|
|
Sekvenční injekční chromatografie-testování a srovnání moderních chromatografických kolon
Molnárová, Petra ; Chocholouš, Petr (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát: Bc. Petra Molnárová Školitel: PharmDr. Petr Chocholouš, PhD. Název diplomové práce: Sekvenční injekční chromatografie - testování a srovnání moderních chromatografických kolon Tato diplomová práce se zabývá porovnáváním dvou chromatografických kolon pro separaci vybraných vitamínů B (thiaminu, nikotinamidu, pyridoxinu, riboflavinu a kyseliny listové) a vitamínu C v systému Sekvenční injekční chromatografie. Vyvíjená metoda využívala UV detekci při 220, 272 a 290nm. Byla testována kolona Ascentis Express HILIC (3 cm x 4,6 mm, 2,7 µm) s použitím mobilní fáze z acetonitrilu a octanu amonného. Na této koloně nebyla vyvinuta taková metoda, která by umožnila odseparovat všech 6 vitamínů. Látky byly eluovány v nízkých retenčních časech a s nízkým rozlišením. Na koloně Ascentis Express RP-Amide (3 cm x 4,6 mm, 2,7 µm) byla vyvinuta metoda za použití gradientové eluce, která umožnila rozdělit všechny látky. Mobilní fáze byla složena s acetonitrilu a kyseliny fosforečné o pH 1,8. Byla provedena kalibrace, opakovatelnost a výtěžnost, avšak tato metoda nevykazovala takovou účinnost, aby mohla být validována. Pro výtěžnost byl jako srovnávací vzorek použit energetický nápoj SHOCK! obsahující dané vitamíny.
|
|
|
Sledování norfloxacinu, ciprofloxacinu a enrofloxacinu pomocí HPLC-FD ve vzorcích odpadních vod a jejich vliv na životní prostředí
Spurná, Marie ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
8 SOUHRN Znalost koncentrace léčiv v životním prostredí je velice důležitá. Hlavním důvodem je to, že jsou to látky s účinkem na živý organismus a jejich fyzikálně- chemické vlastnosti jsou často podobné škodlivým xenobiotikům. Antibiotika patří mezi nejčastěji předepisovaná léčiva. Fluorochinolonová antibiotika jsou používána k terapii i k profylaxi lidských i zvířecích onemocnění. Především k léčbě širokého spektra respiračních a enterických infekcí a infekcí močových cest. Kromě toho jsou také v subterapeutický dávkých užívány ke stimulaci růstu hospodářských zvířat. Podstatou účinku fluorochinolonů je inhibice DNA-gyrazy. Jsou účinné proti gram- negativním i gram-pozitivním bakteriím. Účinek fluorochinolonů je závislý na jejich chemické struktuře, nezbytná je přítomnost volné karboxylové skupiny v poloze 3 a oxoskupiny v poloze 4. Prostřednictvím těchto skupin dochází k vazbě na DNA-gyrázu. Karboxylová skupina a amino skupina určují jejich acidobazické vlastnosti. Jejich aktivita je tedy také významně závislá na pH prostředí. 25-75% podaných antibiotik je z organismu vyloučeno v nezměněné formě. Metabolismem vznikají sloučeniny, které mohou být méně nebo více učinné než původní látka. Část těchto sloučenin je odstraněno v čistírnách odpadních vod. Určitý podíl ale ve vodě zůstává. Tak se fluorochinolony...
|
|
| |
|
|
Studie faktoru teploty při HPLC gradientové a isokratické separaci
Habart, Miroslav ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
4 Abstrakt Tato diplomová práce byla zaměřena na studii vlivu teploty na analýzu fenolických kyselin a flurorochinolonových antibiotik při analáze vysoko účinnou kapalinovou chromatografií. Analýza probíhala na chromatografické koloně Zorbax SB C 18 (50 x 4,6 mm; 1,8 µm) za použití ultrafialové (UV) detekce. V rámci optimalizace metody byly zjišťovány vhodné podmínky pro separaci fenolických kyselin a fluorochinolonových antibiotik. Byl sledován vliv složení a koncentrace vodné složky mobilní fáze a především vliv teploty. Při analýze fenolických kyselin byla použita gradientová eluce. Mobilní fáze se skládala z 0,1% roztoku kyseliny mravenčí a metanolu. Analýza fluorochinolonových antibiotik probíhala isokraticky a mobilní fáze byla složena též z 0,1% roztoku kyseliny mravenčí a metanolu. Základním cílem této diplomové práce bylo s pomocí zvýšené teploty urychlit analýzu a tím ušetřit čas a zároveň i použitá rozpouštědla tvořící mobilní fázi. Při analýze fenolických kyselin byl tento předpoklad splněn a při vyšších teplotách došlo k výraznému urychlení analýzy při dobrém rozlišení jednotlivých píků. Naopak nižší teplota než laboratorní byla příznivá pro analýzu fluorochinolonů. U metod pro fenolické kyseliny i pro fluorochinolonová antibiotika byly provedeny testy způsobilosti systému nástřikem roztoku...
|
|
|
Disperzní kapalinová mikroextrakce propofolu v SIA systému se dvěma ventily a fluorescenční detekcí
Rojková Kovačíková, Zuzana ; Boonjob, Warunya (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Zuzana Rojková-Kovačíková Školitel: Warunya Boonjob, Ph.D. Konzultant: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Disperzní kapalinová mikroextrakce propofolu v SIA systému se dvěma ventily a fluorescenční detekcí Tato diplomová práce se zabývá stanovením propofolu pomocí automatizace disperzní kapalinové mikroextrakce (DLLME) v SIA systému s fluorescenční detekcí. Za extrakční rozpouštědlo byl zvolen amylacetát, jako disperzní činidlo byl použit acetonitril. Byly optimalizovány parametry měření v SIA systému. Lineární závislost intenzity fluorescence na koncentraci propofolu s korelačním koeficientem 0,9945 byla nalezena v koncentračním rozmezí 8 - 64 µg/ml. Byl vypočten limit detekce (LOD = 0,83 µg/ml) a limit kvantifikace (LOQ = 7,25 µg/ml). Opakovatelnost byla ověřena pro koncentrace 16 a 64 µg/ml, hodnoty relativních směrodatných odchylek (RSD) byly 1,54% a 1,52%. Čas analýzy byl 152 s v případě jednoho nástřiku vzorku.
|
|
|
Identification of phenolic compounds in plant extracts using UHPLC-MS/MS
Kmeťová, Ivana ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Ivana Kmeťová Školiteľ: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Identifikace fenolických látek v rostlinných extraktech s využitím UHPLC-MS/MS Cieľom tejto diplomovej práce bola identifikácia fenolických látok v suchom lyofilizovanom vodnom extrakte z listov jahody obyčajnej (Fragaria Vesca L.) s použitím ultra- vysoko účinnej kvapalinovej chromatografie spojenej s elektrosprejovou tandemovou hmotnostnou spektrometriou (UHPLC-ESI-MS/MS), ktorá poskytuje výhody pri identifikácii komplexných rastlinných vzoriek. Fenolické zlúčeniny reprezentujú skupinu vysoko komplexných prirodzene sa vyskytujúcich molekúl v rastlinách, ktoré majú širokú škálu biologických a fyziologických funkcií a slúžia ako chemotaxonomické markerove zlúčeniny. Táto práca bola zameraná na flavonoidy a im príbuzné látky. Pre separáciu bola použitá UHPLC miesto bežnejšej HPLC pre svoju oveľa vyššiu separačnú účinnosť, ktorá je kľúčová pri úspešnej separácii komplexných vzoriek. Navyše, UHPLC umožnila skrátiť dobu analýzy. Určenie štruktúry fenolických zlúčenín bolo založené na vyhodnotení a porovnaní MS a MS/MS spektier v pozitívnom i v negatívnom iónovom režime ESI. Využité boli základné skeny, skeny...
|
|
|
HPLC stanovení vybraných insekticidů v kosmetickém přípravku
Kameníčková, Daniela ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Daniela Kameníčková Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: HPLC stanovení vybraných insekticidů v kosmetickém přípravku Byly stanovovány účinné složky fenoxykarb a permetrin v kosmetickém přípravku Arpalit® Neo šampon proti parazitům s bambusovým extraktem. Analýza byla provedena metodou HPLC za využití kolony RP-Amide o rozměrech 100 x 3 mm s velikostí částic 2,7 μm a detekce pomocí UV při vlnové délce 225 nm. Separace probíhala za izokratické eluce s mobilní fází acetonitril - voda v poměru 55:45 průtokovou rychlostí 1,0 ml/min. Teplota při průběhu měření byla 60 řC. Pro vyhodnocení byla použita metoda vnitřního standardu, kdy jako vnitřní standard bylo použito barvivo sudan II. Pro separaci byl potřeba časový interval 6 min. Retenční čas fenoxykarbu byl 1,01, sudanu II 2,87 a permetrinu 4,42 min. Rozlišení chromatografických píků fenoxykarbu a sudanu II bylo 10,612 a sudanu II a permetrinu 6,524. Klíčová slova: fenoxykarb, permetrin, HPLC.
|
|
|
Využití SIA systému pro stanovení hliníku
Fialová, Barbora ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Barbora Fialová Školitel: PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Využití SIA systému pro stanovení hliníku Tato diplomová práce se zabývá stanovením hlinitých iontů ve vzorcích povrchové vody pomocí metody SIA. Pro stanovení hlinitých iontů byl použit postup uvedený ČSN 83 0520 část 22 B. Podstatou stanovení je komplexotvorná reakce hlinitých iontů s aluminonem, v průběhu reakce dochází ke vzniku barevného komplexu, intenzita zbarvení je přímo úměrná koncentraci hlinitých iontů ve vzorku. Detekce byla provedena spektrofotometricky. Nejdříve byly optimalizovány reakční podmínky ve zkumavce. Zde byla ověřena lineární závislost intenzity zbarvení na koncentraci Al ve vzorku pro rozsah koncentrací 0,02 - 1 mg/l s korelačním koeficientem 0,9932. Také byl vypočítán limit (LOD = 0,0119 mg/l) a limit kvantifikace (LOQ = 0,0390 mg/l). Následně byla reakce převedena do SIA systému a byla provedena optimalizace reakčních podmínek v SIA systému. Kalibrační křivka vykazovala linearitu v rozmezí koncentrací 0,02 - 0,6 mg/l Al ve vzorku s korelačním koeficientem 0,9971. Zakřivení kalibrační křivky v rozmezí vyšších koncentrací bylo způsobeno nedostatečným množstvím činidla. Z kalibrační křivky...
|
|
|
Studium HILIC mechanismu vybraných UHPLC stacionárních fází
Ježková, Kateřina ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát: Kateřina Ježková Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Studium HILIC mechanismu vybraných UHPLC stacionárních fází Tato diplomová práce se zabývá studiem HILIC mechanismu stacionárních fází Ascentis HILIC Express (2,1 x 100 mm, 2,7 µm, výrobce Sigma-Aldrich), ACQUITY UPLC BEH HILIC (2,1 x 100 mm, 1,7 µm, výrobce Waters) a ACQUITY UPLC BEH AMIDE (2,1 x 100 mm, 1,7 µm, výrobce Waters). K testování vlastností kolon bylo vybráno celkem 15 analytů, které byly rozděleny do skupin na látky kyselé, bazické a neutrální. Měření probíhalo na přístroji UHPLC od firmy Waters za detekce pomocí PDA detektoru při vlnové délce 254 nm. K měření byla použita isokratická eluce. Průtok byl nastaven na 0,4 ml/min, nástřik byl 1-2 µl. Mobilní fázi tvořila ultračistá voda nebo pufr a acetonitril. Pro snadnější hodnocení byly z naměřených hodnot sestrojeny tabulky a grafy. Byly sestrojeny křivky závislostí lin-lin, log-lin a log-log. Kolony byly hodnoceny z hlediska selektivity a retence jednotlivých skupin analytů. Byl sledován vliv procentuálního zastoupení vody a acetonitrilu v mobilní fázi na retenci analytů. Dále byl sledován vliv pH. U kolon Ascentis HILIC Express a ACQUITY UPLC BEH...
|
|
|
Ověření praktické aplikace paralelního SIA stanovení anorganických aniontů v reálných vzorcích povrchové vody
Grebeníček, Lukáš ; Sklenářová, Hana (vedoucí práce) ; Chocholouš, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmaceutická fakulta v Hradci KrálovéKatedra Analytická chemie Kandidát Bc. Lukáš Grebeníček Školitel PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D Název diplomové práce: Ověření praktické aplikace SIA stanovení anorganických aniontů v reálných vzorcích povrchové vody Tato diplomová práce je rozdělena na dvě části. V první části se experimentální stanovení zabývá ověřením praktické aplikace stanovení vybraných aniontů (SiO3 2- , Cl-, NO2 - , NO3 - ) metodou SIA upravenou podle platných ISO norem pro metodu FIA. Druhá část porovnává stanovení dusitanů a dusičnanů metodou SIA a porovnávací metodou firmy MERCK. Stanovení rozpuštěných křemičitanů bylo provedeno podle České technické normy ČSN EN ISO 16 264. Tato technická norma pro metodu FIA je založena na reakci rozpuštěných křemičitanů ve vzorku s roztokem činidla. Činidlem je kyselý roztok molybdenanu, který reaguje s křemičitany a fosforečnany za vzniku kyseliny molybdátokřemičité a molybdátofosforečné. Kyselina molybdátofosforečná je rozložena roztokem kyseliny šťavelové a kyselina molybdátokřemičitá je redukována roztokem chloridu cínatého na výsledný produkt reakce molybdenovou modř, stanovenou spektrofotometricky při vlnové délce 710 nm. Stanovení chloridů podle platné České technické normy...
|
host ::
RSS.