|
|
Úloha exosomů u chronické myeloidní leukemie
Březinová, Lenka ; Krijt, Matyáš (vedoucí práce) ; Holada, Karel (oponent)
Exosomy jsou extracelulární váčky o velikosti 30-150 nm, jejichž funkce je u chronické myeloidní leukemie (CML) zkoumaná kvůli jejich vlivu na proliferaci CML buněk, remodelaci kostní dřeně, angiogenezi a rezistenci na léčbu tyrosin-kinázovými inhibitory (TKIs). Ačkoliv byly vyvinuty účinné TKIs inhibující BCR-ABL kinázu, přesto zůstává 20-30 % pacientů na léčbu rezistentní. Rezistence CML buněk na léčbu je podporována exosomy. Exosomy přenášejí proteiny, nukleové kyseliny, chemokiny i malé molekuly, které podporují antiapoptotické, respektive tlumí proapoptotické procesy. Antiapoptotické procesy jsou podporovány zejména zvýšenými hladinami proteinů: TGF-β1, USP6 a FGF2 a různorodých zástupců RNA: miR-365, miR-21, Hsa_circ_0058493 a mRNA pro BCR-ABL. Snaha leukemických buněk je naopak snížit množství proapoptotických molekul, mezi které patří miR-320, miR-328 a miR-146a-5p. Leukemické buňky prostřednictvím exosomů modifikují mikroprostředí kostní dřeně tak, aby je podporovalo, a dále ovlivňují expresi adhezních a proangiogenních molekul. Důležitou roli v těchto procesech hrají miR-126, miR-210 a miR-92a. Vzhledem k variabilitě přenášených molekul není překvapující množství procesů ovlivněných CML exosomy ani jejich potenciální využití v léčbě CML, jak již bylo dokázáno v případě využití...
|
|
|
Kultivace klíšťaty přenášených babesií a charakterizace jejich proteasomu jako nového terapeutického cíle
REICHENSDÖRFEROVÁ, Dominika
Klíšťaty přenášená babesie je důležitou hrozbou pro lidi i zvířata. V porovnání s její příbuznou malárií jsou tito parazité infikující Apikomplexa široce rozšíření a v současné době pro léčbu babesiósy neexistuje specifický lék. Proto se v této práci zaměřujeme na optimalizaci kultivace B. divergens v kultuře bovinních erytrocytů (in vitro) a B. microti v BALB/c myších (in vivo). 26S proteasom babesií byl ověřen naší laboratoří jako terapeutický cíl. Pro optimalizaci izolace proteasomu babesií bylo aplikováno několik strategií, použivaných pro izolaci 26S proteasomu P. falciparum, mezi které patří ultrasonikace, mechanická homogenizace a ultracentrifugace. Poté byla pro purifikaci 26S proteasomu z lyzátů B. microti použita metoda ionexové chromatografie. Mezi budoucí cíle patří optimalizace protokolů pro purifikaci proteasomu B. microti ionexovou chromatografií, imunoprecipitací a pomocí afinity k ubiquitinu. Poté bude purifikovaný proteasom analyzován zjištěním substrátové specifity katalytických podjednotek, metodou CryoEM, popřípadě proteinovou krystalografií. Hlavním cílem dlouhodobého projektu laboratoře je navrhnout a ověřit selektivní inhibitor proteasomu, který by mohl být využit pro chybějící specifickou léčbu babesiosy.
|
host ::
RSS.