|
|
Kapilární elektroforéza peptidů a proteinů
Sedláková, Pavla
Disertační práce se zabývá vývojem nových metod vhodných pro analýzu peptidů a proteinů. Pozornost je věnována především tzv. problematickým bílkovinám, tj. bílkovinám, které se adsorbují na stěnu kapiláry, a proto také studiu různých možností dynamického obalení vnitřní stěny kapiláry. V práci jsou využity různé módy kapilární elektroforézy, popřípadě její kombinace s hmotnostní spektrometrií. Teoretická část je věnována mechanismům CE separace peptidů a proteinů, problematice výběru vhodných separačních podmínek a možnosti potlačení adsorpce těchto látek ke stěně kapiláry. Dále jsou charakterizovány jednotlivé módy kapilární elektroforézy a jejich použití pro separace peptidů a proteinů, různé způsoby detekce a možnosti zlepšení citlivosti detekce. Experimentální část popisuje používané chemikálie, využívanou instrumentaci, materiál a metody použité pro tyto studie. Jsou zde také popsány postupy používané pro přípravu jednotlivých vzorků. Ve výsledcích a diskusi jsou shrnuty veškeré získané výsledky a poznatky. Tato kapitola je rozdělena do čtyř částí. Jednotlivé části jsou věnovány nově vyvinutým metodám určeným pro analýzu peptidů a proteinů. Jednalo se o: (i) Kapilární elektroforézu proteinů a peptidů s využitím ,,zátky" gelu Pluronic F 127. (ii) Studium interakce PAMAM dendrimerů se stěnou...
|
|
|
Marketing luxusní značky Dior
Sedláková, Pavla ; Procházková, Markéta (vedoucí práce) ; Horáková, Iva (oponent)
Hlavním tématem bakalářské práce je marketing luxusní módní značky Dior. Jejím cílem je popsat a analyzovat marketingové metody. Tato práce popisuje, jaké nástroje Dior při získávání zákazníka využívá a zda tyto nástroje fungují. Teoretickou částí práce jsem se zaměřila na představení marketingu, marketingového mixu a marketingové strategie. Dále jsem se věnovala luxusu. Metodologická část seznamuje s vybranými metodami bakalářské práce a hypotézami. Součástí práce je analýza vlastního dotazníkového šetření o vnímání značky Dior a pojmu luxus. Praktická část také obsahuje rozhovory s módními bloggerkami a jejich pohledu na luxus, luxusní značky a značku Dior.
|
|
|
Kapilární elektroforéza peptidů a proteinů
Sedláková, Pavla
Disertační práce se zabývá vývojem nových metod vhodných pro analýzu peptidů a proteinů. Pozornost je věnována především tzv. problematickým bílkovinám, tj. bílkovinám, které se adsorbují na stěnu kapiláry, a proto také studiu různých možností dynamického obalení vnitřní stěny kapiláry. V práci jsou využity různé módy kapilární elektroforézy, popřípadě její kombinace s hmotnostní spektrometrií. Teoretická část je věnována mechanismům CE separace peptidů a proteinů, problematice výběru vhodných separačních podmínek a možnosti potlačení adsorpce těchto látek ke stěně kapiláry. Dále jsou charakterizovány jednotlivé módy kapilární elektroforézy a jejich použití pro separace peptidů a proteinů, různé způsoby detekce a možnosti zlepšení citlivosti detekce. Experimentální část popisuje používané chemikálie, využívanou instrumentaci, materiál a metody použité pro tyto studie. Jsou zde také popsány postupy používané pro přípravu jednotlivých vzorků. Ve výsledcích a diskusi jsou shrnuty veškeré získané výsledky a poznatky. Tato kapitola je rozdělena do čtyř částí. Jednotlivé části jsou věnovány nově vyvinutým metodám určeným pro analýzu peptidů a proteinů. Jednalo se o: (i) Kapilární elektroforézu proteinů a peptidů s využitím ,,zátky" gelu Pluronic F 127. (ii) Studium interakce PAMAM dendrimerů se stěnou...
|
|
|
ANALYSIS OF NON-ENZYMATIC POSTTRANSLATIONAL MODIFICATED (GLYCATED) ALBUMIN BY NANO-LC/MS/MS
Šťastná, Zdeňka ; Pataridis, Statis ; Sedláková, Pavla ; Mikšík, Ivan
Posttranslational modifications of proteins are important reactions, which significantly affect the function of proteins in the organism. In principle, they can be divided into enzymatic and non-enzymatic modifications. Non-enzymatic reactions include glycation (earlier called nonezymatic glycosylation), which plays an important role in the development of chronic complications of diabetes mellitus, uremia, in the process of aging and degeneration of the brain.This work deals with the study of glycated albumins (human serum albumin and bovine serum albumin). Methodologically we used nano-liquid chromatography coupled to Q-TOF mass spectrometer. In vitro modified proteins were cleavaged by trypsin and arising peptides were separated on C18 nano column with trap-column. Peptides and their modifications were analysed by high-resolution Q-TOF mass spectrometer MaXis with precision determination of mass below 2 ppm. We found some modifications of proteins. Besides well known carboxymethyllysine new ones were determined - create mass shift 78, 132 and 218. Origin of these modifications is discussed and possible structure is presented. All found modifications were allocated to the structure of proteins and reactivity to various oxo-compounds was also examined
|
|
|
Open-tubular capillary electrochromatography with bare gold nanoparticles-based stationary phase applied to separation of trypsin digested proteins
Mikšík, Ivan ; Lacinová, Kateřina ; Zmatlíková, Zdeňka ; Sedláková, Pavla ; Král, V. ; Sýkora, D. ; Řezanka, P. ; Kašička, Václav
Open-tubular capillary electrochromatography (OT-CEC) using bare gold nanoparticles-based stationary phase has been applied to separation of tryptic peptide fragments of native and glycated proteins, bovine serum albumin and human transferrin. OT-CEC with bare gold nanoparticles stationary phase was found to be a suitable technique for separation of complex peptide mixtures originating from enzymatic (tryptic) digestion of native and glycated bovine serum albumin and human transferrin, and for glycation studies of these proteins.
|
host ::
RSS.