Original title: Detekce fytoplazem pomocí DNA-mikročipu
Translated title: Detection of phytoplasmas using DNA-microarrays
Authors: MARKOVÁ, Jaroslava
Document type: Master’s theses
Year: 2014
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Cílem práce bylo optimalizovat metodu detekce fytoplazem pomocí DNA-mikročipu. To zahrnovalo vhodnou metodu izolace genetického materiálu fytoplazmy, vývoj a optimalizaci PCR k namnožení různých skupin fytoplazem, optimalizaci detekce DNA na mikročipu a analýzu sekvencí fytoplazem k návrhu potenciálních lepších prób. PCR byla optimalizována pro sbírkové izoláty, poté i pro přírodní vzorky. Od všech zástupců 16Sr skupin sbírkových izolátů se podařilo získat sekvence a detekovat v nich fytoplazmu pomocí hybridizace. U přírodních vzorků se podařilo detekovat fytoplazmu ve vzorcích řepky olejky (Brassica napus), jetele lučního (Trifolium pretense), třapatky nachové (Echinacea purpurea) a jabloně domácí (Malus domestica). V DNA z hmyzích vektorů to bylo pouze u jediného vzorku s označením 202/6 ze skupiny 16Sr-XII. Sekvence jetele lučního a řepky olejky se shodují s databázovými vzorky skupiny 16Sr-I "Aster yellows". The aim of this thesis was to optimize the method of detection of phytoplasmas using DNA-microarray. It consisted of testing an appropriate method of genetic material isolation, development and optimization of PCR to amplify different groups of phytoplasmas, optimization of detection of DNA at a microarray, and sequence analysis of phytoplasma in order to design more suitable probes. PCR was first optimized for collection isolates, then also for natural samples. All 16Sr groups from the collection were sequenced and phytoplasmas were detected in them by hybridization. Phytoplasmas were detected also in natural samples: oilseed rape (species Brassica napus), red clover (Trifolium pretense), purple coneflower (Echinacea purpurea), and apple tree (Malus domestica). Using the DNA from insect vectors, only sample 202/6 from the group 16Sr-XII was positive. The sequence of red clover and oilseed rape correspond with the database samples in the group 16Sr-I "Aster yellows".
Keywords: DNA-microarray; phytoplasma; polymerase chain reaction; reverse transcription; DNA-mikročip; fytoplazma; polymerázová řetězová reakce; reverzní transkripce
Citation: MARKOVÁ, Jaroslava. Detekce fytoplazem pomocí DNA-mikročipu. České Budějovice, 2014. diplomová práce (Ing.). JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH. Fakulta zemědělská a technologická

Institution: University of South Bohemia in České Budějovice (web)
Document availability information: Fulltext is available in the Digital Repository of University of South Bohemia.
Original record: http://www.jcu.cz/vskp/33440

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-174247


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > University of South Bohemia in České Budějovice
Academic theses (ETDs) > Master’s theses