|
|
The role of ORMDL3 in the IgE receptor signaling
Vávrová, Petra ; Bugajev, Viktor (vedoucí práce) ; Černý, Jan (oponent)
ORMDL proteiny jsou regulátory serin palmitoyl transferázy (SPT), enzymu, který katalyzuje první krok v syntéze sfingolipidů. Lidská a myší ORMDL rodina se skládá ze tří členů, ORMDL1, ORMDL2 a ORMDL3, jejichž sekvence aminokyselin mají mezi sebou vysokou podobnost. ORMDL3 exprese je spojována s několika chorobami, jako je astma počínající v dětství, Crohnova choroba, revmatoidní artritida, diabetes 1. typu a primární biliární cirhóza. Vysoká exprese ORMDL byla nalezena u makrofágů, T buněk, eozinofilů, epiteliálních buněk a žírných buněk. ORMDL3 je negativní regulátor signalizace zprostředkované vysoce afinitním IgE receptorem I (FcɛRI)v žírných buňkách. Ty hrají velmi důležitou roli v akutní fázi alergické reakce a při infekci mnohobuněčnými parazity. V první části této práce jsme určili expresi ORMDL rodiny v žírných buňkách izolovaných z peritonea (PDMCs) Ormdl3 knock out (KO) a wild type (WT) myší a dále jsme určili v těchto buňkách roli ORMDL3 v FcɛRI signalizaci. V další části této práce jsme studovali vztah mezi expresí rodiny ORMDL a komplexem SPT v žírných buňkách derivovaných z kostní dřeně (BMMCs) a linii v žírných buněk odvozených z kostní dřeně (BMMCL). BMMCL jsme transdukovali vektorem kódujícím SPTLC1 shRNA, abychom indukovali SPTLC1 knock down (KD) a porovnali je s kontrolními...
|
|
|
Lidské proteiny z rodiny myotubularinů a jejich úloha ve vnitrobuněčném transportu
Sixtová, Nikola ; Macůrková, Marie (vedoucí práce) ; Bugajev, Viktor (oponent)
Plazmatická membrána a endomembránové kompartmenty jsou složeny z mnohých lipidů. Malou, avšak významnou část z nich tvoří fosfatidylinositol (PtdIns) a jeho 7 derivátů souhrně nazývaných fosfoinositidy (PI). Ty vznikají různými kombinacemi fosforylací třetí, čtvrté a páte pozice inozitolového kruhu na PtdIns. Přestože každá membrána je paletou různých PI, přítomnost jednoho z nich na konkrétní membráně vždy převažuje a přiděluje jí tak specifickou identitu. Těsná regulace fosforylace a defosforylace PI je nezbytná pro fungování různých procesů závislých na správné distribuci PI, mezi které patří i vezikulární transport. Myotubulariny, proteiny z rodiny protein-tyrosin-fosfatáz, mají potenciál defosforylovat PtdIns(3)P, charakteristický PI časného endozomu, či PtdIns(3,5)P₂ dominantní PI pozdního endozomu, a to na třetí pozici inositolového kruhu. Pomocí této aktivity mají myotubulariny schopnost regulovat endozomálně-lyzozomální degradační dráhu. Z rodiny myotubularinů je dosud známo čtrnáct proteinů, z nichž osm je katalyticky aktivních a zbylých šest katalyticky inaktivních. Funkce aktivních členů se mohou v rámci buňky lišit s ohledem na lokalizaci, tkáňovou expresi či příslušné interakce. K regulaci aktivity a lokalizace aktivních zástupců přispívají katalyticky inaktivní myotubulariny, které...
|
|
|
Regulation of mast cell activation at the level of the high-affinity IgE receptor and STIM1
Bugajev, Viktor ; Dráber, Petr (vedoucí práce) ; Černý, Jan (oponent) ; Hašek, Jiří (oponent)
(CZ) Tato disertační práce je zaměřena na dva důležité regulátory signalizace žírných buněk. Prvním z nich je komplex vysoce afinního receptoru pro imunoglobulin E (IgE) (FcεRI), který se podílí na získaných (adaptivních) imunitních odpovědí a druhý je stromální interakční molekula 1 (STIM1), která monitoruje hladiny vápníku v endoplasmickém retikulu (ER) a po uvolnění Ca2+ z ER se podílí na otevření vápníkovým uvolněním aktivovaných vápníkových (CRAC) kanálů. I když je struktura FcεRI známá již mnoho let a byla popsána řada molekul asociovaných s tímto receptorem, přesný molekulární mechanismus zahájení a ukončení FcεRI signalizace zůstává nejasný. V této studii jsme vyhodnotili dosavadní poznatky o molekulárních mechanismech iniciace fosforylace FcεRI s důrazem na nově popsaný model, podle kterého vzájemné interakce mezi protein tyrosin fosfatázami (PTPs) a protein tyrosin kinázami (PTKs) nastaví práh tyrosinové fosforylace FcεRI (PTK-PTP interakční model). Dále jsme rozšířili poznatky týkající se topografie fosfatáz citlivých k oxidaci po stimulaci FcεRI v rámci klastrů transmembrálních adaptorových proteinů: T buňky neaktivující "linker" (NTAL) a "linker" aktivovaných T lymfocytů (LAT). Žírné buňky původem z kostní dřeně (BMMC) jsme použili jako modelový systém pro získání nových poznatků o...
|
host ::
RSS.