|
|
In vitro produkce embryí u koní
Babická, Dominika ; Šichtař, Jiří (vedoucí práce) ; Šimoník, Ondřej (oponent)
Cílem této práce je napsat literární rešerši zahrnující nejnovější poznatky z oblasti in vitro produkce embryí u koní. Aby bylo možné provést in vitro produkci embryí, je potřeba nejprve znát anatomii klisny a řízení pohlavní aktivity. Pohlavní soustava klisny se skládá ze dvou vaječníků, dvou vejcovodů, dělohy, pochvy a vulvy. Na rozdíl od jiných hospodářských zvířat probíhá vývoj oocytů v dřeni vaječníků. Pohlavní aktivita je řízena neurohumorálně a produkci hormonů zajišťuje centrální nervová soustava a endokrinní žlázy.
Pro in vitro produkci embryí se musí nejprve získat oocyty. Ty se sbírají buď z živých, nebo mrtvých klisen. U živých klisen se využívá ovum pick up (OPU, transvaginální aspirace oocytů pomocí ultrazvuku), laparotomie přes slabinu, nebo transkutánní punkce přes slabinu. Neinvazivní metodou je OPU, kdy se každý folikul několikrát vyplachuje, a v získaném roztoku se hledají oocyty. Invazivní, za to však úspěšnější metodou při získání oocytů, je transkutánní punkce přes slabinu. Z vaječníků z jatek se oocyty sbírají rozřezáním vaječníků, kyretáží, nebo aspirací. Velmi dobré výsledky v množství zíkaných oocytů má rozřezání vaječníků. Po sesbírání se oocyty nejprve musí roztřídit podle kvality kumulo-oocytárního komplexu na oocyty kompaktní, expandované, nebo degenerující. Kompaktní a expandované oocyty se rozlišují pod mikroskopem na základě morfologie okrajů těchto komplexů. Kompaktní oocyty mají čistou linii okraje, zatímco expandované oocyty mají okraje zdeformované a mají heterogenní cytoplazmu. Nejlepší výsledky pro produkci embryí vykazují expandované oocyty. Ty se nejprve musí nechat zrát v kultivačním médiu do stádia MII. Kultivační systém pro zrání oocytů se sestává z použití M199 s Earlovou solí, 10% fetálního bovinního séra a 5 mU - ml bovinního folikulostimulačního hormonu ve zvlhčené atmosféře 5% CO2 ve vzduchu při 38,2°C. Bylo zjištěno, že nezáleží na délce kultivace, výsledky vývoje blastocyst po 24 nebo 48 hodinách byly stejné.
Standardní IVF se u koní nedá provést kvůli změnám na zoně pellucidě a problematické kapacitaci spermií. Proto se používá intracytoplazmatická injekce spermie (ICSI), kdy se přímo do oocytu injikuje jedna znehybněná spermie. Před ICSI musí proběhnout kapacitace spermie pomocí kalcium ionoforu. Oocyt se dále kultivuje in vitro do stádia blastocysty. Další možností je přenos oplozeného oocytu přímo do děložního rohu klisny, nebo se uchovává pomocí kryokonzervace pro další použití.
|
|
|
Studium možnosti využití termoterapie při eliminaci spály růžovitých u kdouloně
Nečasová, Aneta
V jarním a letním období 2014 byly odebrány letorosty kdouloní s vegetativními pupeny. Na jaře to byly pupeny zimní a v létě pak pupeny založené na následující sezónu. Zdrojem letorostů byly kdouloně pěstované ve Školním zemědělském podniku Žabčice. K pokusům bylo postupně vybráno celkem 14 odrůd kdouloní. Na těchto odrůdách byl sledován výskyt původce choroby bakteriální spály růžovitých Erwinia amylovora. Byly testovány různé intervaly teplot kultivace, při kterých by mohla být přítomnost patogena eliminována. Dále byl ve spolupráci s pracovištěm Fytopatologie rostlin proveden test patogenity, který výskyt tohoto patogena neprokázal, avšak genový sad v Žabčicích touto chorobou napaden je. Nelze tedy s jistotou říci, zda se metoda termoterapie jeví jako účinný způsob pro léčbu této choroby.
|
|
|
Studium konverze somatických embryí smrku v rostliny
Psotová, Martina
Tato bakalářská práce se zabývá problematikou somatické embryogeneze u Picea abies. Součástí práce bylo srovnávání životaschopnosti rostlin při použití růstových regulátoru v médiu před procesem maturace a bez nich. Hlavní pozorování vlivů regulátorů bylo zaměřeno na poslední fázi maturace a fázi konverze v rostliny. Výzkum probíhal v laboratořích Mendelovy univerzity v Brně na Ústavu biologie rostlin. U podmínek v počátečních fázích byla uměle udržována temnostní fáze, stabilní teplota vzduchu 23+-2°C společně s umělou cirkulací vzduchu. V následujících fázích byla řízená fotoperioda, stabilní teplota vzduchu na úrovní 23+-2°C s umělou cirkulaci vzduchu v kultivační místnosti. Ve výzkumu se projevil vliv růstových regulátorů u rostlin v konečné fázi maturace. Stejný výsledek byl zjištěný i u konverze v rostliny, kde byl zaznamenán pomalejší vývoj kořenů a nadzemních částí rostlin u varianty s přídavkem regulátorů růstu.
|
|
|
Exprese transgenu bphC u ječmene
Sedlářová, Kateřina
Polychlorované bifenyly jsou toxické organické sloučeniny, charakteristické nízkou degradovatelností v životním prostředí a akumulací v rámci potravního řetězce. Z tohoto důvodu je dekontaminace znečištěných půd těmito látkami velice důležitou problematikou pro dnešní společnost. Dekontaminace ploch zamořených polychlorovanými bifenyly je však velmi komplikovaná z důvodu jejich fyzikálních a chemických vlastností. Vhodnou dekontaminační metodou jsou fytoremediace, které využívají k odstranění polychlorovaných bifenylů přirozené procesy rostlin. Prostřednictvím transformace rostlin můžeme zvýšit účinnost fytoremediací. V rámci diplomové práce byla zjišťována exprese remediačního genu bphC/His u T2 generace jarního ječmene (Hordeum vulgare L.), odrůdy Golden Promise na úrovni DNA, RNA a proteinu. Exprese transgenu byla detekována pomocí metod PCR, real-time PCR a Western blot. Pro získání dihaploidních homozygotních rostlin jarního ječmene, odrůdy Golden Promise obsahujícího fytoremediační gen bphC/His byla použita technika prašníkových kultur. V rámci diplomové práce byly vybrány rostliny T2 generace vykazující přítomnost vneseného genu pro test ověřující schopnost transgenních rostlin akumulovat polychlorované bifenyly.
|
|
|
Multiplikace česneku kuchyňského (Allium sativum L.) v podmínkách in vitro
Palíšek, Ondřej
Tato práce je zaměřena na studium multiplikace česneku kuchyňského a složení kultivačních médií. Nejlépe propracovanou metodou multiplikace je izolace apikálního meristému. Bylo vyzkoušeno mnoho druhů médií. Z výsledků vyplývá, že každá odrůda česneku má jiné nároky na živiny a růstové regulátory. V této práci můžeme najít popisy úspěšných metod multiplikace česneku a popis kultivačních médií včetně reakcí česneku Multiplikace rostlin in vitro představuje způsob množení, při kterém jsou ve sterilních podmínkách kultivovány dezinfikované části rostlin (explantáty) na živném médiu v kontrolovaných podmínkách za účelem získání celých nových rostlin či ozdravování rostlinného materiálu od patogenů. Tato metoda množení představuje metodu pro studium rostlin a stále častěji i metodu pro jejich komerční pěstování.
|
|
|
Sestavení a hodnocení setu in vitro jamek pro chondrogenní diferenciaci MSC buněk
Kříž, Marek ; Sekora, Jiří (oponent) ; Čmiel, Vratislav (vedoucí práce)
Bakalářská práce se zabývá podmínkami kultivace mezenchymálních buněk in vitro, poškození kloubní chrupavky a její náhrady pomocí chondrogenních buněk. Další část se věnuje jednotlivým druhům regulace teploty pro vyhřívání a udržení teploty uvnitř uzavřeného systému, typům detektorů teploty a vyhřívání pomocí peltierova článku. Sestavení vyhřívacího boxu, měřením teplotního profilu uvnitř boxu pomocí programu Labview, řízení pomocí platformy Arduino, přežíváním a diferenciací buněk.
|
|
|
Sestavení a hodnocení setu in vitro jamek pro chondrogenní diferenciaci MSC buněk
Kříž, Marek ; Sekora, Jiří (oponent) ; Čmiel, Vratislav (vedoucí práce)
Bakalářská práce se zabývá podmínkami kultivace mezenchymálních buněk in vitro, poškození kloubní chrupavky a její náhrady pomocí chondrogenních buněk. Další část se věnuje jednotlivým druhům regulace teploty pro vyhřívání a udržení teploty uvnitř uzavřeného systému, typům detektorů teploty a vyhřívání pomocí peltierova článku. Sestavení vyhřívacího boxu, měřením teplotního profilu uvnitř boxu pomocí programu Labview, řízení pomocí platformy Arduino, přežíváním a diferenciací buněk.
|
|
|
Studium faktorů ovlivňujících mikropropagaci oskeruše (Sorbus domestica L.)
Mášlová, Tamara
Diplomová práce byla zpracována na téma Studium faktorů ovlivňujících mikropropagaci oskeruše (Sorbus domestica L.). Pokusy byly prováděny v laboratoři in vitro v ústavu Mendeleum zahradnické fakulty v Lednici. Cílem práce bylo získání poznatků týkajících se kultivace oskeruše a rodu Sorbus L. obecně v podmínkách in vitro. Na základě získaných informací byla založena kultura in vitro. Jako materiál byly vybrány stromy rostoucí na pokusném pozemku Zahradnické fakulty v Lednici. Experimentálně bylo ověřeno složení kultivačního média za účelem růstu a multiplikace rostlin. Byl hodnocen vliv dvou rozdílných cytokininů BA (benzyladeninu) a zeatinu. Měřeny byly počet prýtů a délka prýtů. Nejvyšší multiplikační koeficient při hodnocení počtu nově vzniklých prýtů byla dosažena na médiu s obsahem BA 0,1 mg.l-1. U tohoto média však byla naměřena také nejmenší výška prýtů. U obou cytokininů platilo, že se stoupající koncentrací stoupá i počet prýtů a snižuje se výška prýtů.
|
|
|
Studium složení kultivačních médií pro množení odrůd meruněk metodou in vitro
Kadlecová, Eliška
Množení rostlin in vitro představuje vegetativní způsob množení, při kterém jsou dezinfikované části rostlin (explantáty) kultivovány na živném médiu ve sterilních podmínkách za účelem získání celých nových rostlin. Tato metoda, někdy nazývaná také mikropropagace, je často využívána pro účely výzkumu a stále častěji také pro komerční pěstování rostlin. Tato práce se zabývá studiem médií pro meruňky. Nejlépe jsou popsány kultivace meruňkových embryí a pupenů. Zkoušeny byly různé druhy médií a z výsledků vyplývá, že každý kultivar Prunus armeniaca L. má vlastní specifické nároky na živiny a růstové regulátory. V této práci můžete najít popisy mnoha úspěšně použitých médií a reakce různých meruňkových kultivarů na ně.
|
|
|
Kultivace révy vinné v in vitro podmínkách: certifikovaná metodika
Faltus, Miloš ; Skala, Ondřej ; Bilavčík, Alois ; Zámečník, Jiří
Réva vinná je stará, významná plodina, jejíž pěstování má u nás, především na jižní Moravě, dlouhou tradici. Je to vegetativně množená rostlina a její uchování v polních podmínkách je ovlivněno působením řady abiotických i biotických stresů. V závislosti na ročníku a lokalitě hrozí riziko vymrzání révy a rostliny bývají napadány celou řadou škodlivých patogenů. Kultivace explantátů révy vinné v aseptických podmínkách in vitro tato rizika eliminuje. Širší uplatnění tohoto postupu je však limitováno problémy s růstem explantátů révy vinné v in vitro podmínkách a častá genotypová závislost růstu explantátů. Tato metodika popisuje postup převodu materiálu do in vitro podmínek, postup multiplikace materiálu v in vitro podmínkách a podmínky pomalého růstu in vitro kultur révy vinné. Uživatelem metodiky je MZe, které ji uplatní v rámci „Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin, zvířat a mikroorganismů významných pro výživu a zemědělství“ kde metodika nahradí stávající metodiku.
Plný text:  PDF
|
host ::
RSS.