| |
|
Charakterizace a funkce transferinu z klíštěte \kur{Ixodes ricinus}
KADLECOVÁ, Jana
Iron metabolism is an important physiological process in ticks which has a great potential for an efficient tick control. This thesis is focused on the characterization and function assessment of the transferrin-related protein in the hard tick Ixodes ricinus. The full sequence Ixodes ricinus transferrin was determined and revealed that this protein is related to the insect transferrins of the type 2 (melanotransferrins). RNA interference silencing of tick transferrin did not affect tick feeding and survival suggesting that function of this protein is not directly involved in the iron transport.
|
|
Regulace exprese MHC molekul I. třídy a dalších imunoaktivních molekul na nádorových buňkách
Moravcová, Simona ; Vopálenský, Václav (oponent) ; Reiniš, Milan (vedoucí práce)
4 Abstract Regulation of the expression of MHC class I molecules and other immunoactive molecules on tumor cells The aim of this master thesis project was to characterize the effects of IFNγ, TNFα and of the epigenetic agents 5-azacytidine (5AC) and 5-aza-2'-deoxycytidine (5AZAD) on the expression of molecules important for antigen presentation and modulation of the immune responses against tumors (MHC class I molecules and other immunoactive molecules CD54, CD80, B7-H1, B7-H2 and CD1d) on tumor cells. The experimental model used for this purpose were the HPV16-associated murine tumor cell lines, either MHC class I positive or negative. The goal was to determine the changes in surface expression of these molecules after treatment by FACS studies and also the expression at the mRNA level using qPCR. Expression of these proteins was also compared in the experiments in vitro on tumor cell lines and ex vivo on tumor cells explanted from animals. The most interesting result is the observation that 5AZAD increases the expression of B7-H1 which inhibits T cell mediated immune response and that 5AZAD and IFNγ act synergistically in the induction of the expression of MHC class I, CD54 and B7-H1 molecules. Klíčová slova: imunoeditace, protinádorová imunita, HVP16, MHC glykoproteiny I. třídy, B7-H1, IFNγ, TNFα,...
|
| |
| |
|
The Study of Molecular and Biochemical Bases of Cytochrome C Oxidase Deficiency
Veselá, Kateřina ; Zeman, Jiří (vedoucí práce) ; Farghali, Hassan (oponent) ; Drahota, Zdeněk (oponent)
Předkládaná práce vznikla v Laboratoři pro studium mitochondriálních poruch Kliniky dětského a dorostového lékařství 1.LF UK v Praze, která je diagnostickým centrem pro pacienty z České a Slovenské Republiky. V průběhu posledních let bylo v naší laboratoři diagnostikováno přes 40 pacientů s izolovanou poruchou aktivity cytochrom c oxidázy (COX). Molekulární podstata onemocnění byla objasněna pouze u 12 pacientů, kteří nesli patologické mutace v SURF1 genu. Vzhledem k tomu, že v současnosti neexistuje žádná adekvátní léčba těchto onemocnění, hraje v přístupu k postiženým rodinám klíčovou roli genetické poradenství a možnost prenatální diagnostiky. Skutečnost, že mitochondriální poruchy mohou mít dvojí genetický původ (geny kódovány mitochondriální nebo jadernou DNA), se kterým jsou spojené i specifické vlastnosti různých typů dědičnosti, genetické poradenství založené pouze na biochemickém potvrzení COX deficience je značně obtížné nebo dokonce zcela nemožné. Cílem naší práce byla snaha odhalit molekulární podstatu deficitu COX u našich pacientů. Kromě optimalizace metod pro rutinní skríning a nalezení několika patologických mutací v genech pro asemblační proteiny, jsme měli možnost studovat také tkáňový dopad těchto mutací z pohledu biochemického, strukturálního a histochemického.
|
|
Hemoprotein Nitric Oxide Synthase in Aplysia Californica
Buganová, Michaela ; Martásek, Pavel (vedoucí práce) ; Pelouch, Václav (oponent) ; Druga, Rastislav (oponent)
Oxid dusnatý (NO) má nezastupitelnou roli v neuronálni signalizaci v řadě eukaryotických a prokaryotických organizmů. NO-syntázy (NOS) jsou hem-obsahujicí monooxygenázy, které v přítomnosti kyslíku katalyzují oxidaci L-argininu na NO a L-citrulin. NO produkovaný NOsyntázou je plynná molekula, která lehce difunduje přes membrány a zprostředkovává jak mezibuněčnou, tak i vnitrobuněčnou komunikaci. NO aktivuje enzymy vážici kovy včetně solubilni guanylátcyklázy (sGC), a tím zvyšuje hladinu druhého posla cyklického guanosinmonofosfátu (cGMP) (1, 2), který dále zprostředkovává řadu fyziologických a patologických procesů v neuronech. Nicméně, detailní charakteristika nitrergních neuronů a funkce NO v centrální nervové soustavě (CNS) není zcela objasněna. Cílem dizertační práce bylo charakterizovat neuronálni NOS, proteiny spojené s metabolismem neuronálni NOS a signální dráhu NO v CNS zeje kalifornského (Aplysia cali/ornica), populárního experimentálního modelu buněčných a systémových neurověd. Na biochemické úrovni byla zjištěná závislost NOS Aplysie (/IcNOS) na kalciu- kalmodulinu (Ca-CaM) a NADPH. Řada reprezentativních inhibitorů savčích NOS isoforem též snížila NOS aktivitu u Aplysie. Polyklonálni protilátky vytvořené proti krysí NOS hybridizovaly na Western blotu s purifikovanou /IcNOS (160 kDa protein) z...
|
|
Vliv parametrů ekvilibrace a mrazení ejakulátu býků na motilitu spermií po rozmrazení
Beránková, Monika ; Stádník, Luděk (vedoucí práce) ; Zuzana, Zuzana (oponent)
Hypotézou práce je předpoklad průkazných rozdílů v životaschopnosti spermií charakterizované vyšší motilitou a podílem živých spermií po rozmrazení inseminačních dávek vyrobených při aplikaci prodloužené ekvilibrace a nižšího teplotního gradientu mrazení.
Cílem práce bylo zjistit, zda mají odlišné podmínky ekvilibrace a mrazení vliv na životaschopnost spermií po rozmrazení.
V teoretické části práce jsou shrnuty informace o parametrech ejakulátu býků, metodách jeho hodnocení a především o jeho zpracování a dlouhodobé konzervaci. V průběhu let 2013-2015 byl na inseminační stanici odebírán ejakulát od předem vybrané skupiny plemenných býků, skupina čítala 5 býků s ohledem na stejný věk, plemeno a podmínky ustájení a ošetřování. Odebraný ejakulát byl po vstupním hodnocení rozdělen na několik částí, které byly zpracovány různým způsobem.
Část inseminačních dávek byla standardně ekvilibrována po dobu 120 minut, následně byla polovina pejet standardně mrazena metodou Direct Freezing dle standardní 3-fázové mrazicí křivky a polovina pejet dle odlišné 2-fázové mrazicí křivky. Druhá část inseminačních dávek byla ekvilibrována po dobu 240 minut a mrazena jako v předchozím případě dle 3-fázové standardní mrazicí křivky a dle 2-fázové mrazicí křivky. Zmrazené inseminační dávky byly poté uloženy v kontejneru s tekutým dusíkem při -196°C.
Byla hodnocena motilita spermií pomocí CASA, dále podíl živých a mrtvých spermií pomocí barvení Eosinem a Nigrosinem a reakce membrán spermií pomocí HOS testu, který zjišťuje reakci membrán bičíků spermií na vytvořené hypoosmotické prostředí.
Výsledky dokumentují vyšší progresivní motilitu spermií a podíl živých spermií na základě barvení (+5,57 %; +4,47 %) při použití prodloužené délky ekvilibrace (240 min) rozdíly oproti použití standardní délky ekvilibrace (P < 0,01). Souhlasně byly nalezeny i vyšší hodnoty celkové motility a HOS testu při použití prodloužené délky ekvilibrace, avšak rozdíly nebyly statisticky průkazné. Při mrazení na základě odlišných mrazicích křivek byly zjištěny vyšší hodnoty (v průměru +1,6 %) téměř u všech sledovaných parametrů spermií po rozmrazení při použití 3-fázové mrazicí křivky, nalezené rozdíly nebyly statisticky průkazné.
Při hodnocení parametrů ejakulátu u býků zde byly mezi býky nalezeny statisticky významné rozdíly (P < 0,01) v celkové a progresivní motilitě, podílu živých spermií a HOS testu, je tudíž patrná individualita mezi býky v odpovědi na metodiku zpracování ejakulátu.
Při hodnocení charakteristik pohybu spermií z CASA zde byly nalezeny statisticky významné rozdíly mezi býky u VCL, VSL, VAP, LIN, STR, WOB, taktéž mezi různými délkami ekvilibrace (P < 0,01), avšak rozdíly nebyly nalezeny u těchto parametrů pohybu spermií při použití různých mrazicích křivek.
|
| |
|
Léčba diabetes mellitus
Hrouzková, Šárka ; Tilšer, Ivan (vedoucí práce) ; Hrdina, Radomír (oponent)
DM je metabolická porucha charakterizovaná hyperglykémií při absolutním nedostatku endogenního inzulínu (DM1T), nebo při jeho relativním nedostatku (DM2T). DM1T je projevem destrukce B-buněk Langerhansových ostrůvků pankreatu většinou na autoimunitním podkladě. Chybění inzulínu vede k poruše využití glukózy a zvýšenému katabolismu tuků a bílkovin. Důsledkem je hyperglykémie, glykosurie, polyurie, žízeň případně až ketoacidotické kóma. DM2T jehož prevalence trvale narůstá, představuje významný lékařský, sociální a ekonomický problém. DM2T vzniká v důsledku inzulinové rezistence a později i vlivem nedostatečné sekrece inzulínu po jídle. K inzulínové rezistenci dochází nejčastěji v souvislosti s obezitou. V průběhu onemocnění se postupně prohlubuje defekt v sekreci inzulinu a dochází k rozvoji mikro- a makrovaskulárních komplikací, které jsou nejčastější příčinou úmrtí těchto nemocných. Léčba diabetu je činností velmi složitou, komplexní, která musí být postavena na souběžné intenzivní terapii a prevenci. Na spolupráci s pacientem, na edukaci, na individuálním nastavení léčby a terapeutických cílů. Patříme jen k málo stáům, kde existuje samostatný obor diabetologie. Cílem léčby je zajistit nemocnému dobrou kvalitu života a zejména zabránit vzniku a rozvoji dlouhodobých komplikací. Léčba DM1T: Po...
|
host ::
