|
|
Detekce nestinu ve svalu za vývoje a při poranění s využitím in vivo modelu léze kosterního svalu
Pechancová, Adéla ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Čížková, Dana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Autor: Adéla Pechancová Název bakalářské práce: Detekce nestinu ve svalu za vývoje i při poranění s využitím in vivo modelu léze kosterního svalu Vedoucí práce: RNDr. Ivana Němečková, PhD. Úvod a cíl práce: Regenerace tkání i orgánů je v současnosti velmi aktuální téma. Do popředí se dostává obor regenerativní medicína, která je zaměřena na reparaci tkání. Intermediární filamentum nestin, který je považován za marker kmenových a progenitorových buněk zejména v nervové tkáni byl prokázán i v nezralých elementech svalové tkáně. Cílem této práce bylo dokázat pomocí imunohistochemických metod expresi nestinu při vývoji a při poškození kosterního svalu po injekci kardiotoxinu a následné regeneraci. Metody: V experimentální části jsme detekovali nestin na parafínových řezech především nepřímými imunohistochemickými metodami (LSAB, EnVision FLEX kit). U parafínového řezu myšího embrya bylo cílem zachycení vývoje kosterního svalstva. U parafínového řezu poraněného svalu bérce dospělé myši pomocí injekce kardiotoxinu nám šlo o zachycení míry poškození kosterního svalu a jeho následná schopnost regenerace v různých časových intervalech. Výsledky a závěr: Výsledky práce dokládají, že nestin je důležitý ukazatel správného embryonálního vývoje,...
|
|
|
Zavedení bezobratlého zvířecího modelu, Galleria mellonella, pro studium účinnosti in vivo, stávajících a nově syntetizovaných, kandidátních antituberkulotik
Kubíček, Jiří ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Farmacie Autor: Jiří Kubíček Vedoucí práce: RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Název diplomové práce: Zavedení bezobratlého zvířecího modelu, Galleria mellonella, pro studium účinnosti in vivo, stávajících a nově syntetizovaných, kandidátních antituberkulotik. Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo představit bezobratlý organismus, Galleria mellonella (G. mellonella), Pyralidae, jakožto alternativní, ekonomicky výhodnější a morálně lépe akceptovatelný model pro studie účinnosti antituberkulotických látek in vivo. V experimentální části této práce byla úvodem věnována pozornost optimalizaci metodických kroků, které by měly vést k vyšší reprodukovatelnosti a validitě získaných dat. Byl hodnocen vliv disagregačního suplementu, tyloxapolu, na růst bakterie Mycobacterium aurum (M. aurum). Byl rovněž mapován růst tohoto mikrobiálního kmene v kultivačním médiu, Middlebrook 7H9, za účelem určit exponenciální fázi růstu. V rámci druhé části experimentů byla provedena infekce larev G. mellonella bakteriálním kmenem M. aurum, s následnou administrací vybraných, komerčně dostupných antituberkulotik (anti-TB). Metody: Pro mapování exponenciální fáze růstu bakterie M. aurum byla provedena kultivace...
|
|
|
Carotuximab effects on inflammation during liver fibrosis development
Sharif, Navid ; Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Chronický zánět jater je proces, který vede k poškození jaterního parenchymu. Chronické poškození způsobené zánětem vede k tvorbě fibrotické tkáně, která může narušit normální fyziologii jater. Fibróza jater je celosvětově jednou z nejčastějších příčin morbidity a mortality. Nealkoholické ztukovatění jater (NAFLD) je patologický stav, který je charakterizován nadměrným hromaděním lipidů v hepatocytech (jaterní steatóza), což může vyvolat zánětlivou reakci v játrech. Carotuximab (TRC 105) je monoklonální protilátka, která se používá k léčbě řady nádorových onemocnění, včetně hepatocelulárního karcinomu (HCC). Cílem této studie bylo zjistit úlohu carotuximabu při zánětu jater na myším modelu jaterní fibrózy vyvolané 3,5-diethoxykarbonyl-1,4-dihydrocholidinem (DDC). Do této studie bylo zařazeno osmnáct tříměsíčních myších samců C57BL/6. Byly rozděleny do tří skupin: kontrolní skupina (n=6) - krmená standardní dietou po dobu 4 týdnů, skupina DDC (n=6) - krmená DDC dietou po dobu 4 týdnů, skupina DDC léčená carotuximabem (DDC+TRC, n=6) - krmená DDC dietou po dobu 4 týdnů s podáním TRC 105 (15mg/kg). Byl hodnocen vliv diety a TRC 105 na hmotnost myší a také vliv na poškození jater (hladiny alkalické fosfatázy, ALP). Vybrané markery zánětu (NF-kB, ICAM-1, COX-2, HO-1) byly hodnoceny pomocí Western blot...
|
|
|
Imunohistochemická analýza vlivu TRC105 na proces jaterni fibrózy
Hamerníková, Veronika ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Svobodová, Zuzana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Farmacie Autor: Veronika Hamerníková Vedoucí diplomové práce: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Název práce: Imunohistochemická analýza vlivu TRC105 na proces jaterní fibrózy Diplomová práce se zabývá analýzou exprese biomarkerů jaterní fibrózy jater myší. Cílem práce bylo otestovat účinek léčiva TRC105 (carotuximab) na modelu fibrotizovaných jater po 4 týdenním podávání DDC (3,5-diethoxykarbonyl-1,4-dihydro-2,4,6-kolidin). Byla zkoumána a porovnávána depozice kolagenu a exprese α-SMA, GFAP a endoglinu. Zvířata byla v experimentu rozdělena do 3 skupin: kontrolní skupina (n=6), DDC skupina (n=6) a TRC105 skupina (n=6). Kontrolní skupina byla krmena standardní dietou, DDC a TRC105 skupině byl v dietě podáván 0,1% DDC. Kontrolní a DDC skupině byl aplikován fyziologický roztok, skupině TRC105 bylo aplikováno léčivo. Analýza exprese pak byla prováděna na fixovaných jaterních řezech. Exprese kolagenu byla vyhodnocena barvením Picro-Sirius Red a exprese α-SMA, GFAP a endoglinu metodou imunohistochemie ve fluorescenčním zobrazení. Histologické barvení kolagenních vláken Picro-Sirius Red ukazuje, že DDC dieta vyvolává rozvoj jaterní fibrózy. Větší intenzita zabarvení v porovnání s...
|
|
|
Histologický obraz zdravých jater a porovnání s jaterní steatózou a cirhózou.
Čulíková, KIára ; Svobodová, Zuzana (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Játra jsou pro člověka velmi důležitým parenchymatozním orgánem. Jejich funkce může být poškozena různými vlivy. Mezi časté noxy patří hepatotropní viry a další mikroorganismy, alkohol a jiné toxiny včetně léků, metabolické poruchy, biliární obstrukce, nádory, genetické odchylky a jiné. Práce se soustřeďuje na porovnání histologických obrazů a klinické diagnózy jedinců zdravých, se steatózou a cirhózou. Teoretická část popisuje anatomii, fyziologii a histologii jater s perihepatální oblastí. Další kapitoly se zaměřují blíže na kliniku steatózy a cirhózy. V praktické části jsou popsány postupy přípravy preparátů zdravých a postižených jater, taktéž použité histologické metody pro barvení jednotlivých buněčných struktur. Výsledkem porovnání diagnóz histologických preparátů a klinických diagnóz jedinců je shoda 94,23 %. Přestože nalezená neshoda diagnóz je malá (5,77 %), je důvodem k zamyšlení nad vývojem a používáním nových či modifikovaných metod včetně tvorby různých kalkulátorů, zahrnujících i klinická data. Klíčová slova: histologie, játra, steatóza, cirhóza
|
|
|
Histopatologické změny na plicích související s onemocněním COVID-19
Šindelářová, Valerie ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Nachtigal, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Laboratorní diagnostika ve zdravotnictví Autor: Valerie Šindelářová, Dis. Vedoucí bakalářské práce: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Název práce: Histopatologické změny na plicích související s onemocněním COVID-19 Bakalářská práce je zaměřena na histopatologické změny na plicích souvisejících s virovým onemocnění COVID-19. V teoretické části se zabývá anatomií, histologií a funkcí plic. Dále je zde zmíněn přehled onemocnění plic, které jsou vyvolány virovými a bakteriálními původci. Hlavní část je pak věnována onemocnění COVID-19 a histopatologickým metodám zpracování nekroptického materiálu. V praktické části jsou uvedeny jednotlivé kazuistiky - pacienti, u nichž byla jako hlavní příčina úmrtí určen COVID-19 a u kterých toto onemocnění zanechalo viditelné změny na plicní tkáni. Rovněž je zde pro porovnání zařazen preparát fyziologických plic a plic pacienta s bronchopneumonií. COVID-19 je infekční respirační onemocnění způsobené virem SARS-CoV-2, které napadá celý organismus. Nejčastěji však způsobuje závažná respirační onemocnění - jako je zápal plic, selhání plic či syndrom akutní dechové tísně. Právě na histopatologické změny na plicích je zaměřena i tato bakalářská...
|
|
|
Komplexní morfologická, imunohistochemická, molekulárně genetická a klinicko patologická analýza vzácných typů karcinomů ovaria
Galko, Kamila ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Karcinomy ovaria jsou heterogenní skupina onemocnění, skládající se z různých histotypů. Představují nádory s nejvyšší letalitou ze všech nádorů ženských genitálu. V současnosti je přijímáno rozdělení do 5 základních typů: high grade serózní karcinom, low grade serózní karcinom, endometroidní karcinom, světlobuněčný karcinom a mucinózní karcinom. Malé procento tvoří velmi vzácné nádory, např. Brennerův nádor a další. Jedná se o velmi rozmanitou skupinu onemocnění, s různými prekurzory, morfologií, genetickými změnami, epidemiologickými rysy, klinickými projevy, léčbou a prognózou. Nejvíce prostudovaným karcinomem je high grade serózní karcinom ovaria, s vysokou incidencí (až 70 % karcinomů ovaria). Počet studií věnovaných tomuto typu nádoru se stále zvyšuje. Ostatní uvedené typy nádorů jsou méně časté a kvůli jejich nízké incidenci je počet studií, které se jim věnují, nižší. Díky rychlému rozvoji cílené léčby je žádoucí zjistit přesné charakterizace jednotlivých nádorů nejen na morfologické úrovni, ale i na úrovni imunohistochemické a genetické. Detekcí neoantigenů v nádoru můžeme nepřímo předpovědět mutační zátěž, hodnotí se i proteiny mismatch repair (MMR) nebo jiné změny vedoucí k chromozomálním aberacím. Na rozdíl od high grade serózního karcinomu jsou u ostatních typů nádorů znalosti...
|
|
|
Imunoflourescence na parafinových řezech a její využití při hodnocení renálních biopsií - zkušenosti jednoho centra
Buchová, Karolína ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Kudláčková, Zděnka (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví Autor: Bc. Karolína Buchová Vedoucí diplomové práce: RNDr. Ivana Němečková, Ph.D. Konzultant: doc. MUDr. Kristýna Pivovarčíková, Ph.D. Název práce: Imunofluorescence na parafínových řezech a její využití při hodnocení renálních biopsií - zkušenosti jednoho centra Úvod a cíl: Imunofluorescence (IFLU) se rutinně využívá k diagnostice nenádorových renálních onemocnění a má své místo i v transplantační renální patologii. Rutinně se toto vyšetření provádí na zmražených řezech z nefixované tkáně. Provádění imunofluorescenčních vyšetření na tkáni fixované formaldehydem a zalité do parafínových bloků má svá specifika a vyžaduje modifikaci metodiky a její verifikaci. Diplomová práce se zaměřuje na rozdíly ve zpracování při použití IFLU na zmražený materiál (frozen immunofluorescence, FIF) a tkáň fixovanou formolem a zalitou do parafínu (paraffin immunofluorescence, PIF) u renálních punkcí a porovnání výsledků získaných těmito metodami. Hlavní poznatky: Imunofluorescenční vyšetření je nedílnou součástí vyšetřovacího procesu při zpracování punkční biopsie ledvin, bez něj v drtivé většině případů definitivní diagnózu nelze s...
|
|
|
Carotuximab effects on inflammation during liver fibrosis development
Sharif, Navid ; Rathouská, Jana (vedoucí práce) ; Němečková, Ivana (oponent)
Chronický zánět jater je proces, který vede k poškození jaterního parenchymu. Chronické poškození způsobené zánětem vede k tvorbě fibrotické tkáně, která může narušit normální fyziologii jater. Fibróza jater je celosvětově jednou z nejčastějších příčin morbidity a mortality. Nealkoholické ztukovatění jater (NAFLD) je patologický stav, který je charakterizován nadměrným hromaděním lipidů v hepatocytech (jaterní steatóza), což může vyvolat zánětlivou reakci v játrech. Carotuximab (TRC 105) je monoklonální protilátka, která se používá k léčbě řady nádorových onemocnění, včetně hepatocelulárního karcinomu (HCC). Cílem této studie bylo zjistit úlohu carotuximabu při zánětu jater na myším modelu jaterní fibrózy vyvolané 3,5-diethoxykarbonyl-1,4-dihydrocholidinem (DDC). Do této studie bylo zařazeno osmnáct tříměsíčních myších samců C57BL/6. Byly rozděleny do tří skupin: kontrolní skupina (n=6) - krmená standardní dietou po dobu 4 týdnů, skupina DDC (n=6) - krmená DDC dietou po dobu 4 týdnů, skupina DDC léčená carotuximabem (DDC+TRC, n=6) - krmená DDC dietou po dobu 4 týdnů s podáním TRC 105 (15mg/kg). Byl hodnocen vliv diety a TRC 105 na hmotnost myší a také vliv na poškození jater (hladiny alkalické fosfatázy, ALP). Vybrané markery zánětu (NF-kB, ICAM-1, COX-2, HO-1) byly hodnoceny pomocí Western blot...
|
|
|
Impact of various fixation methods on bone marrow trepanobiopsies processing
Panócová, Miroslava ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Fikrová, Petra (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lekárskych vied Názov diplomovej práce: Vplyv fixácie na spracovanie trepanobiopsií kostnej drene Autor: Bc. Miroslava Panócová Vedúci diplomovej práce: RNDr. Ivana Němečková, PhD. Cieľ práce: Cieľom tejto diplomovej práce je zistiť, či dĺžka fixácie ovplyvňuje spracovanie trepanobiopsií kostnej drene. Metódy: Táto štúdia bola vykonávaná na dvanástich vzorkách trepanobiopsie kostnej drene fixovaných v 10% pufrovanom formalíne (NBF). Vzorky boli rozdelené do dvoch skupín na základe diagnózy. Skúmané boli tri dĺžky fixácie (24 hodín, 48 hodín a viac ako 48 hodín). Fixované vzorky boli v laboratóriu štandardne spracované, ofarbené vo farbiacom automate Shandon Varistain Gemini a odovzdané klinickému patológovi na hodnotenie. Výsledky: Jednotlivé dĺžky fixácie dosiahli skóre hodnotenia laborant/klinický patológ: skóre 24-hodinovej fixácie bolo 6,71/7,71, skóre 48-hodinovej fixácie bolo 6,57/7,71 a skóre viac ako 48-hodinovej fixácie bolo 7,42/8,42. Z hľadiska rozdelenia do skupín je v skupine C fixácia dĺžky 24 hodín ohodnotená na 6/7,66, fixácia dĺžky 48 hodín na 6,33/7,66 a fixácia viac ako 48 hodín na 8,33/9. V skupine D mala 24-hodinová fixácia skóre 7,25/7,75, 48-hodinová fixácia mala skóre 6,75/7,75 a viac ako...
|
host ::
RSS.