Název:
Separační vlastnosti klasických porézních kolon a povrchově porézních kolon v analýze ambroxolu a jeho tří nečistot
Překlad názvu:
Separation performance of columns packed with fully porous and superficially porous particles in analysis of ambroxol and its three impurities
Autoři:
Slováček, Jan ; Kozlík, Petr (vedoucí práce) ; Tirčová, Barbora (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2016
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Cílem této práce bylo porovnání separace ambroxolu a jeho tří nečistot na koloně s plně porézními částicemi a na kolonách s povrchově porézními částicemi. Byly použity kolony Acquity BEH Shield RP18, Kinetex EVO C18 a Kinetex C18. Byla porovnána separace těchto látek při různých hodnotách pH pufrů (borátový pufr o pH = 9,70 a fosfátový pufr o pH = 7,00 a pH = 3,00) a při různých gradientových programech. Použitím kolon s povrchově porézními částicemi vždy došlo ke zkrácení doby analýzy. Další výhodou bylo snížení zpětného tlaku na koloně oproti koloně s plně porézními částicemi Acquity BEH Shield RP18. V závislosti na druhu kolony a mobilní fáze se také lišila selektivita analytů ke koloně. Nejlepších separačních podmínek bylo dosaženo s kolonou s plně porézními částicemi Acquity BEH Shield RP18 a gradientového programu Metody 2, která obsahovala borátový pufr. Doba analýzy byla 10 minut, poslední pík eluuoval v deváté minutě. Dávkovač vzorků byl temperován na teplotu 10 řC a nástřik byl 2 μl. Kolona byla temperována na 30 řC. Detekce probíhala při vlnové délce 247 nm. Složka A obsahovala 10mM borátový pufr o pH = 9,70 a složkou B byl acetonitril. Při použití fosfátového pufru o pH = 7,00 byly pro separaci nejvhodnější kolony s povrchově porézními částicemi. Docházelo k vyšším účinnostem, menším...This work was focused on the comparison of the separation of ambroxol and its three impurities with a column contained fully porous particles (Acquity BEH Shield RP18) and with two core-shell columns (Kinetex EVO C18 a Kinetex C18). Different pH values of buffer (borate buffer with pH = 9.70 and a phosphate buffer with pH = 7.00 and pH = 3.00) and different gradient programs were tested for separation of analytes. Compared to the column with fully porous particles (Acquity BEH Shield RP18), core-shell columns provided shorter analysis time. Lower backpressure and different selectivity depend on a separation system. The best separation conditions were obtained with the column containing fully porous particles (BEH Shield RP18) and gradient according to program Method 2 with the borate buffer. Analysis time was 10 minutes and the last peak had the retention time about 9 min. Autosampler was tempered at 10 ř C and injection volume was 2 μl. The column was tempered at 30 řC. Detection was set at wavelength of 247 nm. Component A contained 10 mM borate buffer with pH = 9.70 and component B was acetonitrile. The best separation was achieved by core-shell columns while phosphate buffer with pH = 7.00 was used. Higher efficiency, smaller peak widths and higher sensitivity were observed. Phosphate buffer...