|
|
Mezidruhové srovnání plazmatické vazebnosti dvou radioaktivně značených komplexů
Smolová, Lenka ; Trejtnar, František (oponent) ; Lázníček, Milan (vedoucí práce)
Tato práce se zabývá nově připraveným bifunkčním chelátem DTPA-oxn, který má předpoklad k využití pro značení biologických makromolekul. Cílem bylo bifunkční chelát DTPA-oxn radioaktivně označit vhodným radionuklidem, v této práci bylo použito 90Y. U připraveného komplexu 90Y-DTPA-oxn byla stanovena vazebnost na plazmatické bílkoviny u lidské, hovězí, králičí a potkaní plazmy. Ke stanovení vazebnosti byla použita metoda rovnovážné dialýzy při 37 řC. Získané výsledky byly porovnány s výsledky stanovení vazebnosti klinicky rutinně využívaného bifunkčního chelátu DTPA, značeného 99mTc (99mTc-DTPA). Výsledky ukázaly, že plazmatická vazebnost těchto radioaktivně značených komplexů je nízká. Mezidruhové srovnání ukázalo, že hodnoty vazebnosti získané pro lidskou, hovězí a potkaní plazmu jsou srovnatelné, zatímco hodnoty vazebnosti u králičí plazmy jsou vyšší. Z výsledků lze říci, že vazebnost 90Y-DTPA-oxn nebude, podobně jako 99mTc-DTPA, faktorem, který může výrazně ovlivnit jeho biologické chování.
|
|
|
Studium plazmatické vazebnosti nově vyvíjených radiofarmak z hlediska mezidruhového srovnání
Smolová, Lenka ; Trejtnar, František (oponent) ; Lázníček, Milan (vedoucí práce)
Studium plazmatické vazebnosti nově vyvíjených radiofarmak z hlediska mezidruhového srovnání Abstrakt Tato práce se zabývá studiem vazebnosti vybraných radiofarmak na plazmatické bílkoviny z hlediska mezidruhového srovnání. Ke stanovení vazebnosti byla použita metoda rovnovážné dialýzy při 37 řC a experimenty byly provedeny s lidskou, hovězí, králičí a potkaní plazmou. Vazebnostní studie byly provedeny u tří nových radioaktivně značených komplexů a u klinicky rutinně používaného 99mTc-DTPA. Vazebnost byla stanovena u komplexu nového bifunkčního chelátu 90Y-DTPA-oxn a u dvou potenciálních radiofarmak ze skupiny radioaktivně značených receptorově specifických peptidů, a to 177Lu-DOTA- TATE a 177Lu-DOTA-MG-1. Získané výsledky byly zhodnoceny z hlediska mezidruhového srovnání a porovnány s hodnotami získanými pro klinicky používaný komplex 99mTc-DTPA. U naměřených dat bylo provedeno statistické zpracování dat. Výsledky tohoto zpracování ukázaly, že statisticky významně se liší hodnoty naměřené pro komplex 99mTc-DTPA mezi lidskou a hovězí plasmou a také mezi lidskou a králičí plasmou na hladině významnosti alfa 0,05. Výsledky všech provedených experimentů ukázaly, že plazmatická vazebnost je nízká a nebude tedy faktorem, který by výrazně ovlivnil farmakokinetiku studovaných látek.
|
|
|
Studium membránového transportu albuminu v ledvinách in vitro
Suchan, Martin ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Lázníček, Milan (oponent)
Mgr. Martin Suchan 2010 Hradec Králové Doc. PharmDr. František Trejtnar, CSc. Katedra farmakologie a toxikologie Abstrakt Cíl: Práce byla zaměřena na studium transportu albuminu in vitro pomocí akumulačních buněčných studií a s využitím dvou typů albuminu - albuminu značeného techneciem- 99m a FITC-albuminu značeného fluorescenční sondou. Součástí práce bylo ověření optimální přípravy a hodnocení kvality 99m Tc-albuminu. Cílem bylo porovnat akumulaci obou typů albuminu v ledvinných buňkách, zjistit vliv vybraných faktorů na akumulaci albuminu, stanovit typ mechanismu transmembránového transportu albuminu a zpracovat získané výsledky do formy odborného vědeckého sdělení. Metody: Ke značení albuminu techneciem-99 bylo použito optimalizovaného postupu za použití nízkého pH, vysoké koncentrace albuminu a optimální koncentrace cínatých iontů. Radiochemická čistota 99m Tc-albuminu byla ověřována chromatografií na papíře. Jako buněčné in vitro modely byly použity izolované nativní ledvinné buňky potkana a standardní linie ledvinných tubulárních buněk prasete LLC-PK1. V akumulačních studiích byl sledován uptake albuminu v závislosti na teplotě, čase, složení inkubační směsi, přítomnosti inhibitoru transportu a byl hodnocen vliv experimentálního modelu. U LLC-PK1 buněk byl též testován vliv stáří buněk na míru...
|
|
|
Studium vazebnosti dvou bifunkčních chelátů značených In-111 na bílkoviny plazmy
Drymlová, Petra ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent)
Distribuce mnohých léčiv v organizmu je výrazně ovlivněna jejich vazbou na bílkoviny krevní plazmy. Stanovení míry plazmatické vazebnosti je proto nezbytné pro předpovědění farmakokinetiky dané látky po podání do organizmu. V této diplomové práci byla stanovena plazmatická vazebnost nově syntetizovaného bifunkčního chelatačního činidla DTPA-oxn značeného 111 In na bílkoviny krevní plazmy člověka a tří živočišných druhů a byla porovnána s vazebností v praxi běžně užívaného radiofarmaka 111 In-DTPA. Pro měření byla použita metoda rovnovážné dialýzy při 37řC. Výsledky ukázaly, že vazebnost kompexu 111 In-DTPA-oxn na bílkoviny lidské, hovězí, králičí a potkaní plazmy je stejně jako u porovnávaného radiofarmaka 111 In-DTPA velmi malá, metodou rovnovážné dialýzy nekvantifikovatelná a z farmakokinetického hlediska bezvýznamná. U obou komplexů byla před samotným měřením plazmatické vazebnosti stanovena radiochemická čistota pomocí tenkovrstvé chromatografie na ITLC-SG. Její naměřená hodnota byla u obou sloučenin vyšší než 98%. Abstrakt: Distribuce mnohých léčiv v organizmu je výrazně ovlivněna jejich vazbou na bílkoviny krevní plazmy. Stanovení míry plazmatické vazebnosti je proto nezbytné pro předpovědění farmakokinetiky dané látky po podání do organizmu. V této diplomové práci byla stanovena plazmatická...
|
|
|
Příprava radioaktivně značeného albuminu
Suchan, Martin ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Lázníček, Milan (oponent)
Cíl: Tato diplomová práce byla zaměřena na vypracování pro naše podmínky optimální metody značení albuminu vybraným radionuklidem - techneciem 99m Tc. Naším úkolem bylo zvládnout příslušné metodiky potřebné k vypracování vhodného postupu značení albuminu uvedeným radioizotopem a rovněž otestovat i biologické chování značeného albuminu in vitro v buněčném experimentu s čerstvě izolovanými potkaními ledvinnými buňkami. Cílem diplomové práce bylo následně vyhodnotit provedené experimenty, porovnat získané výsledky s dalšími známými metodami značení albuminu techneciem 99m Tc a zpracovat získané výsledky do formy odborného vědeckého sdělení. Metody: Ke značení albuminu bylo použito nízkého pH a vysoké koncentrace albuminu. K redukci technecistanu 99m Tc bylo použito roztoku SnCl2.2H2O. Přečištění značeného albuminu proběhlo gelovou permeační chromatografií za použití Sephadexu G-50. Bicinchoninovou metodou byla stanovena poloha peaku albuminu ve frakcích. Stanovením chromatografického spektra samotného technecistanu byla stanovena poloha peaku technecistanu. Kontrola značení proběhla stanovením elučního spektra. Radiochemická čistota značeného albuminu byla ověřena chromatografií na papíře a následnou detekcí. K buněčnému experimentu byl použit čerstvě označený albumin. Byla sledována akumulace...
|
|
|
Studium transportních mechanismů receptorově specifických radiofarmak v ledvinných buňkách.
Cihlo, Jan ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Šimůnek, Tomáš (oponent) ; Komárek, Pavel (oponent)
Souhrn Renální akumulace radioaktivně značených specificky působících látek může být klinickým problémem při diagnostice, ale především při léčbě disponovaných malignit kvůli potencionální radionefrotoxicitě těchto látek. Jedním z cílů této práce bylo navržení vhodného in vitro modelu, který by umožňoval posuzování kumulačních charakteristik jednotlivých látek v ledvinách a hledání možných opatření vedoucích ke snížení míry zpětné reabsorpce buňkami renálního tubulu. Navržený model využívající renální OK buněčnou linii ke studiu transportních mechanismů radioaktivně značených specificky působících látek poskytuje další možnost posuzování radionefrotoxicity těchto látek. Diskutovaná in vitro metoda byla standardizována a využita při studiu transportních závislostí zástupců radioaktivně značených analogů somatostatinu (111In/125I/90Y/177Lu-DOTA-Tyr3-oktreotát, 111In/90Y/177Lu-DOTA-1-Nal3-oktreotid), protilátek (111In/90Y/99mTc-AntiCD66) a značeného albuminu (FITC-albumin, 99mTc-albumin). U všech studovaných radioaktivně značených látek byla zvládnuta technika radioaktivního značení a následné radiochemické analýzy pomocí metod HPLC a/nebo ITLC-SG. U studovaných specificky působící látek (radioaktivně značené peptidy a protilátky) nebyl prokázán podstatný vliv radioaktivního značení na buněčnou internalizaci....
|
|
| |
|
| |
|
|
Studium plazmatické vazebnosti radiofarmak značených 18F z hlediska mezidruhového srovnání18
Nováková, Dana ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Bárta, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Dana Nováková Konzultant: Prof. PharmDr. Ing. Milan Lázníček, CSc. Název rigorózní práce: Studium plazmatické vazebnosti radiofarmak značených 18 F z hlediska mezidruhového srovnání Práce je zaměřena na plazmatickou vazebnost tří vybraných radiofarmak značených radionuklidem 18 F z pohledu mezidruhového srovnání. Experimenty byly prováděny s využitím bovinní, prasečí, lidské a potkaní plazmy. Vazebnost na plazmatické bílkoviny se stanovila u tří radiofarmak, konkrétně u 18 F-FDG, 18 F-fluorocholinu a 18 F-thymidinu. Byly použity dvě metody: rovnovážná dialýza a ultrafiltrace. Podstata těchto metod spočívá v oddělení volné a vázané složky. Pro separaci je využita semipermeabilní membrána pro rovnovážnou dialýzu a speciální filtry (AMICON a VIVASPIN) pro metodu ultrafiltrace. Volná frakce je významným parametrem dostupnosti léčiva pro distribuci do tkání a buněk, interakci s receptory, exkreci a metabolizmus. Všechny experimenty byly prováděny při fyziologické teplotě 37řC. Výsledky ukazují nízkou plazmatickou vazebnost těchto tří látek u všech zkoumaných druhů a nedochází tedy k významnému ovlivnění farmakokinetiky studovaného materiálu. Nejvyšší hodnota plazmatické vazebnosti byla...
|
|
| |
host ::
RSS.