Original title: Vliv cytochromu b5 na aktivitu cytochromů P450
Translated title: Effect of cytochrome b5 on activity of cytochromes P450
Authors: Ličko, Vojtech ; Indra, Radek (advisor) ; Feglarová, Tereza (referee)
Document type: Master’s theses
Year: 2020
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
ABSTRAKT Cytochrom b5 (CYB5) je hemový protein schopný redukce cytochromů P450 (CYP) nebo jiných enzymů. Jeho regulační schopnost však byla rovněž pozorována i v apo formě, tedy bez přítomnosti hemové prostetické skupiny v aktivním centru. CYB5 je schopný přijetí elektronu z cytochrom b5 reduktasy (CYB5R) nebo cytochrom P450 reduktasy (CYPOR). Samotná CYPOR je redukována NADPH a je rovněž schopná odevzdání elektronu CYP nezávisle na CYB5. CYB5R je naopak redukována NADH. Schopnost CYB5 přijmout a odevzdat elektron byla studována in vitro na pěti různých substrátech - testosteronu, Sudanu I, aristolochové kyselině I (AAI), ellipticinu a vandetanibu. Tyto substráty byly vybrány podle jejich charakteristických reakcí, jež jsou katalyzovány příslušnými isoformami CYP. Experimenty s těmito substráty byly prováděny v prostředí s rekombinantními CYP připravenými v hmyzích buňkách nebo E. coli nebo v prostředí s jaterními mikrosomy izolovanými z různých organismů. Potkani, z nichž byla většina mikrosomů izolována, byly zároveň premedikovány různými induktory CYP. Pro prokázaní schopnosti CYB5 redukovat CYP nezávisle na CYPOR byly experimenty prováděny v prostředí s NADH nebo NADPH. Tímto způsobem byla prokázána schopnost CYB5 a CYB5R sloužit jako zdroj elektronů při metabolismu testosteronu (CYP3A4) a... ABSTRACT Cytochrome b5 (CYB5) is heme protein capable of reduction of cytochromes P450 (CYP) or some other enzymes. However, his regulative capability was also observed by his apo form, i.e. in absence of heme prosthetic group in the active center. CYB5 can accept electron from cytochrome b5 reductase (CYB5R) or from cytochrome P450 reductase (CYPOR). CYPOR by itself is reduced by NADPH and is also able to forward electron to CYP independently of CYB5. CYB5R on the other hand is reduced by NADH. Efficiency of CYB5 to accept and forward an electron was studied in vitro with five different substrates - testosterone, Sudan I, aristolochic acid I (AAI), ellipticine and vandetanib. These substrates were chosen considering their characteristic reactions, which are catalyzed by their respective isoforms of CYP. The experiments with these substrates were carried out in the medium with recombinant CYPs prepared in insect cells or E. coli or in the medium with hepatic microsomes isolated from different organisms. Rats, from which the majority of these microsomes was isolated, were premedicated by different CYP inducers. The experiments were carried out in medium with NADH or NADPH in order to assess the capability of CYB5 to reduce CYP independently of CYPOR. The capability of CYB5 and CYB5R to act as a...
Keywords: aristolochic acid; benzo[a]pyrene; cytochrome b5; cytochrome P450; ellipticin; Sudan I; vandetanib; aristolochová kyselina; benzo[a]pyren; cytochrom b5; cytochromy P450; ellipticin; Sudan I; vandetanib

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/119817

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-434085


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Master’s theses