|
| |
|
|
Biotechnologické využití rostlinných virů
Vaculík, Petr ; Čeřovská, Noemi (vedoucí práce) ; Ryšánek, Pavel (oponent) ; Petrzik, Karel (oponent)
Model terciární struktury kapsidového proteinu X viru bramboru (PVX CP) byl využit jako předloha pro navržení nových pozic pro vkládání antigenů za účelem jejich prezentace na povrchu částic PVX. Na základě tohoto modelu bylo vybráno sedm pozic (A-G), které se nacházejí na povrchu virionu. Jako antigen pro prezentaci byl použit 17 aminokyselinový epitop onkoproteinu E7 odvozený od lidského papilomaviru typu 16 (E7 epitop) ve fúzi s 6xHis kotvou nebo StrepII kotvou, a to v obou možných uspořádáních (6xHis-E7, E7-6xHis, StrepII-E7 a E7-StrepII). Modifikované PVX CP byly nejprve exprimovány v Escherichia coli MC1061, kde docházelo k tvorbě virových částic pouze v případě vložení inzertů StrepII-E7 a E7-StrepII do pozice A v PVX CP. Výsledky z transientní exprese modifikovaných PVX CP v Nicotiana benthamiana prokázaly, že nejvhodnější pozice pro prezentaci antigenů je pozice A, která je situovaná mezi 24. a 25. aminokyselinou v PVX CP. Dále bylo zjištěno, že virové částice mohly být detekovány pouze v přítomnosti StrepII kotvy a že stabilita těchto částic je ovlivněna uspořádáním inzertu (StrepII-E7 vs. E7-StrepII), neboť bylo možné purifikovat pouze virové částice nesoucí inzert v uspořádání E7-StrepII. Kromě využití PVX pro přípravu antigen prezentujícího systému byl také posouzen vliv infekce PVX na...
|
|
| |
|
|
Cultivated and wild growing forage crops – reservoirs of viruses and phytoplasmas
Fránová, Jana ; Petrzik, Karel ; Jakešová, H. ; Bečková, M. ; Sarkisova, Tatiana
Symptoms of mosaic, yellowing/reddening, phyllody, necrosis and dwarf have been observed in cultivated as well as wild growing forage crops. Red clover mottle virus (RCMV, Comovirus), clover yellow vein virus (Potyvirus), potato virus X, white clover mosaic virus (WClMV, Potexvirus), alfalfa latent and pea streak viruses (Carlavirus), new members of genus Cytorhabdovirus and Carlavirus were identified by sequencing. Bacilliform particles (ca 213 – 533 nm by 44 – 58 nm) of the genus Cytorhabdovirus, WClMV, alfalfa mosaic virus (Alfamovirus) and particles resembling members of the genus Badnavirus were observed on negatively stained preparations and ultrathin sections by electron microscopy and mechanically transmitted to host plants. WClMV, RCMV, bean yellow mosaic virus and new member of Potyviridae family were determined in wild growing plants. The occurrence of phytoplasmas belonging to different 16S ribosomal subgroups was confirmed (16SrI-B, 16SrI-C, 16SrX-A, 16SrXII-A).
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.