Název:
Změna exprese transportních proteinů během intrahepatální cholestázy u potkanů
Překlad názvu:
Alteration of transport proteins expression during intrahepatic cholestasis in rats
Autoři:
Kolouch, Jan ; Doleželová, Eva (vedoucí práce) ; Cermanová, Jolana (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2013
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Jan Kolouch Změna exprese transportních proteinů během intrahepatální cholestázy u potkanů Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Cílem diplomové práce bylo ověření cholestatického poškození jater prostřednictvím biochemické analýzy plazmy a analýzy exprese hlavních jaterních transportních proteinů (Ntcp, Oatp1a4, Bsep, Mrp2, Mrp3, Mrp4) pro uptake a eflux látek na úrovni mRNA. Metody: Potkani kmene Wistar (n = 6, v každé skupině; 280 - 320 g), byli rozděleni do dvou skupin: kontrolní skupina (LPS-K) a skupina LPS (lipopolysacharid podaný jednorázově i.p., 4 mg/kg). Vzorky krve a jater byly odebrány 12 hodin po aplikaci LPS. Biochemická analýza plazmy byla provedena pomocí Cobas Integra ® 800 a GC/MS. Změny exprese transportních proteinů na úrovni mRNA byly hodnoceny qRT-PCR. Výsledky: V porovnání s kontrolou byla ve skupině LPS pozorována významně zvýšená plazmatická koncentrace žlučových kyselin a zvýšená aktivita enzymů ALP a GMT. U žlučových kyselin došlo ke zvýšení koncentrace na 818 %, aktivita ALP byla zvýšená na 311 % a aktivita GMT na 2167 %. Intrahepatální cholestáza vedla k významnému poklesu exprese jaterních transportních proteinů na úrovni mRNA - Ntcp na 4,6 %, Oatp1a4 na 2,2 %, Mrp2 na 1,7 % a Bsep na 25 %. Závěr: Z...Jan Kolouch Alteration of transport proteins expression during intrahepatic cholestasis in rats Diploma thesis Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Pharmacy Background: The aim of the diploma thesis was the verification of cholestatic liver injury by biochemical analysis of plasma and analysis of the main efflux and uptake hepatic transporters (Ntcp, Oatp1a4, Bsep, Mrp2, Mrp3, Mrp4) at the mRNA level. Methods: Wistar rats (n = 6, in each group; 280 - 320 g) were divided into two groups: Control group (LPS-K) and LPS group (lipopolysaccharide was administred at once i.p., 4mg/kg). Blood and liver samples were collected 12 hours after LPS administration. Biochemical analysis of plasma was performed by Cobas Integra ® 800 and GC/MS. Changes of mRNA expression of the transporters were evaluated by qRT-PCR. Results: In comparison to control group, LPS group showed significantly elevated plasmatic levels of the bile acids and also elevated activity of ALP and GMT. Plasmatic levels of bile acids were elevated to 818%, activity of ALP was elevated to 311% and activity of GMT to 2167%. Intrahepatic cholestasis led to the significant decrease of mRNA levels - Ntcp to 4.6%, Oatp1a4 to 2.2%, Mrp2 to 1.7% and Bsep to 25%. Conclusion: According to the results of this study, it is...