|
|
Studium regulace biosyntézy větvených aminokyselin u Corynebacterium glutamicum a konstrukce kmene produkujícího valin
Holátko, Jiří ; Pátek, Miroslav (vedoucí práce) ; Petříček, Miroslav (oponent) ; Svobodová, Jaroslava (oponent)
Souhrn L-valin je esenciáIníaminokyselin4 kteú má vellcý význam v medicíně a průmyslu. Proto stale roste potřeba účinnéhobakteriálního producenta této aminokyseliny. Druh Corynebacterium glutamiczzr je vhodným organismem pro konstrukci takovéhoprodukěního kmene a biosyntézavalinu i exprese genů zučastněnýchvjeho biosyntetické drrázejsou tudížintenzivně studovany. V této disertačnípráci byla provedena analýza regulace a modulace exprose genů"které: (1) kódují enzymy společnépro biosyntézuvšech tří větvených aminokyselin; (2) determinujíreakce v konkurenčníchbiosynteticlcých drahách L.isoleucinu a L- leucinu; a (3) genu, kteý kóduje klíčoý enzym katabolismupyruvátu.Výsledky byly využiý pro konstrukci produkčníchhnenů C. glutamicum s deregulovanou biosyntézou valinu, omezenou biosyntézou isoleucinu a leucinu a s optimáIní distribucí intermediátůvalinu. Produkčníkmeny byly manipulovany modifikací promotonl v chÍomosomu.Promotory gen.ůilvA, leuA, ilvD, ilvE a ace:E by|y modifikovfury místně-specifickoumutagenezíjejich oblastí -10. Všechny ýto změny zvýšily u mutantrích kmenůprodukci valinu. Zavedeni slabých promotorů P.ilvA a P.leuA do chromosomu C' glutamicum zpttsobilo sníženíbiosyntézy isoleucinu nebo leucinu a niíslednoubradytrofii na tyto aminokyseliny, která je ýhodnější neŽ auxotrofie navozsná...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.