretickej časti konvenčnými metódami analýzy bakteriálnych buniek, polyhydroxyalkanoátmi, Ramanovou spektroskopiou a elektrónovou mikroskopiou. V experimentálnej časti práce je opísaná produkcia polyhydroxybutyrátu vybranými termofilnými baktériami a ich analýza pomocou plynovej chromatografie, kryogénnej skenovacej elektrónovej mikroskopie a Ramanovej spektroskopie. Vybraná vzorka bola analyzovaná aj na transmisnom elektrónovom mikroskope. Porovnaním výsledkov dosiahnutých použitím vyššie spomenutých metód bolo zistené, že najväčší obsah PHB akumulovala baktéria Schlegelella thermodepolymerans. Najmenšie množstvo PHB bolo dosiahnuté u baktérie Rubrobacter xylanophilus. Analýzou kryo-SEM fotografií vzoriek baktérií bol potvrdený predpoklad, že u PHB granúl dochádza k plastickej deformácii ihlicovitého tvaru, ktorá vzniká pri mrazovom lámaní vzorky. Taktiež bolo zistené, že charakterizácia bakteriálnych buniek vyvodená z mikroskopického pozorovania vzoriek sa zhodovala s ich popisom uvedeným v literatúre. TEM poskytla fotografie s lepším rozlíšením na ktorých boli bunky a PHB podstatne viditeľnejšie. Práca sa zaoberá aj analýzou chemického fingerprintu buniek pomocou Ramanovej spektroskopie. Z nameraných Ramanovych spektier pre jednotlivé vzorky bolo identifikovaných niekoľko biomolekúl. This master thesis deals with conventional methods of bacterial cell analysis, polyhydroxyalkanoates, Raman spectroscopy and electron microscopy in the theoretical part. The production of polyhydroxybutyrate by selected thermophilic bacteria and their analysis by gas chromatography, cryogenic scanning electron microscopy and Raman spectroscopy is described in the experimental part. The chosen sample was analyzed by a transmission electron microscope. Comparing the results from previous mentioned methods it was found that the bacteria Schlegelella thermodepolymerans accumulated the highest amount of PHB. The lowest amount of PHB was obtained by bacteria Rubrobacter xylanophilus. The assumption that the PHB granules formed so-called needle-like plastic deformations during freeze-fracturing was affirmed by cryo-SEM photos analysis. Moreover, it was found that the bacterial cell characterization deduced from microscopic observation of samples corresponded to the description in the literature. TEM provided better resolution photos and in consequence the cells and PHB are more visible. The thesis is also focused on chemical fingerprint analysis of cells by Raman spectroscopy. Several biomolecules were identified by measured Raman spectra for the particular samples.
Keywords: cryo-SEM; electron microscopy; polyhydroxyalkanoates; Raman spectroscopy; TEM; thermophilic bacteria

Institution: Brno University of Technology (web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library.
Original record: http://hdl.handle.net/11012/199768

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-445147


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Brno University of Technology
Academic theses (ETDs) > Master’s theses