Název:
Indukce endogenní RNAi v savčích buňkách
Překlad názvu:
Induction of endogenous RNAi in mammalian cells
Autoři:
Demeter, Tomáš ; Svoboda, Petr (vedoucí práce) ; Vopálenský, Václav (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2017
Jazyk:
eng
Abstrakt: [eng][cze] Double-stranded RNA (dsRNA), a double helix formed by two antiparallel complementary RNA strands, is a unique structure with a variety of biological effects. dsRNA can be introduced into the cell from exogenous sources or it can be produced endogenously. There are four basic mechanisms producing dsRNA: inverted repeat transcription, convergent transcription, pairing of sense and antisense RNAs produced in trans, and RNA dependent RNA polymerase-mediated synthesis dsRNA. Different mechanisms of production determine additional structural features of dsRNA, such as dsRNA termini, mismatches etc. These features may affect cellular response to dsRNA. Recognition of dsRNA can trigger several responses that act in sequence-specific or sequence-independent manners. The main sequence- specific response triggered by dsRNA is RNA interference (RNAi) is. Our laboratory has been studying mechanism of induction of RNAi in mammalian cells using one specific type of long dsRNA expression system. The dsRNA used in these experiments formed hairpin structure with long 5' and 3' single-strand RNA overhangs. We hypothesized that other dsRNA substrates might be more efficient than the one used in mammalian RNAi experiments since 2002. Accordingly, the main aim of my thesis was to compare efficiency of different dsRNA...Dvojvláknová RNA, je unikátna štruktúra s mnohými biologickými účinkami. Je tvorená z dvoch protichodných komplementárnych RNA vlákien, ktoré môžu byť produkované samotnými bunkami alebo sa do nich môžu dostať z vonkajších zdrojov. Existujú štyri hlavné mechanizmy jej vzniku: transkripcia z obrátených repetícií, konvergentná transkripcia, komplementárne párovanie (in trans) a syntéza sprostredkovaná RNA dependetnou RNA polymerázou. Rôzne mechanizmy produkcie určujú ďalšie štruktúrne vlastnosti dvojvláknových RNA, napríklad ich konce, chybne zaradenie nukleotidových báz a iné. Štruktúrne vlastnosti môžu ovplyvňovať to, akým spôsobom bunka odpovedá na prítomnosť dvojvláknových RNA. Táto odpoveď môže byť sekvenčne-špecifická alebo sekvenčne- nešpecifická. Hlavnou sekvenčne-špecifickou odpoveďou na prítomnosť dvojvláknovej RNA v bunke je RNA interferencia. Naša skupina študovala mechanizmus indukcie RNA interferencie v cicavčích bunkách pomocou špecifického typu dvojvláknovej RNA. Táto dvojvláknová RNA vytvára vlásenku s dlhými jednovláknovými presahmi na oboch koncoch. Predpokladali sme, že dvojvláknové RNA substráty s inými štruktúrami môžu byť efektívnejšie ako ten, ktorý sme požívali v našich experimentoch od roku 2002. Hlavným cieľom mojej diplomovej práce bolo porovnať účinnosť rôznych...
Klíčová slova:
Dicer; dvovláknová RNA; interferonová odpoveď; RNA interferencia; Dicer; double-stranded RNA; Interferon response; RNA interference