|
|
Genová exprese vysokoafinitního přenašeče cholinu u myšího modelu Alzheimerovy nemoci
Kurfürst, Helena ; Doležal, Vladimír (vedoucí práce) ; Krištofíková, Zdena (oponent)
: Cholin slouží ve všech savčích buňkách jako prekurzor pro syntézu hlavního membránového fosfolipidu fosfatidylcholinu a jako donor acetylových skupin. V cholinergních neuronech je navíc nezbytným prekurzorem neuromediátoru acetylcholinu. Schopnost buněk syntetizovat vlastní cholin nestačí pro jejich potřeby a tak musí být významná část cholinu vychytávána z extracelulárního prostředí. Omezení dostupnosti cholinu v mozku vede specificky k oslabování funkce cholinergních neuronů a obecně k poruchám obnovování membrán u všech buněk. Poruchy funkce cholinergní signalizace a související nervové činnosti jsou charakteristické pro Alzheimerovu nemoc. Cílem této práce bylo zjistit zda u myšího modelu Alzheimerovy nemoci APPswe /PS1dE9 dochází ke změnám genové exprese vysokoafinitních cholinergních přenašečů. Byla stanovena exprese specifického cholinergního vysokoafinitního přenašeče cholinu CHT1, který dopravuje cholin pro syntézu acetylcholinu a předpokládaného vysokoafinitního přenašeče cholinu CTL1, který se vyskytuje obecně ve všech buňkách a souvisí s dodávkou cholinu pro syntézu fosfolipidů. V mozkové kůře 5-6 měsíců starých myší nebyly v expresi obou genů při srovnání s kontrolami ze stejného vrhu zjištěny žádné změny ani na úrovni mRNA (kvantitativní PCR) ani úrovni proteinu (Western blot...
|
|
| |
|
| |
|
|
Cholinergní neurony a Alzheimerova choroba
Machová, Eva ; Doležal, Vladimír (vedoucí práce) ; Krištofíková, Zdena (oponent) ; Zvolský, Petr (oponent)
Alzheimerova choroba je degenerativní onemocnění mozku, jehož výskyt se zvyšuje s rostoucím věkem a které každoročně postihuje vyšší počet osob. Jejím typickým funkčním příznakem jsou poruchy různých mentálních funkcí včetně poruch krátkodobé paměti a rozvoje změn v chování. Je vyvolána zvýšenou produkcí p-amyloidu, která vede k typickému hromadění extracelulárních l3-amyloidových plaků. Přirozené stárnutí, a ve zvýrazněné formě i Alzheimerovu nemoc, doprovází úbytek cholinergních neuronů a ochabování cholinergniho nervového přenosu v mozku. Ve své práci jsem se zabývala změnami, ke kterým dochází v mozkovém cholinergním systému v průběhu stárnutí u kontrolních myší a u transgeního myšího modelu Alzheimerovy choroby. V této souvislosti jsem se také zabývala vlivem dokosahexaenové kyseliny (w-3 esenciální mastná kyselina) na udržování cholinergního fenotypu u neuronálni cholinergní buněčné linie NG1 08-15 a v pokusech ex vivo na mozkové kůře laboratorního potkana studiem účinku muskarinového agonisty xanomelinu, který byl vyvýjen jako lék pro selektivní posílení přenosu M1 muskarinovými receptory u Alzheimerovy choroby, na muskarinové M2 a M4 receptory. Z pokusů vyplývá, že transgen ní myši APPswe/PS1dE9, produkující zvýšené množství l3-amyloidu, vykazují úbytek některých markerů cholinergních synapsí a...
|
|
|
Mitochondriální protein 17β-hydroxysteroidová dehydrogenáza typu 10 v mozku genetického animálního modelu Alzheimerovy choroby (potkani McGill-R-Thy1-APP)
Hofmannová, Adéla ; Krištofíková, Zdena (vedoucí práce) ; Benek, Ondřej (oponent)
Transgenní potkani McGill-R-Thy1-APP jsou jedním z nejlepších animálních genetických modelů Alzheimerovy choroby (AD). Dochází u nich k intracelulární akumulaci rozpustné formy amyloidu β (Aβ) a kognitivnímu deficitu již ve věku 3 měsíců, ještě před depozicí extracelulárních plaků. Narušena je také kapacita mitochondriální bioenergetiky, konkrétně byla zjištěna dysfunkce enzymatické aktivity komplexu I dýchacího řetězce u potkanů ve věku 6 měsíců. Jádrem kódovaný protein mitochondriální matrix 17β-hydroxysteroidová dehydrogenáza typu 10 (17βHSD10) má řadu enzymatických i neenzymatických funkcí a je znám jako vazebný partner intracelulárního Aβ. U pacientů s AD byla zjištěna overexprese 17βHSD10 v mozku a zvýšené hladiny v mozkomíšním moku. 17βHSD10 je z cytoplasmy importován PINK1-Parkin-TOM/TIM mechanismem do mitochondriální matrix, kde interaguje např. s cyklofilinem D (CypD) a zabraňuje tak jeho translokaci na vnitřní mitochondriální membránu. Tím reguluje otevírání mitochondriálního transientního permeabilního póru vyvolané CypD. Zdá se, že by Aβ akumulovaný v mitochondriích mohl tuto regulaci ovlivnit. Cílem této práce bylo otestovat změny v hladinách 17βHSD10 v mitochondriích izolovaných z mozku 11měsíčních homozygotních potkanů McGillR-Thy1-APP a zjistit, zda interakce 17βHSD10 s peptidy Aβ...
|
|
| |
|
|
Farmakologický animální model Alzheimerovy demence (model Samaritán) a mediátorový systém N-methyl-D-aspartátového receptoru a oxidu dusnatého
Matušková, Hana ; Krištofíková, Zdena (vedoucí práce) ; Soukup, Ondřej (oponent)
Alzheimerova demence je neurodegenerativní onemocnění s nejvyšší prevalencí, které nelze v současné době vyléčit. Cílem diplomové práce bylo otestovat mediátorový systém NMDA receptoru a oxidu dusnatého u animálního modelu sporadické formy Alzheimerovy demence (potkaní model Samaritán; Taconic Pharmaceuticals, USA) a srovnat tyto změny se změnami v hipokampálním cholinergním systému a v kognitivních testech. Tento model vznikl chronickou unilaterální aplikací β-amyloidu42 a pro-oxidativních látek (heptahydrát síranu železnatého a L-buthionin-(S,R)-sulfoximin) in vivo pomocí osmotických pump Alzet® do levé komory mladého dospělého potkana kmene Long Evans. Cílem této práce bylo otestovat změny v expresi NR1/NR2A/NR2B podjednotek N-methyl-D-aspartátového receptoru a aktivity syntáz oxidu dusnatého (neuronální, endotelové a inducibilní) v pravém a levém kortexu. Naše výsledky ukazují na signifikantní změny v expresi NR2A/NR2B podjednotek NMDA receptoru a aktivitě iNOS v kortexu potkanů modelu Samaritán při srovnání s kontrolními potkany Long Evans. Tyto výsledky jsou v souladu s pozorovanými změnami v aktivitě cholinergních transportérů v hipokampu i v kognitivních testech (Morrisovo vodní bludiště a aktivní alotetické vyhýbání se místu). Naše výsledky podporují dvoufázový mechanizmus změn...
|
|
|
Cholinergní neurony a Alzheimerova choroba
Machová, Eva ; Doležal, Vladimír (vedoucí práce) ; Krištofíková, Zdena (oponent) ; Zvolský, Petr (oponent)
Alzheimerova choroba je degenerativní onemocnění mozku, jehož výskyt se zvyšuje s rostoucím věkem a které každoročně postihuje vyšší počet osob. Jejím typickým funkčním příznakem jsou poruchy různých mentálních funkcí včetně poruch krátkodobé paměti a rozvoje změn v chování. Je vyvolána zvýšenou produkcí p-amyloidu, která vede k typickému hromadění extracelulárních l3-amyloidových plaků. Přirozené stárnutí, a ve zvýrazněné formě i Alzheimerovu nemoc, doprovází úbytek cholinergních neuronů a ochabování cholinergniho nervového přenosu v mozku. Ve své práci jsem se zabývala změnami, ke kterým dochází v mozkovém cholinergním systému v průběhu stárnutí u kontrolních myší a u transgeního myšího modelu Alzheimerovy choroby. V této souvislosti jsem se také zabývala vlivem dokosahexaenové kyseliny (w-3 esenciální mastná kyselina) na udržování cholinergního fenotypu u neuronálni cholinergní buněčné linie NG1 08-15 a v pokusech ex vivo na mozkové kůře laboratorního potkana studiem účinku muskarinového agonisty xanomelinu, který byl vyvýjen jako lék pro selektivní posílení přenosu M1 muskarinovými receptory u Alzheimerovy choroby, na muskarinové M2 a M4 receptory. Z pokusů vyplývá, že transgen ní myši APPswe/PS1dE9, produkující zvýšené množství l3-amyloidu, vykazují úbytek některých markerů cholinergních synapsí a...
|
|
| |
|
|
Genová exprese vysokoafinitního přenašeče cholinu u myšího modelu Alzheimerovy nemoci
Kurfürst, Helena ; Krištofíková, Zdena (oponent) ; Doležal, Vladimír (vedoucí práce)
: Cholin slouží ve všech savčích buňkách jako prekurzor pro syntézu hlavního membránového fosfolipidu fosfatidylcholinu a jako donor acetylových skupin. V cholinergních neuronech je navíc nezbytným prekurzorem neuromediátoru acetylcholinu. Schopnost buněk syntetizovat vlastní cholin nestačí pro jejich potřeby a tak musí být významná část cholinu vychytávána z extracelulárního prostředí. Omezení dostupnosti cholinu v mozku vede specificky k oslabování funkce cholinergních neuronů a obecně k poruchám obnovování membrán u všech buněk. Poruchy funkce cholinergní signalizace a související nervové činnosti jsou charakteristické pro Alzheimerovu nemoc. Cílem této práce bylo zjistit zda u myšího modelu Alzheimerovy nemoci APPswe /PS1dE9 dochází ke změnám genové exprese vysokoafinitních cholinergních přenašečů. Byla stanovena exprese specifického cholinergního vysokoafinitního přenašeče cholinu CHT1, který dopravuje cholin pro syntézu acetylcholinu a předpokládaného vysokoafinitního přenašeče cholinu CTL1, který se vyskytuje obecně ve všech buňkách a souvisí s dodávkou cholinu pro syntézu fosfolipidů. V mozkové kůře 5-6 měsíců starých myší nebyly v expresi obou genů při srovnání s kontrolami ze stejného vrhu zjištěny žádné změny ani na úrovni mRNA (kvantitativní PCR) ani úrovni proteinu (Western blot...
|
host ::
RSS.