Original title:
Detekce prionových proteinů a jejich interakce s kovy a metalothioneinem
Authors:
Cardová, Alžběta Document type: Master’s theses
Year:
2014
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Prionová onemocnění vznikají konformační změnou buněčného prionového proteinu(PrPC) struktury alfa-helixu na jeho patologickou isoformu (PrPSc), která nabývá konformace beta-skládaného listu. Vlastnosti PrPC v mozku stále nejsou dostatečně prozkoumány, ale předpokládá se jeho afinita k iontům kovů. Dalším proteinem, který má kov-vázající vlastnosti je i metalothionein (MT). Mozkově specifická isoforma MT se nazývá MT-III a předpokládá se její účast na udržování koncentrace kovových iontů v mozku. Cílem této práce byla příprava rekombinantního buněčného prionového proteinu v E. coli. Dále využití tohoto proteinu k odhalení interakcí mezi ionty kovů(Cu, Zn), MT a PrPC pomocí metody diferenční pulzní voltametrie. Poslední část pak byla věnována stanovení hladiny MT-III v prion-infekčních a neinfekčních myších mozkových tkáních různých genotypů.Prion diseases are formed by a conformational change of prion-like protein (PrPC) with alfa-helix structure to the pathological isoform - prion (PrPSc) which acquires beta-sheet structure. PrPC physiological properties in the brain are insufficiently described but there is an assumption of its affinity to metal ions. Another protein with metal-binding ability is metallothionein (MT). Brain specific isoform of MT is called MT-III and it is assumed to participate in maintenance of metal ions concentration in the brain. Aim of this study was to prepare recombinant human PrPC in E. coli. Furthermore, this protein was used to detect interactions between metal ions (Cu, Zn), MT and PrPC by differential pulse voltammetry method. The final part was devoted to the MT-III determination in different genotypes of prion-infected and non-infectious mouse brain tissues.
Keywords:
elektrochemie; kovy; metalothionein; metalothionein-III; MT; MT-III; měď; prion; prionová onemocnění; PrPC