Original title:
Metody sledování profilu karnitinových metabolitů v moči a jejich využití v klinické diagnostice
Translated title:
Methods of monitoring the profile of carnitine metabolites in urine and use in clinical diagnosis
Authors:
NOVÁKOVÁ, Martina Document type: Bachelor's theses
Year:
2014
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Tato práce se zabývá sledováním profilu karnitinových metabolitů v moči pacientek s diagnostikovanou rakovinou prsu. L-karnitin je látka velice významná pro metabolismus tuků, a proto některé současné výzkumy ukazují, že by mohl sloužit jako podpůrný prostředek pro léčbu rakoviny postihující různé orgány či tkáně. V teoretické části se práce zabývá obecnou charakteristikou a obecným popisem L-karnitinu a jeho účinkem na organismus. Tato část je rozdělena do kapitol, které shrnují různé informace o L-karnitinu a acylkarnitinech, například se zabývá metabolismem, dále různými účinky v organismu včetně popisu reakcí organismu na nedostatek těchto látek, či jakými metodami a z jakých biologických materiálů můžeme sledovat jejich hladinu. Metody sledování L-karnitinu jsou v práci popsány podrobněji a byly mezi sebou porovnávány na základě dříve publikovaných vědeckých výsledků. Autoři různých vědeckých prací uvádějí postupy a výhody či nevýhody jimi navržených metod pro stanovení L-karnitinu a acylkarnitinů, které byly v této práci podrobně zkoumány a analyzovány a na jejich základě byla navržena mnou prezentovaná metoda pro stanovení karnitinových metabolitů v moči. Závěrem této části je stručný popis nejčastěji používané metody pro stanovení karnitinových metabolitů, kterou je kapalinová chromatografie s hmotnostní detekcí (LC/MS). Pozitivní výsledky studií této metody mě motivovaly k použití této analytické metody i pro mou práci. Výzkumná část zahrnuje vlastní popis práce při přípravě vzorků a celkové nastavení parametrů důležitých pro provedení metody. Vzorky pro výzkum byly získány od pacientek s diagnostikovanou rakovinou prsu z českobudějovické nemocnice. V této části je také popsána úprava vzorků před detekcí, použité materiály, přístroje a chemikálie, a to včetně samotného postupu a nastavení přístroje pro analýzu. Metodou byly získány chromatografické záznamy jednotlivých látek a hmotnostní spektra, která byla jednotlivě zpracovávána pro každou látku zvlášť. Při detekci L-karnitinu a acylkarnitinů v moči pacientek s diagnostikovanou rakoviny prsu byly pro porovnání analyzovány i vybrané vzorky poskytnuté kontrolní skupinou zdravých žen, které nám umožnily sledovat možné rozdíly. Pro přehlednost a základní vhled byl sestaven graf, ve kterém je možné sledovat jen nepatrné rozdíly mezi hladinami karnitinových metabolitů u žen s rakovinou prsu versus kontrolní vzorky. Tento rozdíl není statisticky významný, a to zejména proto, že variabilita mezi jednotlivými jedinci je o řád vyšší než samotné rozdíly mezi sledovanými skupinami. Tento výsledek byl způsoben tím, že do studie nebyly zahrnuty další informace o pacientkách, jako například informace o jejich medikaci či zdravotním stylu, celkové kondici organismu atd. Podrobná studie těchto změn vyžaduje systematickou a časově velmi náročnou práci, která nebyla a ani nemohla být cílem mé bakalářské práce. This study deals with the profiling of carnitine metabolites in the urine of the patients with breast cancer. L-carnitine is a chemical compound that is very important for metabolism of lipids, and therefore some current research suggests that it could serve as a means for the treatment of cancer affecting various organs or tissues. The theoretical part deals with the general characteristics and a description of the L-carnitine and its effect on the body. This part is divided into chapters that summarize various information about L-carnitine and acylcarnitines, for example the metabolism, different effects in the body including a description of responses to the lack of these substances, or methods that can be used for the detection of L-carnitine levels. Methods of monitoring L-carnitine were described in detail and were compared with previously published scientific studies. The authors of scientific studies show procedures, advantages and disadvantages of the proposed methods for determining L-carnitine and acylcarnitines, that were examined in this work in detail and the method for the determination of carnitine metabolites in urine has been proposed. A brief description of the most using methods for the determination of L-carnitine metabolites by liquid chromatography mass spectroscopy (LC / MS) is done the end of this part. I have been motivated with a positive results of studies and I have used this method for analysis in my work. In the research part of my study, the sample preparation protocol and conditions for the application of the method are described. The samples from the hospital of České Budějovice have been obtained from patients with fresh breast cancer diagnosis. In this part, the treatment of samples prior to detection, the used materials, equipment, chemicals, process and device settings for analysis were described. The method provided chromatograms and mass spectra of the individual substances. Samples of patients were compared with samples of control group of healthy women, which enabled us to observe possible differences. For clarity, the graph was drawn up and it was possible to monitor only slight differences between the levels of carnitine metabolites in women with breast cancer versus the control samples. This difference is not statistically significant, especially because the variability between individuals is higher of an order of magnitude than the actual differences between the two groups. This result is due to the fact that the study has not included additional information on patients such as information about their medications or health style, the overall condition of the body, etc. A detailed study requires a systematic and very time consuming work, which was not the aim of my thesis. Liquid chromatography with hydrophilic interactions method associated with mass detector used for monitoring of L-carnitine and its metabolites profiles gives positive results, is not time consuming, affordable and above all allow suitable for the detection of substances that have been selected for my work.
Keywords:
acylcarnitines; HILIC; L-carnitine; LC/MS; acylkarnitiny; HILIC; L-karnitin; LC/MS Citation: NOVÁKOVÁ, Martina. Metody sledování profilu karnitinových metabolitů v moči a jejich využití v klinické diagnostice. České Budějovice, 2014. bakalářská práce (Bc.). JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH. Zdravotně sociální fakulta
Institution: University of South Bohemia in České Budějovice
(web)
Document availability information: Fulltext is available in the Digital Repository of University of South Bohemia. Original record: http://www.jcu.cz/vskp/38728
guest ::
