Home > Academic theses (ETDs) > Master’s theses > Příprava rekombinantních proteinů DS47 a IDGF3 v bakulovirovém expresním systému a jejich funkční testy na buňkách \kur{Drosophila melanogaster in vitro}
Original title:
Příprava rekombinantních proteinů DS47 a IDGF3 v bakulovirovém expresním systému a jejich funkční testy na buňkách \kur{Drosophila melanogaster in vitro}
Authors:
ROUHOVÁ, Lenka Document type: Master’s theses
Year:
2017
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Cílem této práce byla příprava dvou rekombinantních růstových faktorů Drosophila melanogaster, DS47 a IDGF3. Fragmenty cDNA kódující tyto dva proteiny byly zaklonovány do přenosového vektoru a v Escherichia coli rekombinovány do bakulovirové sekvence ve formě bakmidu. Rekombinantní bakulovirová DNA byla transfekována do hmyzích buněk. Bakulovirem infikované buňky exprimovaly proteiny s histidinovou kotvou, které byly z média purifikovány afinitní chromatografií na kolonce s niklovou agarózou. Funkce izolovaných rekombinantních proteinů byla otestována in vitro testy přežívání buněk v kultuře.The aim of this work was the production of two Drosophila growth factor proteins, DS47 and IDGF3. The cDNAs encoding the two proteins were cloned into a baculovirus transfer vector and used for the recombination with bacmid form of baculovirus maintained in Escherichia coli. The recombinant baculoviral DNA was transfected to insect cells. Baculovirus- infected cells produced recombinant His-tagged proteins which were purified from growth media by nickel-agarose affinity chromatography. The function of recombinant proteins was verified by in-vitro growth/survival tests.
Keywords:
cell culture; Chit; drosophila melanogaster; DS47; growth factors; IDGF3; IDGF6; isolation; recombinant proteins; buněčná kultura; Chit; drosophila melanogaster; DS47; IDGF; IDGF3; IDGF6; izolace; rekombinantní proteiny; růstové faktory Citation: ROUHOVÁ, Lenka. Příprava rekombinantních proteinů DS47 a IDGF3 v bakulovirovém expresním systému a jejich funkční testy na buňkách \kur{Drosophila melanogaster in vitro}. České Budějovice, 2017. diplomová práce (Mgr.). JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH. Přírodovědecká fakulta
Institution: University of South Bohemia in České Budějovice
(web)
Document availability information: Fulltext is available in the Digital Repository of University of South Bohemia. Original record: http://www.jcu.cz/vskp/45785