Original title: Využití vysokoúčinných separačních metod pro analýzy biologicky aktivních látek
Translated title: Analysis of biologically active compounds using high performance separation methods
Authors: Adamusová, Hana ; Bosáková, Zuzana (advisor) ; Jelínek, Ivan (referee) ; Tůma, Petr (referee)
Document type: Doctoral theses
Year: 2017
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
V rámci první části disertační práce byla vypracována nová analytická metoda HPLC-MS/MS pro sledování koncentračních změn 17β-estradiolu (βE2) během kapacitace myších spermií in vitro. Kapacitace byla prováděna se třemi počátečními koncentracemi βE2 (200, 20 a 2 μg/L). Pro všechny koncentrace byl pozorován obdobný trend závislosti koncentrace nevázaného βE2 na čase kapacitace. Koncentrace βE2 se snižovala, aby dosáhla svého minima a poté se opět zvyšovala. Pozice minima se lišila pro jednotlivé testované koncentrace βE2. Experimentálně získané výsledky byly podrobeny kinetické analýze. Křivky proložené experimentálně získanými body vykazovaly autokatalytický charakter. Pro shodu mezi křivkami, získanými proložením experimentálními body, a teoreticky vypočítanými křivkami je nutné předpokládat, že prvním krokem je adsorpce βE2 na povrch spermií řízená Langmuirovou izotermou. Kinetická studie byla použita i pro studium působení fluoridů a fluorohlinitých komplexů na kapacitaci myších spermií. Bylo zjištěno, že teoreticky získané křivky vykazují velmi dobrou shodu s experimentálně získanými body, tento fakt potvrzuje mechanismus kinetiky kapacitace myších spermií. Ve druhé části této disertační práce byly vyvinuty dvě analytické metody pro chirální separaci aclidinium bromidu (AB) a tapentadolu... In the first part of this doctoral thesis, a new analytical HPLC-MS/MS method for monitoring of concentration changes of 17β-estradiol (βE2) during in vitro mouse sperm capacitation was developed. Capacitation was performed for three initial concentrations of βE2 (200, 20 and 2 μg/L). For all the concentrations a similar trend for the total unbound βE2 was observed. In general, the βE2 concentration decreased to reach its minimum and then increased again. The position of the minimum differed for the individual tested βE2 concentrations. Experimentally obtained results were subjected to the kinetic analysis. The curves fitted through the experimentally determined points displayed an autocatalytic character. For the agreement between the curves obtained by fitting through the experimental points and the theoretical calculated curves, it is necessary to assume that the first step is adsorption of βE2 onto the surface of the sperm controlled by Langmuir isotherm. The kinetic study was also used to study the effects of fluorides and aluminium fluoride complexes on the capacitation of mouse sperm. The experimental points were in very good agreement with the shape of the theoretical curves and this fact verifies the mechanism of the mouse sperm capacitation kinetics. In the second part of this work, two...
Keywords: capillary electrophoresis; chiral separation; drugs; endocrine disrupting chemicals; estrogenic pollutants; high-performance liquid chromatography; kinetic analysis; sperm capacitation; tandem mass spectrometry; chirální separace; endokrinní disruptory; estrogenní polutanty; kapacitace spermií; kapilární elektroforéza; kinetická analýza; léčiva; tandemová hmotnostní spektrometrie; vysokoúčinná kapalinová chromatografie

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/92791

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-369437


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Doctoral theses