Original title: Parazitární proteáza SmCB2 jako cílová molekula pro léčbu schistosomózy
Translated title: Parasitic protease SmCB2 as a target for the treatment of schistosomiasis
Authors: Bakardjieva, Marina ; Mareš, Michael (advisor) ; Mikeš, Libor (referee)
Document type: Master’s theses
Year: 2017
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Krevničky rodu Schistosoma jsou parazitické motolice, které způsobují schistosomózu, závažné onemocnění postihující více než 240 mil. lidí. Proteolytický systém krevniček je nezbytný pro jejich životaschopnost; účastní se důležitých procesů při interakci s hostitelem, jako je trávení potravy, invaze a migrace tkáněmi. Proto jsou proteázy krevniček perspektivními cílovými molekulami pro terapeutický zásah při léčbě schistosomózy. Tato práce se zabývá proteázou katepsin B2 (SmCB2) z krevničky střevní (S. mansoni), jejíž biochemické vlastnosti a biologická funkce nebyly podrobně studovány. Rekombinantní SmCB2 byl připraven pomocí kvasinkového a bakteriálního expresního systému a chromatograficky purifikován. V aktivitním testu in vitro byly identifikovány první účinné inhibitory SmCB2 blokující jeho proteolytickou aktivitu v submikromolárních koncentracích. Byly připraveny specifické polyklonální protilátky proti SmCB2, které byly použity pro imunomikroskopickou lokalizaci této proteázy v povrchové vrstvě parazita. Pomocí ELISA analýzy bylo zjištěno, že SmCB2 je rozeznáván jako parazitární antigen imunitním systémem hostitele v myším modelu schistosomózy. Práce přináší významné informace o SmCB2 jako potenciální cílové molekule pro syntetické inhibitory a jako novém antigenu pro vakcinační studie. Blood flukes of the genus Schistosoma are parasitic trematodes that cause schistosomiasis, a serious disease afflicting more than 240 million people. The proteolytic system of schistosomes is essential for their viability: it participates in important processes during host-parasite interactions such as food digestion, invasion and tissue migration. Thus, schistosomal proteases are promising molecular targets for therapeutic intervention in schistosomiasis treatment. The thesis focuses on the protease cathepsin B2 from S. mansoni (SmCB2) which has not been studied in detail so far in terms of biochemical properties and biological function. Recombinant SmCB2 was prepared using yeast and bacterial expression systems and was chromatographically purified. Using an in vitro activity assay, the first effective inhibitors of SmCB2 were identified which inhibited its proteolytic activity in submicromolar concentrations. Specific polyclonal antibodies against SmCB2 were prepared and used for immunomicroscopic localization of this protease on the surface of the parasite. ELISA analysis demonstrated that SmCB2 is a parasite antigen recognized by the host immune system in the mouse model of schistosomiasis. The thesis provides valuable information about SmCB2 as a potential target molecule for synthetic...
Keywords: immunoanalysis; inhibitor; parasite; protease; imunoanalýza; inhibitor; parazit; proteáza

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/85264

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-355913


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Master’s theses