Název:
Detekce nestinu ve tkáních
Překlad názvu:
Detection of nestin in tissues
Autoři:
Vařejčková, Michala ; Kudláčková, Zděnka (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2012
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Michala Vařejčková Vedoucí práce: PhDr. Zdeňka Kudláčková, Ph.D. Konzultant: prof. MUDr. Jaroslav Mokrý, Ph.D. Název diplomové práce: Detekce nestinu ve tkáních Cíl práce: Cílem této práce bylo pomocí imunohistochemických metod dokázat, že se intermediální filamentum nestin vyskytuje nejen v kapilárách, ale i ve velkých cévách - arteriích a vénách, což doposud nikdo nezveřejnil. Dále jsme sledovali koexpresi nestinu s proliferačním markerem PCNA. Metody: Experimentální část spočívala ve vyšetření potkaních embryí o stáří 11 a 16 dnů odebraných z potkaních samic Wistar (VELAZ, Praha, Česká republika). Detekce exprese nestinu a PCNA byla provedena různými typy nepřímých imunohistochemických metod. Pro zesílení signálu detekce byl použit EnVision systém nebo biotinylovaný tyramid. Hlavní poznatky: Endotel krevních cév exprimuje nestin různou intenzitou. V některých krevních cévách exprese nestinu chybí. S vyzráváním tkáně je nestin postupně nahrazován zvýšenou expresí jiného typu intermediálního filamenta. Pro identifikaci antigenů, které jsou ve tkáni vyjádřeny jen slabou intenzitou, se jeví optimální amplifikace signálu pomocí tyramidu. Závěr: Výsledky této práce dokládají, že nestin není přítomen...Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Michala Vařejčková Supervisor: PhDr. Zdeňka Kudláčková, Ph.D. Consultant: prof. MUDr. Jaroslav Mokrý, Ph.D. Title of thesis: Detection of nestin in tissues Aim of the work: The aim of this study was to use immunohistochemical methods to show intermediate filament nestin occurs not only in the capillaries but also in large blood vessels - arteries and veins - which has not been published so far. We also investigated coexpression of nestin with a proliferating marker, PCNA. Methods: All studies were performed using embryos 11 and 16 days old from Wistar rats (VELAZ, Prague, Czech Republic). Expression of nestin and PCNA was detected by various types of indirect immunohistochemical method. To amplify a specific signal, we used EnVision system or biotinylated tyramide. Main results: Endothelium of blood vessels expressed nestin with a varying intensity. In some blood vessels expression of nestin was missing. In a developing tissue, nestin is gradually being replaced by increased expression of another type of intermediate filament. To identify tissue antigens that are expressed in a weak intensity, it is better to use signal amplification with tyramide. Conclusion: The results of this study...