Název:
Mechanismy imunoregulačního působení B lymfocytů produkujících IL-10 v závislosti na cytokinovém prostředí
Překlad názvu:
Mechanisms of immunoregulatory action of IL-10-producing B lymphocytes in dependence on the cytokine environment
Autoři:
Boháčová, Pavla ; Holáň, Vladimír (vedoucí práce) ; Stříž, Ilja (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2015
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Regulační B lymfocyty (Bregs, regulatory B lymphocytes) představují malou heterogenní subpopulaci B buněk, která se podílí na regulaci imunitních odpovědí mechanismy nezávislými na produkci protilátek. Mezi mechanismy, kterými mohou Bregs působit, patří produkce protizánětlivých cytokinů nebo přímý buněčný kontakt prostřednictvím jejich povrchových molekul. Tato práce se zabývá indukcí supresivních Bregs ze slezinných B lymfocytů u myší in vitro. Cílem je popsat vliv vybraných cytokinů na indukci Bregs z B lymfocytů stimulovaných lipopolysacharidem (LPS, lipopolysaccharide) a stanovit, jakým mechanismem takto indukované Bregs působí. V této souvislosti byla analyzována jejich schopnost produkovat interleukin-10 (IL, interleukin) a exprimovat molekuly FasL (Fas ligand) a PD-L1 (programmed death ligand). Z testovaných cytokinů měl schopnost podporovat vývoj Bregs ze slezinných B lymfocytů stimulovaných LPS pouze IL-12 a interferon-γ (IFN-γ, interferon-γ). Exogenní IFN-γ vyvolával u B lymfocytů stimulovaných LPS zvýšenou produkci IL-10 i expresi genu pro FasL a PD-L1. Dále byl u indukovaných Bregs analyzován vliv na makrofágy a jejich následné působení na T lymfocyty. Za účelem stanovení mechanismů působení makrofágů na T lymfocyty byla měřena exprese kostimulačních molekul CD80 a CD86, exprese genu...Regulatory B lymphocytes (Bregs) represent a small heterogeneous subpopulation of B cells which participate in a regulation of immune responses by the antibody-independent mechanisms. The main mechanisms of Breg action is a production of anti-inflammatory cytokines or a direct cell contact through their surface molecules. This study deals with an induction of suppressive Bregs from mouse spleen B cells in vitro. We were aiming for a description of an influence of the selected cytokines to the induction of Bregs from lipopolysaccharide (LPS)-stimulated B cells and a determination of the mechanism of Breg action. We also analyzed the ability of inducted Bregs to produce interleukin-10 (IL) and to express genes for Fas ligand (FasL) and programmed death ligand 1 (PD-L1) molecules. We found that only two cytokines, IL-12 and IFN-γ, supported development of Bregs in a population of LPS-stimulated B cells. IFN-γ enhanced production of IL-10 and gene expression of FasL and PD-L1. Furthermore, we analyzed effects of Bregs on macrophages and their following action on T cells. Expression of costimulatory molecules CD80 and CD86, gene expression of IL-1α and the production of IL-6 were tested to determine the effects of macrophages on T cells. Macrophages influenced by Bregs had decreased ability to stimulate...